定点诱变

作品数：115被引量：248H指数：8
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通过定点突变提高纳豆激酶纤溶活性和热稳定性被引量：2
《微生物学杂志》2023年第2期21-27,共7页于晓淼 赵允章 王锋超 孙悦 刘宏生 
辽宁省“兴辽英才计划”项目(XLYC2002045);辽宁省教育厅面上项目(LJKZ0088);沈阳市科技特派团项目(21-116-3-48)。
纳豆激酶(Nattokinase, NK)是一种纤溶酶,可溶解血栓,常用于治疗心血管疾病(CVDs)。然而,野生型NK往往表现出很少的纤溶能力和较低的热稳定性,针对如何提高NK的热稳定性和活性开展研究。使用重叠延伸PCR法将NK中位于194位的Ser替换为Pro...
关键词：纳豆激酶 定点诱变 纤溶活性 热稳定性 分子动力学模拟 
例谈基于PCR的基因定点突变技术
《中学生物学》2023年第2期4-7,共4页朱栋栋 
近年来,各地多次考查重叠延伸PCR、大引物PCR等新型PCR技术,但不少一线教师对其理解不够透彻。除此之外,重组PCR、环状质粒PCR等也能对基因进行定点诱变,其原理不完全相同,使用情境也各有侧重。本文以基因定点突变技术为线索,将相关的几...
关键词：一线教师 教学素材 拓展视野 定点诱变 重叠延伸PCR 使用情境 PCR技术 
犬黑皮质素受体-4突变体D298N真核表达载体的构建及其在MDCK细胞中的表达
《安徽农业科学》2022年第20期76-80,共5页宋立先 刘春红 王占青 高蓉 徐学振 
辽宁省科技基金项目(2007408001-6)。
[目的]引进犬MC4R突变点,构建突变体D298N表达载体并在MDCK细胞中获得表达。[方法]设计带突变点D298N引物,以犬MC4R基因组DNA为模板,采用普通PCR和Overlap-PCR扩增编码区,将产物克隆、酶切、测序鉴定。将测序正确的基因连接到pcDNA3.1-m...
关键词：犬 黑皮质素受体-4 真核表达载体 定点诱变 D298N MDCK细胞 
例析PCR引物的设计原则问题被引量：1
《中学生理科应试》2022年第10期55-56,共2页陈兆亮 张英锋 李长江 康珍 
河北省“三三三人才工程”资助项目《基于深度学习的中学生物课堂教育教学的研究》的研究成果,课题编号A202001088;河北省教育技术中心2022年度立项课题《“互联网+”下高中生物智慧课堂教学方式的变化分析》的研究成果,课题编号hbdj2022066。
PCR技术是一项能在生物体外根据DNA半保留复制的原理,对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术,能在短短的几个小时内,实现DNA分子百万份拷贝的复制.该技术常用于遗传病的诊断、古生物学物种亲缘关系的鉴定、DNA序列鉴定、刑事案件犯...
关键词：半保留复制 基因工程技术 定点诱变 刑事案件 高考试题 古生物学 PCR引物 遗传病 
烟碱型乙酰胆碱受体α3[K152E,E184D,Q195T]β4突变型的构建及其功能研究被引量：2
《药学学报》2022年第4期1054-1062,共9页陈舒苗 于津鹏 张笑凡 朱晓鹏 罗素兰 长孙东亭 
国家自然科学基金资助项目(41966003)。
α3β4烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs)是成瘾、癌症和肥胖等重要疾病的潜在新靶点。本研究对大鼠(rat,r)α3β4 nAChRs的α3亚基上的3个氨基酸位点同时进行突变,将这3个位点分别突变为rα6亚基上与α3...
关键词：PCR介导定点诱变 α3β4烟碱型乙酰胆碱受体突变型 电生理学功能研究 激动剂 通道开放分子机制 
PCR技术典例赏析
《中学生理科应试》2021年第8期51-53,共3页侯国顺 
PCR技术应用非常广泛,可用于扩增目的基因,制作探针,引入定点突变,定量检测DNA等.本文通过典型例题介绍了PCR技术的三种题型.一、利用PCR技术进行定点诱变例1通过引物设计运用PCR技术可以实现目的基因的定点突变.
关键词：定点诱变 定点突变 PCR技术 典型例题 引物设计 目的基因 定量检测 
环状定点诱变技术在载体构建中的应用
《中国当代医药》2020年第26期32-34,38,F0004,共5页王斌 邢体坤 宋路萍 杨振苹 荆新蕊 王亚萍 黄帅 张静静 
“重大新药创制”科技重大专项(2018ZX09736010)。
目的探讨环状定点诱变技术在目标质粒单碱基突变,酶切位点修改和片段删除中的应用。方法设计包含目标突变,部分互补且5’端含有5~8 bp突出的引物对,环状质粒作为模板进行扩增,甲基化酶DpnI酶消化去除模板质粒。转化DH5α感受态进行缺口...
关键词：环状定点诱变 片段删除 酶切位点 PCR扩增 
基于PCR的质粒快速定点诱变方法建立与评价被引量：3
《中国生物化学与分子生物学报》2018年第1期61-68,共8页陈凡 傅一勤 林梅西 汪少芸 
科技部国家重点研发计划专项(No.2016YFD0400202)和国家自然科学基金项目(N0.31771922,No.31571779)
基因突变对生命的进化具有重要意义,针对质粒的DNA定点诱变技术也是基因工程、蛋白质工程研究中的重要手段之一。为了提高质粒定点诱变的效率,本研究利用引物部分重叠的设计方案,使用Tm值相对固定的引物设计模式,将同一引物分为重叠区(T...
关键词：PCR 质粒 定点诱变 部分重叠 
重组人复合干扰素的定点诱变及PEG化修饰
《中国生物制品学杂志》2017年第4期424-428,共5页王利锋 袁芳 何红秋 陈锐 
国家自然科学基金(81202438)
目的将复合干扰素(consensus interferon,cIFN)76位点丙氨酸(Ala)突变为半胱氨酸(Cys),以期获得一种高效和可供聚乙二醇马来酰亚胺(PEG-MAL)定点修饰的IFN突变体分子。方法采用同源序列对比、空间结构模拟并结合IFNα与受体结合的特点...
关键词：复合干扰素 定点诱变 聚乙二醇修饰 
金葡菌主动外排蛋白QacA α-螺旋1、2及TMS1氨基酸的功能研究
《中国病理生理杂志》2016年第11期2073-2078,共6页简丽 赵启全 贾蓓 黄文祥 
国家自然科学基金资助项目(No.30973592)
目的:评价金黄色葡萄球菌多药耐药主动外排蛋白Qac Aα-螺旋1和2及跨膜区(TMS)1上的氨基酸对于底物转运的重要性。方法:采用半胱氨酸定点诱变的方法诱变Qac A蛋白α-螺旋1和2及TMS1上的氨基酸I2、S3、F4、F5、T6、K7、D10、M11、R17、W1...
关键词：金黄色葡萄球菌 QacA蛋白 跨膜区 Α-螺旋 半胱氨酸定点诱变 
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