耐热碱性磷酸酯酶

作品数:11被引量:41H指数:3
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耐热碱性磷酸酯酶的研究进展被引量:2
《药物生物技术》2004年第3期207-210,共4页龚宁萍 陈朝银 
云南省应用基础研究基金项目资助 No .98C0 95M
叙述耐热碱性磷酸酯酶 (TAP)的来源、性质、热稳定性及应用。分析影响TAP酶活的因素 ,通过对酶辅助因子的研究 ,探索酶的活性位点。介绍了提高耐热AP的酶比活及产量的途径。
关键词:耐热碱性磷酸酯酶 热稳定性 辅助因子 
耐热碱性磷酸酯酶的功能结构域的定位被引量:3
《中国生物化学与分子生物学报》2001年第1期80-84,共5页季朝能 盛小禹 姜涛 金 毛裕民 
国家自然科学基金!资助项目 (No.39870 40 2 )
为了确定耐热碱性磷酸酯酶 (TAPND2 7)发挥活性所必需的功能结构域 ,通过 PCR介导的诱变缺失 ,得到了 N端分别缺失 8、1 6、2 5个氨基酸的 3个缺失体 p TAPN8、p TAPN1 6和p TAPN2 5以及 C端分别缺失 1 0和 30个氨基酸的两个缺失体 p TA...
关键词:耐热碱性磷酸酯酶 功能结构域 定位 热稳定性 
通过定点诱变法研究耐热碱性磷酸酯酶的活性位点、耐热性和亲热性被引量:1
《Acta Genetica Sinica》2000年第12期1100-1107,共8页季朝能 张冰 姜涛 盛小禹 毛裕民 
国家自然科学基金项目!(批准号:39870402)
通过对耐热碱性磷酸酯酶TAPND27活性位点S(69)两侧的E(68)和S(70)的定点突变,得到了3个突变子E68S、S70A和E68SS70A。在蛋白纯化的基础上测定了3个变体的一些酶学性质,与TAPND27相比,E68S的比活力上升了8倍,Tm下降了3℃,最...
关键词:耐热碱性磷酸酯酶 定点诱变 热稳定性 亲热性 
基因工程耐热碱性磷酸酯酶的表达与分离纯化
《洛阳医专学报》2000年第4期278-280,共3页朱运良 申成斌 季朝能 李朴 盛小禹 
目的 获得可用于探针的非放射性标记的耐热碱性磷酸酯酶。方法 把耐热碱性磷酸酯酶的基因克隆入质粒pJLA5 0 3上 ,在E .coliMph44中表达。表达的酶用聚乙烯亚胺沉淀核酸 ,热变性 ,硫酸铵沉淀 ,层析等方法纯化。结果 经表达纯化后每...
关键词:表达 蛋白纯化 耐热酶 碱性磷酸酯酶 
耐热碱性磷酸酯酶(FD-TAP)的三维结构分析被引量:1
《复旦学报(自然科学版)》2000年第4期394-396,共3页戴林森 王健 高大操 季朝能 盛小禹 毛裕民 
国家自然科学基金资助项目!(39870 40 2 )
用计算机图像模拟 ,能量极小化和分子动力学方法 ,以大肠杆菌碱性磷酸酯酶 (BAP)为主要结构模板 ,构建了耐热碱性磷酸酯酶 (FD TAP)的三维结构 ,并分析了它的结构特征 ,从而为酶蛋白的结构。
关键词:磷酸酯酶 同源模建 三维结构分析 工具酶 
信号肽去除的耐热碱性磷酸酯酶FD-TAP在大肠杆菌中的亚克隆和高表达被引量:23
《生物工程学报》2000年第6期690-694,共5页季朝能 白晓阳 盛小禹 张冰 毛裕民 
国家自然科学基金资助项目!( 3 9870 40 2 )
通过计算机辅助分析 ,发现在耐热碱性磷酸酯酶 (简称FD TAP)的N端存在 2 6个氨基酸的信号肽序列。但一般信号肽切点并非是完全专一的 ,所以利用基因工程手段将FD TAP的N端分别缺失 2 4、2 5、2 6和 2 7个氨基酸 ,得到了N端分别缺失 2 4...
关键词:耐热碱性磷酸酯酶 信号肽 表达 
耐热碱性磷酸酯酶(TAPND27)的表达、纯化和性质测定被引量:6
《复旦学报(自然科学版)》2000年第3期297-301,307,共6页季朝能 盛小禹 白晓阳 姜涛 毛裕民 
国家自然科学基金资助项目 (39870 40 2 )
通过分离纯化和酶学性质测定 ,确定耐热碱性磷酸酯酶 (TAPND2 7)为八聚体 ,最适反应温度为 6 5℃ .在 99℃保温 30min仍保留 49 4%的活性 ,在质量分数为 5 %的SDS和Tween2 0体系中 ,依然有 70 %以上的酶活性 ,并且有很宽的pH稳定范围 ....
关键词:热稳定性 表达 纯化 TAPND27 蛋白质 
一个耐热碱性磷酸酯酶突变型的研究被引量:2
《Acta Genetica Sinica》2000年第4期361-368,共8页袁有忠 赵思汇 周宗祥 季朝能 盛小禹 毛裕民 
国家自然科学基金!39870402
为了进一步揭示蛋白质的耐热机制,对含有耐热碱性磷酸酯酶(FD-TAP)的表达质粒pTAP503F进行了随机诱变,用菌落原位显色法从约5000个转化子中筛选到4个耐热性下降的突变型克隆,并对其中1个克隆(TAPM3)进...
关键词:耐热碱性磷酸酯酶 随机诱变 蛋白质 耐热机制 
耐热碱性磷酸酯酶FD-TAP的信号肽研究
《云南大学学报(自然科学版)》1999年第S3期377-377,共1页姜涛 季朝能 张冰 盛小禹 毛裕民 
关键词:耐热碱性磷酸酯酶 信号肽 mR-NA二级结构 
耐热碱性磷酸酯酶的活性区域定位
《云南大学学报(自然科学版)》1999年第S3期377-378,共2页郑佐华 季朝能 盛小禹 毛裕民 
关键词:耐热碱性磷酸酯酶 活性区域 定位 
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