活性测定

作品数：1910被引量：7287H指数：26
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重组人脑利钠肽的纯化与活性测定被引量：1
《生物技术通讯》2016年第2期223-227,共5页朱重悦 周晓雷 张世光 李海潮 张竞 王岩勃 邹卫 
河北省科技计划(15272401D)
目的:建立重组人脑利钠肽(BNP)的纯化方法,筛选疏水作用层析纯化介质并优化纯化条件。方法:根据带有6×His标签的Dsb A-BNP融合蛋白的特性,采用金属螯合亲和层析(IMAC)、凝血酶酶切去除His-Dsb A、阳离子交换层析等步骤进行粗纯;利用BN...
关键词：人脑利钠肽 疏水作用 蛋白活性 
穿膜肽-LacI HPM载体的构建及其DNA结合活性测定被引量：1
《生物技术通讯》2013年第6期778-781,共4页绳纪坡 张宏达 于芳 黄君健 胡宝成 
国家自然科学基金(31070760;30770651;30670616)
目的:借助穿膜肽TAT高效跨膜的特性和LacI前头肽突变体(LacI HPM)高亲和力结合DNA的特性,构建新型基因转导载体。方法:PCR扩增LacI、LacI基因前头肽序列、前头肽序列突变体、TAT序列的编码基因,构建前头肽序列突变体和TAT的原核表达载体...
关键词：穿膜肽 LACI LacI前头肽突变体 DNA结合活性 
新型α-半乳糖苷酶的稳定性研究
《生物技术通讯》2013年第6期850-852,共3页张雪 高红伟 李素波 鲍国强 檀英霞 王颖丽 季守平 宫锋 
目的：观察脆弱类杆菌来源的α-半乳糖苷酶（GAL）在不同pH缓冲液、不同温度下的稳定性，以及不同离子及还原剂对酶活性的影响。方法：以GAL对单糖底物对硝基-苯基-α-D-吡喃半乳糖苷（PNPG）的活性为主要检测指标，观察不同离子及还原...
关键词：Α-半乳糖苷酶 稳定性 血型转变 活性测定 
人p53启动子萤光素酶报告基因的构建及其活性测定
《生物技术通讯》2013年第1期41-44,共4页刘家宏 徐小洁 符静 范忠义 吕朝晖 陆菊明 肖文华 叶棋浓 朱建华 
国家自然科学基金(30872939;31100604)
目的:克隆p53基因的启动子,插入萤光素酶报告基因载体,并检测启动子活性。方法:采用PCR技术从人肝癌细胞系HepG2基因组中扩增人p53启动子,插入萤光素酶报告基因载体pGL4.0-empty,将重组质粒转染293T、ZR75-1、HepG2、A549细胞,测定p53...
关键词：p53启动子 萤光素酶报告基因 转录活性 
甲基营养菌MP688中启动子探针载体的构建被引量：2
《生物技术通讯》2012年第5期644-647,共4页杜宝华 葛欣 王文溪 熊向华 汪建华 何建勇 张惟材 
国家科技支撑计划(2007BAI46B01);国家高技术研究发展计划(2006AA020303)
目的:以半乳糖苷酶基因作为报告基因,构建适于探测甲基营养菌MP688启动子的载体。方法:通过PCR扩增半乳糖苷酶基因片段,连入质粒pCM66构建启动子活性探针载体pMPlacZ。根据MP688的基因组序列设计引物,通过PCR扩增5个pqqA基因、核糖体亚...
关键词：甲基营养菌 半乳糖苷酶 启动子活性检测载体 启动子活性测定 
泛素连接酶LNX1的表达、活性测定和功能初探被引量：2
《生物技术通讯》2012年第4期523-526,共4页郭正光 高友鹤 
国家自然科学基金杰出青年基金(30725009)
目的:在大肠杆菌中表达重组人泛素连接酶LNX1,并研究其对钾离子通道蛋白Kv1.4的泛素化作用。方法:构建人LNX1重组蛋白原核表达载体pGEX-LNX1,在大肠杆菌中通过IPTG诱导表达重组蛋白,表达产物经GSTrap FF纯化,并通过体外泛素化(in vitrou...
关键词：泛素连接酶 表达 酶活性测定 LNX1 Kv1.4 
柯萨奇病毒A组16型衣壳蛋白VP1的原核表达及初步活性测定被引量：1
《生物技术通讯》2012年第3期386-388,共3页张向颖 刘芳 谢立 陈堃 戴振华 修冰水 张贺秋 
目的:原核表达柯萨奇病毒A组16型(CVA16)衣壳蛋白VP1,以便于研制血清学检测试剂。方法:在基因库中钓取CVA16-VP1的全长序列,采用PCR逐步合成法合成其全长基因,测序正确后克隆到表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a(+)/VP1,转化...
关键词：柯萨奇病毒A组16型 衣壳蛋白VP1 原核表达 抗原性 
肠道病毒71型外壳蛋白VP1全长在大肠杆菌中的高效表达及初步活性测定被引量：3
《生物技术通讯》2010年第6期834-837,共4页张向颖 修冰水 毛群颖 姚昕 梁争论 张贺秋 
"十一五"国家科技重大专项平台建设(2009ZX10607)
目的:重组表达肠道病毒71型(EV71)外壳蛋白VP1全长,用于研制血清学检测试剂和疫苗研发。方法:在获得EV71全长基因并测序正确的基础上,将外壳蛋白VP1全长基因克隆到表达载体pET28a(+)上,构建重组表达质粒pET28a(+)/VP1,转化大肠杆菌BL21,...
关键词：肠道病毒71型 外壳蛋白VP1 克隆表达 
猪α-干扰素的原核表达及活性测定被引量：3
《生物技术通讯》2009年第3期370-372,共3页贾自文 吕茂民 冯晶晶 赵媛媛 王卓 章金刚 
目的:表达并纯化出具有生物学活性的重组猪α-干扰素。方法:根据前期合成的猪α-干扰素基因序列设计引物,用PCR方法扩增出猪α-干扰素基因,并将其定向克隆入原核表达载体pET28中,酶切及测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21进行诱导表达,对...
关键词：猪α-干扰素 原核表达 抗病毒活性 
雌激素受体β潜在磷酸化位点突变体的构建及其活性测定
《生物技术通讯》2008年第5期670-672,共3页周岩 丁丽华 程龙 游松 叶棋浓 
国家自然科学基金(30500091);全军"十一五"医学科研基金(06J021)
目的:构建雌激素受体(ER)β潜在磷酸化位点突变体,并在人胚肾细胞293T中检测其对ERβ下游基因转录的影响。方法:通过ERα和ERβ序列同源性比对,寻找ERβ的潜在磷酸化位点;以pcDNA3-ERβ-FLAG为模板,通过重组PCR,将ERβ264位、469位Ser...
关键词：雌激素 雌激素受体Β 磷酸化 点突变 
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