巩新

作品数：43被引量：86H指数：5
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供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
发文主题：融合蛋白毕赤酵母转移酶重组菌甘露糖更多>>
发文领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
发文期刊：《中国生物工程杂志》《生物工程学报》《中国生物化学与分子生物学报》《生物技术通讯》更多>>
所获基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
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EBOV三聚体糖蛋白在新型糖基工程酵母中的表达与纯化
《军事医学》2017年第5期352-358,共7页吴慕胜 巩新 唱韶红 刘波 吴军 
国家科技重大专项重大新药创制资助项目(2014ZX09J14105-07C-001);国家自然科学基金资助项目(81673339);北京市自然科学基金资助项目(7152112)
目的用新型糖基工程酵母表达并纯化得到具有类似哺乳动物细胞糖基化修饰的埃博拉病毒三聚体糖蛋白(EBOV-GP),为其亚单位疫苗研究提供基础。方法人工合成EBOV-GP基因,将编码全长EBOV-GP基因和编码缺失黏蛋白样域(MLD)与穿膜区的EBOV-GPΔ...
关键词：糖基工程酵母 埃博拉病毒 三聚体糖蛋白 糖基化修饰 表达纯化 
毕赤酵母表达重组人凝血酶原2及活性分析
《军事医学》2016年第8期628-633,共6页樊宇 唱韶红 巩新 刘波 吴军 
国家自然科学基金资助项目(31200082);北京市自然科学基金资助项目(7152112)
目的通过毕赤酵母(Pichia pastoris)表达制备重组人凝血酶原2(prothrombin-2),并利用锯鳞蝰(Echis carinatus)凝血酶原激活剂ecarin将其活化为凝血酶,分析凝血酶的活性。方法根据Gen Bank公布的人凝血酶原2和ecarin的cDNA序列,设计并优...
关键词：α凝血酶 ecarin 凝血酶原-2 毕赤酵母 HEK293T细胞 
糖基工程酵母表面呈现抗体库的构建及抗真菌β甘露糖型抗体的筛选被引量：1
《生物技术通讯》2016年第3期326-330,370,共6页房泽轩 刘波 巩新 唱韶红 吴军 
国家自然科学基金(31200082);北京市自然科学基金(7152112)
目的:通过构建糖基工程酵母表面呈现免疫抗体库,筛选与毕赤酵母表达的禽流感血凝素HA7结合的特异性抗体。方法:利用糖基工程毕赤酵母细胞膜锚定蛋白Sed将人Ig G的Fc段锚定在酵母表面,然后用毕赤酵母表达的HA7免疫小鼠,从小鼠脾脏细胞中...
关键词：糖基工程酵母抗体库 免疫磁珠筛选 β甘露糖抗体 中和活性 
过表达N-糖基转移酶的糖基工程酵母构建被引量：2
《军事医学》2015年第8期602-606,617,共6页毛银平 巩新 唱韶红 宋西勇 吴军 刘波 
国家自然科学基金资助项目(31200082);北京市自然科学基金资助项目(7152112)
目的通过过表达N-糖基转移酶,构建1株糖基化修饰效率更高的糖基工程酵母。方法利用尿嘧啶(URA3)营养缺陷型筛选标记,在糖基工程酵母4-32中转入醇氧化酶1(alcohol oxidase 1,AOX1)启动子控制的利士曼原虫N-糖基转移酶星状孢子素和温度敏...
关键词：糖基转移酶类 酵母 STT3D 抗体 N-糖基化 
H7N9流感病毒血凝素HA在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析被引量：6
《军事医学》2015年第6期448-452,共5页王莎 唱韶红 刘波 巩新 徐威 吴军 
国家自然科学基金资助项目(31200082);北京市自然科学基金资助项目(7152112)
目的利用毕赤酵母表达制备H7N9流感病毒血凝素[HA 1-525个氨基酸（aa）],并对其免疫原性进行研究。方法经全基因合成获得H7N9流感病毒[A/Hangzhou/1/2013（H7N9）]全长HA,以其为模板,PCR得到片段HA^1-525,通过NspⅤ和NotⅠ双酶切连入pP...
