羧肽酶原B

作品数：11被引量：21H指数：3
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相关领域：生物学更多>>
相关作者：李素霞袁勤生张晓彦方宏清陈惠鹏更多>>
相关机构：华东理工大学江苏万邦医药科技有限公司西北农林科技大学军事医学科学院更多>>
相关期刊：《食品与药品》《生物化工》《中国生物制品学杂志》《生物工程学报》更多>>
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一种用于proCPB可溶性表达的新型表达系统
《生物化工》2022年第2期46-51,共6页文良柱 方宏清 韦炎龙 窦俊 
目的:构建一种新型可溶性表达系统,实现包括重组猪羧肽酶原B(proCPB)在内的目标蛋白的可溶性表达。方法:通过筛选不同来源的蛋白质二硫键异构酶并与巯基氧化酶进行共表达,并添加N末端标签对这两种蛋白的表达进行优化。结果:在大肠杆菌中...
关键词：可溶性表达系统 巯基氧化酶 蛋白质二硫键异构酶 猪羧肽酶原B 大肠杆菌 
重组猪羧肽酶原B在大肠杆菌中的表达与复性研究被引量：2
《药物生物技术》2010年第1期39-44,共6页张笑岩 张会勇 范豪 李泰明 刘景晶 曹荣月 
国家自然科学基金资助项目(No.30672464;30872393);江苏省自然科学基金资助项目(No.BK2007170)
利用大肠杆菌表达系统,表达猪源羧肽酶原B蛋白包涵体,并对包涵体的体外复性条件进行优化。对猪源羧肽酶原B基因进行设计,优化稀有密码子,并将基因片段插入到pET28a载体中,构建表达质粒pET28a-proCPB,并转化入BL21(DE3)中。通过乳糖诱导...
关键词：重组羧肽酶B 大肠杆菌 稀释复性 
诱导时机对羧肽酶原B包涵体质量和复性率影响的研究被引量：1
《食品与药品》2009年第4期17-20,共4页辛爱洁 王亚辉 李素霞 袁勤生 
目的研究诱导时机对羧肽酶原B包涵体质量和复性率的影响,探讨包涵体质量评价体系。方法在不同时间诱导产生重组羧肽酶原B包涵体,研究其变性和复性、对蛋白酶K的稳定性及在一定浓度盐酸胍溶液中的化学变性,分析诱导时间与包涵体复性率的...
关键词：羧肽酶B 诱导时机 包涵体 蛋白酶K 
重组羧肽酶原B甲醇酵母的构建与分泌表达
《食品与药品》2008年第6期5-7,共3页李素霞 袁勤生 
目的构建重组羧肽酶原B甲醇酵母工程菌株。方法将羧肽酶原B编码基因整合入酵母质粒,电转化至甲醇酵母中,His缺陷培养基和G418抗性筛选获得阳性克隆株。用大肠杆菌表达的羧肽酶原B免疫家兔制备羧肽酶原B兔抗血清;经发酵、甲醇诱导后,蛋...
关键词：羧肽酶原B 甲醇酵母 表达 多克隆抗体制备 蛋白质印迹 
猪胰腺羧肽酶B提取工艺中的激活条件与稳定性研究被引量：2
《中国生化药物杂志》2007年第4期250-253,共4页王福清 李素霞 郑勇锋 
目的研究猪胰腺羧肽酶B提取工艺中的激活条件以及激活后粗酶液的稳定性,并对酶进行纯化。方法胰腺匀浆、激活,硫酸铵盐析进行初步提取,采用疏水色谱、离子交换色谱和分子筛等方法进行纯化,对胰腺匀浆后的粗酶激活条件进行了研究,考察了...
关键词：羧肽酶B 羧肽酶原B 酶原激活 稳定性 
鼠羧肽酶原B在毕赤酵母中的表达、纯化与鉴定被引量：4
《生物工程学报》2007年第1期61-66,共6页王德解 苗林 陈宏 李彦英 陈惠鹏 方宏清 
国家高技术研究与发展项目基金(No.2004AA215172)资助~~
为了在毕赤酵母中表达鼠羧肽酶原B(procarboxypeptidaseB,proCPB)蛋白,以RT-PCR法从SD鼠胰腺细胞中克隆了proCPB基因,将其插入pPIC9载体,PEG1000介导转入毕赤酵母GS115细胞,在甲醇的诱导下,实现了proCPB在毕赤酵母中的成功表达。通过发...
关键词：羧肽酶B 毕赤酵母 表达优化 蛋白纯化 
Mg^(2+)和氨基酸对重组大肠杆菌BL21(DE3)生长及羧肽酶原B表达的影响被引量：6
《中国生物制品学杂志》2006年第1期81-83,共3页张文超 陈长华 李素霞 张晓彦 
目的研究Mg2+和氨基酸对重组菌株生长及表达pCPB的影响。方法通过摇瓶和发酵罐培养,观察不同Mg2+浓度和氨基酸对重组菌的生长和羧肽酶原B表达的影响。结果添加1g/L Mg2+能提高质粒的稳定性;添加氨基酸能使羧肽酶原B表达量由18·7g/L提高...
关键词：羧肽酶原B 重组大肠杆菌 发酵 表达 
凝血酶激活的纤溶抑制物及其抑制物的研究进展被引量：2
《国外医学（输血及血液学分册）》2005年第4期318-320,共3页黎明 张荣军 曹国宪 
江苏省自然基金项目(BK2001165)
凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)是一种含锌的金属羧肽酶原。TAFI通过消除部分降解的纤维蛋白上的赖氨酸残基,从而抑制纤维蛋白的进一步溶解。这一机理表明TAFI在纤维蛋白溶解及血栓溶解过程中具有重要的调节作用。对TAFI及其抑制物的深...
关键词：凝血酶激活 纤溶抑制物 溶栓药物 水蛭素 羧肽酶原B 
大鼠羧肽酶原B在毕赤酵母中的表达与培养条件优化被引量：1
《军事医学科学院院刊》2005年第3期244-247,共4页王德解 李彦英 陈宏 方宏清 陈惠鹏 
目的:利用毕赤酵母表达系统,表达大鼠羧肽酶原B(procarboxypeptidaseB,proCPB)蛋白,同时探讨最优表达条件,为规模化发酵生产羧肽酶B奠定基础。方法:以RTPCR法从SD大鼠胰腺细胞中克隆了proCPB基因,将其插入pPIC9载体,转入毕赤酵母Gs115细...
关键词：羧肽酶B 毕赤酵母 醇氧化酶启动子 发酵培养 
重组羧肽酶原B的复性方法研究
《微生物学通报》2005年第2期39-44,共6页张晓彦 刘海峰 袁勤生 
上海市重点学科资助项目
构建的羧肽酶原B表达质粒在大肠杆菌中获得高表达。但目的蛋白是以包涵体的形式存在。为了获得活性羧肽酶B,必须对其包涵体进行变复性。首先利用稀释复性确定了羧肽酶原B复性的最佳缓冲液;在凝胶过滤复性中,研究了柱长和洗脱流速对羧肽...
关键词：羧肽酶原B 包涵体 凝胶过滤 稀释 透析 Ni^2+亲合层析 
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