定向进化

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一种提高变体库多样性的寡核苷酸设计方法
《北京生物医学工程》2022年第4期338-343,共6页唐瑞 郑浩然 
国家重点基础研究发展计划(2017YFA0505502);中国科学院战略性先导科技专项(XDB38000000)资助。
目的基于定向进化的新特性蛋白质合成研究的关键在于基因变体库的生成以及目标蛋白质的筛选,而目标蛋白质筛选的成功率取决于基因变体库的多样性,针对采用从头寡核苷酸合成策略的基于基因芯片技术的基因变体库合成生物技术,本文研究并...
关键词：基因变体库 定向进化 寡核苷酸 基因重组 同源性 
一种高效的多点组合突变克隆构建方法（英文）
《生物工程学报》2020年第2期309-319,共11页王杰 逯晓云 刁爱坡 江会锋 
National Basic Research Program of China(973 Program)(No.2015CB755704);National Natural Science Foundation of China(No.31670100)~~
高质量的突变方法和高效的筛选方法相结合可以提高酶定向进化的效率。文中开发了一种高效的多点组合突变(Multi-points combinatorial mutagenesis,MCM)的克隆方法。MCM方法通过引入DNA组装、融合PCR和杂交技术,实现高效多点组合突变。...
关键词：组合突变 定向进化 高通量筛选 苯甲酰甲酸脱羧酶 
通过DNA改组技术定向进化赖氨酸脱羧酶基因cadA和ldc被引量：2
《生物加工过程》2015年第5期20-25,共6页张凯 蔡恒 汪晨 
国家重点基础研究发展计划(973计划)(2011CBA00807)
利用DNA改组技术对赖氨酸脱羧酶野生型基因ldc进行随机突变,在大肠杆菌Escherichia coli JM109中构建赖氨酸脱羧酶突变体库。从E.coli JM109和蜂房哈夫尼菌Hafnia alvei AS1.1009中分别克隆出赖氨酸脱羧酶基因cad A和ldc。查询NCBI数据...
关键词：DNA改组 定向进化 赖氨酸脱羧酶 蜂房哈夫尼菌 大肠杆菌 
系统代谢工程在微生物定向进化中的应用被引量：1
《中国科学：生命科学》2015年第7期652-664,共13页王献举 吕静 傅鹏程 
国家重点基础研究发展计划(批准号:2013CB734002,2011CB200902);国家自然科学基金(批准号:31270886,31300049)资助项目
系统生物学的迅速发展使人们能够从整体水平上理解细胞的生理生化特性并调控其代谢.系统代谢工程的主要应用之一是以系统生物学为基础对微生物进行定向进化,以期增强细胞对环境胁迫的耐受性,提高目标产品的产量.前者多采用全局转录机制...
关键词：系统代谢工程 全局转录机制工程 逆代谢工程 代谢网络 模拟基因敲除 
超突变细胞在进化工程中的开发与应用
《生物技术进展》2014年第4期229-235,共7页栾国栋 蔡真 李寅 
国家973计划项目(2011CBA00800)资助
通过进化工程技术改造微生物细胞的生理表型是生物技术和生物炼制领域的重要研究方向,但是现阶段的各种进化工程技术面临效率低或连续性差的问题。超突变细胞能够进行自发、连续的胞内诱变,将其应用于进化工程技术能够实现连续、高效的...
关键词：进化工程 超突变细胞 菌种改造 定向进化 
R-2-氯丙酸脱卤酶的定向进化被引量：1
《生物加工过程》2013年第1期65-69,共5页秦迎春 刘鹏 杨立荣 徐刚 吴坚平 
国家重点基础研究发展计划(973计划)资助(2011CB710800);国家高技术研究发展计划(863计划)资助(2011AA02A209);国家自然科学基金面上项目资助(21076187)
通过易错PCR手段将R-2-氯丙酸脱卤酶定向进化,并使用基于Cl-浓度显色反应的高通量筛选得到有效突变子库,发现突变子DehDIV-G2和DehDIV-E7的酶比活力分别提高25.2%和38.7%。通过SYBYL对酶与底物进行分子对接显示,DehDIV-G2的活化能下降0....
关键词：2-氯丙酸 脱卤酶 定向进化 分子对接 
S-2-氯丙酸脱卤酶的定向进化及其应用被引量：4
《中国生物工程杂志》2012年第5期66-72,共7页刘鹏 林春娇 杨立荣 徐刚 吴坚平 
国家"973"计划(2011CB710805);国家自然科学基金面上项目(21076187)资助项目
为提高S-2-氯丙酸脱卤酶的活力,通过易错PCR的方法将源于假单胞菌(Pseudomonas sp.CGMCC 3267)的脱卤酶(DehII)进行定向进化,进化酶DehII-B2的比活提高3.9倍。同源模建两者的三维结构,并与底物进行分子对接。结果表明,突变位点为A7I,进...
关键词：2-氯丙酸 脱卤酶 定向进化 分子对接 
基于荧光激活细胞分选技术的超高通量酶活性筛选方法及其应用被引量：6
《生物化学与生物物理进展》2012年第4期299-306,共8页马富强 冯雁 杨广宇 
国家重点基础研究发展计划(973)(2011CBA00800);国家自然科学基金(30970632;31070056;30821005)资助项目~~
基于荧光激活细胞分选(FACS)技术的超高通量酶活性筛选方法是新出现的一类高通量筛选技术.它利用流式细胞仪高灵敏度、高通量的特点,能以极高的速度(>108/天)对大容量酶基因文库进行筛选.FACS筛选技术的出现突破了常规筛选方法低效、耗...
关键词：荧光激活细胞分选 高通量筛选 酶 定向进化 
酶的定向进化研究及其在工业生物催化中的应用被引量：8
《生物加工过程》2011年第4期69-75,共7页苏龙 庄宇 何冰芳 
国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(2009CB724700);国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2007AA021306)
综合概括了各种蛋白质改造与微生物代谢途径改造的非理性定向进化技术的原理、特点,介绍了这些技术在高性能工业生物催化剂改造中的应用。
关键词：定向进化 DNA改组 易错PCR 工业生物催化 
应用易错PCR定向进化甘油脱氢酶被引量：1
《华侨大学学报（自然科学版）》2010年第6期661-666,共6页李梓君 方柏山 杨仲丽 刘嘉 
国家重点基础研究发展(973)计划项目(2006AA020103);国家自然科学基金资助项目(20676048)
经过连续易错聚合酶链式反应(Error-Prone PCR)向克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)甘油脱氢酶基因中引入突变,并构建突变文库.依据突变体催化番红O显色的特性,采用琼脂平板法和96微孔板法相结合的高通量筛选方法,成功获得突变体gldA-...
关键词：甘油脱氢酶 克雷伯杆菌 定向进化 易错聚合酶链式反应 
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