关键词：H7N9流感病毒 血凝素类 毕赤酵母 红细胞凝集抑制 
长效人白细胞介素4拮抗剂的研究
《军事医学》2014年第11期855-859,共5页宋西勇 唱韶红 刘波 巩新 吴军 
国家自然科学基金青年科学基金资助项目(31200082);国家863计划资助项目(2012AA02A302)
目的研制保留白细胞介素4受体(IL-4R)结合能力,但不具有激活下游信号活性的人白细胞介素4(IL-4)突变体M5,并通过抗体Fc融合延长其体内半衰期,为变态反应病药物研发提供基础。方法全基因合成人IL-4突变体M5,将其克隆到p BV220表达载体,...
关键词：白细胞介素4 拮抗剂 毕赤酵母 融合蛋白 半衰期 
Endo-H在毕赤酵母中的表达、纯化及其在N-糖基化分析中的应用被引量：5
《军事医学》2014年第3期193-197,共5页支艳艳 唱韶红 巩新 宋西勇 吴军 刘波 
国家自然科学基金青年科学基金资助项目(31200082)
目的通过巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达制备内切β-N-乙酰氨基葡糖苷酶-H(endo-beta-N-acetylglucosaminidase H,Endo-H),并用于蛋白质的N-糖基化分析。方法根据GenBank中公布的褶皱链霉菌(Streptomyces plicatus)Endo-H的cDNA序...
关键词：毕赤酵母 N-糖基化 
甲醇-山梨醇混合碳源诱导提高抗HER2抗体在糖基工程毕赤酵母中的表达
《生物技术通讯》2013年第5期610-615,共6页高爱荣 刘波 唱韶红 巩新 徐敏锐 徐威 吴军 
国家自然科学基金-青年科学基金(31200082)
目的:以抗HER2抗体为模型,研究抗体在糖基工程酵母菌中的表达及工程菌发酵技术。方法:首先通过摇瓶试验分析诱导用甲醇浓度对抗体表达的影响,并用高表达HER2的SK-BR-3细胞分析抗HER2抗体的抗原结合活性。以此为基础,在5 L发酵罐中研究甲...
关键词：抗HER2抗体 毕赤酵母 诱导 发酵 
重组小鼠血管内皮生长因子在毕赤酵母菌中的表达和纯化
《生物技术通讯》2012年第6期785-789,共5页李海燕 刘波 唱韶红 巩新 徐威 吴军 
国家自然科学基金(31200082);北京市自然科学基金(5102037)
目的:建立毕赤酵母重组小鼠血管内皮生长因子(mVEGF)的制备方法,为研究mVEGF的生物活性、抗原性等提供基础。方法:通过全基因合成方法获得编码mVEGF的基因片段,将其克隆至表达载体pPICZαA上,电转化整合到毕赤酵母GS115基因组中,用甲醇...
关键词：小鼠血管内皮生长因子 毕赤酵母 重组蛋白 N-糖基化 
拟南芥甘露糖苷酶Ⅰ和人N-乙酰葡萄糖胺转移酶Ⅰ的原核表达及其多克隆抗体制备
《生物技术通讯》2012年第6期817-820,共4页胡晓 巩新 唱韶红 何建勇 吴军 刘波 
国家自然科学基金(31200082);北京市自然科学基金(5102037)
目的:在大肠杆菌中分别重组表达拟南芥甘露糖苷酶Ⅰ(ATMDSI)和人N-乙酰葡萄糖胺转移酶I(HsGnTI),制备其多克隆抗体,为基因表达鉴定提供检测抗体。方法:用PCR方法克隆ATMDSI、HsGnTI基因片段,连接至pBV220表达载体后转化大肠杆菌DH5α,...
关键词：甘露糖苷酶Ⅰ N-乙酰葡萄糖胺转移酶Ⅰ 原核表达 多克隆抗体 
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