何建勇

作品数：63被引量：195H指数：7
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供职机构：沈阳药科大学生命科学与生物制药学院更多>>
发文主题：产生菌发酵阿维菌素阿卡波糖阿维链霉菌更多>>
发文领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术理学更多>>
发文期刊：《分析化学》《东北大学学报（自然科学版）》《安徽农业科学》《波谱学杂志》更多>>
所获基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家科技基础条件平台建设计划更多>>
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拟南芥甘露糖苷酶Ⅰ和人N-乙酰葡萄糖胺转移酶Ⅰ的原核表达及其多克隆抗体制备
《生物技术通讯》2012年第6期817-820,共4页胡晓 巩新 唱韶红 何建勇 吴军 刘波 
国家自然科学基金(31200082);北京市自然科学基金(5102037)
目的:在大肠杆菌中分别重组表达拟南芥甘露糖苷酶Ⅰ(ATMDSI)和人N-乙酰葡萄糖胺转移酶I(HsGnTI),制备其多克隆抗体,为基因表达鉴定提供检测抗体。方法:用PCR方法克隆ATMDSI、HsGnTI基因片段,连接至pBV220表达载体后转化大肠杆菌DH5α,...
关键词：甘露糖苷酶Ⅰ N-乙酰葡萄糖胺转移酶Ⅰ 原核表达 多克隆抗体 
甲基营养菌MP688中启动子探针载体的构建被引量：2
《生物技术通讯》2012年第5期644-647,共4页杜宝华 葛欣 王文溪 熊向华 汪建华 何建勇 张惟材 
国家科技支撑计划(2007BAI46B01);国家高技术研究发展计划(2006AA020303)
目的:以半乳糖苷酶基因作为报告基因,构建适于探测甲基营养菌MP688启动子的载体。方法:通过PCR扩增半乳糖苷酶基因片段,连入质粒pCM66构建启动子活性探针载体pMPlacZ。根据MP688的基因组序列设计引物,通过PCR扩增5个pqqA基因、核糖体亚...
关键词：甲基营养菌 半乳糖苷酶 启动子活性检测载体 启动子活性测定 
活跃链霉菌nshA基因失活对那西肽发酵的影响被引量：1
《沈阳药科大学学报》2012年第8期635-639,共5页田晓垚 李丹 陈光 田威 何建勇 
目的通过对活跃链霉菌那西肽生物合成基因簇中的nshA基因进行内部片段缺失,考察其对那西肽生物合成的影响。方法利用重叠延伸PCR(Gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)的方法失活nshA基因,并构建具有接合转移功能的大肠杆菌...
关键词：活跃链霉菌 那西肽 nshA基因 基因工程菌 
泰乐菌素基因工程菌的构建被引量：4
《沈阳药科大学学报》2012年第5期398-401,共4页范亮 杜宝华 陈光 田威 何建勇 
目的构建具有双拷贝tylF基因的泰乐菌素基因工程菌,以解决泰乐菌素基因生物合成的限速环节,提高泰乐菌素的发酵产量。方法通过SOE-PCR获得PermE-tylF基因,构建随机整合型重组质粒pBH05,通过接合转移将PermE-tylF基因及其载体随机整合到...
关键词：弗氏链霉菌 tylF基因 泰乐菌素 基因工程菌 
阿卡波糖产生菌代谢调控的研究被引量：1
《沈阳药科大学学报》2012年第5期402-405,410,共5页李娜 李丹 陈光 田威 何建勇 
目的探索4种可能的调节物对阿卡波糖生物合成的调节作用,以提高阿卡波糖的发酵产量。方法根据阿卡波糖的生物合成途径,在阿卡波糖发酵的不同阶段添加不同浓度的代谢调节物质,依据阿卡波糖的发酵水平确定添加代谢调节物质的最佳时间和最...
关键词：阿卡波糖 代谢调控 碘乙酸 氟化钠 柠檬酸钠 莽草酸 
山梨糖脱氢酶在脱氮副球菌中的表达被引量：2
《生物技术通讯》2012年第2期204-206,共3页朱斌 熊向华 汪建华 何建勇 张惟材 
国家自然科学基金(31100024);国家高技术研究发展计划(2006AA020303);国家科技支撑计划(2007BAI46B01)
目的:在脱氮副球菌PD1222中表达山梨糖脱氢酶(SDH)。方法:从质粒pMD-18T上复制氨苄西林抗性基因Ampr,从酮古龙酸菌中复制SDH基因sdh,先后酶切连接到pIND4质粒上,构建pIND4-Ampr-sdh穿梭质粒;再把pIND4-Ampr-sdh电转入大肠杆菌S17-1λpi...
关键词：山梨糖脱氢酶 脱氮副球菌 接合转移 酮古龙酸菌 
大孔吸附树脂在雷帕霉素分离纯化中的应用
《沈阳药科大学学报》2011年第12期991-994,共4页邓芸 田威 陈光 何建勇 金玉坤 
目的考察大孔吸附树脂对吸水链霉菌-DY-1(Sterptomyces hygrocopious sp.DY-1)发酵产物—雷帕霉素的吸附与分离性能,并探讨采用树脂法对提取产物进行精制的工艺条件。方法采用静态吸附法考察了6种大孔吸附树脂对雷帕霉素的吸附能力及洗...
关键词：大孔吸附树脂 雷帕霉素 分离 纯化 
响应面法优化阿卡波糖发酵培养基被引量：6
《沈阳药科大学学报》2011年第11期898-905,共8页武英才 李娜 田威 陈光 何建勇 
目的利用响应面法对阿卡波糖发酵培养基进行优化。方法以HPLC法检测发酵样品中的阿卡波糖峰面积,并以阿卡波糖发酵单位为指标,通过Plackett-Burman(PB)实验,筛选出阿卡波糖发酵的主要影响因素,进而进行最陡爬坡实验,最后通过Box-Behnke...
关键词：发酵 阿卡波糖 响应面法 培养基优化 
甲基营养菌MP688基因组完成图构建
《生物技术通讯》2011年第4期493-496,共4页智静娟 熊向华 何建勇 汪建华 何涛 张惟材 
国家科技支撑计划(2007BAI46B01);国家高技术研究发展计划(2006AA020303)
目的:在Solexa测序建立的甲基营养菌MP688基因组精细图的基础上,构建MP688基因组完成图。方法:根据MP688基因组序列设计引物,进行常规PCR扩增,填补Scaffold内部缺口;利用BLASTN、BLAT软件分析预测6个Scaffold定位关系;通过组合PCR、长距...
关键词：甲基营养菌 基因组完成图 物理缺口 
反义RNA靶序列对大肠杆菌ftsZ基因沉默效果的影响被引量：3
《沈阳药科大学学报》2011年第7期564-568,584,共6页陈银 钱秀萍 何建勇 戈梅 殷瑜 
国家科技重大专项资助项目(2009zx09302-004)
目的筛选出能够有效引起大肠杆菌ftsZ基因沉默的反义RNA片段。方法利用携带paired termini结构的质粒模仿天然asRNA的二级结构表达稳定的反义RNA,通过平板生长表象观察、菌体形态变化及液体培养生长速率变化考察了不同反义靶序列对大肠...
关键词：FTSZ 反义RNA 基因沉默 大肠杆菌 
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