二次PCR

作品数：19被引量：22H指数：3
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应用二次PCR检测草莓炭疽病菌被引量：1
《江苏农业科学》2023年第9期125-131,共7页唐冬兰 蒋立奔 唐泉 宋芹芹 曹荣祥 
江苏省农业科技自主创新资金[编号:CX(20)3017];亚夫科技服务项目[编号:KF(20)1021];江苏现代农业产业技术体系建设项目(编号:JATS[2021]008)。
开发了一种基于PCR的草莓炭疽病致病菌暹罗炭疽菌(Colletotrichum sisamense)检测方法。通过分析暹罗炭疽菌及24种真菌的ITS区序列,设计了1条反向特异引物CsiaR,结合引物CgInt可仅从暹罗炭疽菌中扩出约400 bp片段。对不同浓度暹罗炭疽菌...
关键词：草莓 炭疽病 暹罗炭疽菌 ITS序列 PCR检测 
用二次PCR方法检测鸟类禽流感的初探
《野生动物学报》2022年第2期421-427,共7页陈光 李勇 朱功良 张俊 冯伟 陈婧 彭金山 郑和松 杨国祥 
林业改革发展专项资金项目(鄂财环发〔2020〕35号)。
为进一步提高野生动物疫情监测、病原检测鉴定和应急防控的时效性,建立了对鸟类拭子样品直接进行禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)核酸检测鉴定的二次PCR方法。对比试验结果显示,该方法可行性较高,具有与实时荧光定量PCR(real-tim...
关键词：鸟类禽流感 二次PCR 快速鉴定 疫源疫病监测 
应用DNA提取改良和二次聚合酶链反应技术检测乌头及其炮制品被引量：1
《广州中医药大学学报》2021年第2期385-391,共7页朱高倩 李双良 马莉 周培军 蒲星宇 王丽 符德欢 
云南省应用基础研究计划项目(编号:2017FD234);云南省重大科技专项(农业)(编号:2017AB005)。
【目的】筛选适用于9种乌头属植物根茎炮制前后DNA提取的方法。【方法】采用基于十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、十二烷基硫酸钠(SDS)法的12种改良方法提取9种乌头属植物根茎炮制前后DNA,考察提取缓冲液种类、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)添加...
关键词：乌头属 炮制 DNA提取 二次PCR ITS2 
一种高效筛选Mx GTPase效应区SNP方法
《生物技术》2018年第2期130-135,共6页尹春光 秦宏伟 彭浩 王晓强 杜立新 赵桂苹 
国家高技术研究发展计划项目("抗重大传染性疾病转基因家禽新品种培育";No.2007AA10Z183);山东省中青年科学家奖励基金项目("鲁西南地方家禽Mx基因抗性基因型筛选与鉴定";No.BS2011NY003);国家科技支撑计划项目("鸡种质资源培育与创新利用";No.2015BAD03B03)
[目的]建立高效检测家禽Mx功能区SNP方法 ,改进PCR SSCP。[方法]以引进品种和地方品种为研究对象,筛选引物,优化程序,通过二次PCR改进SSCP方法对Mx基因GTPase效应区SNP进行检测。[结果]SSCP检测引物分型检测及SNP分析,检测结果与测序一...
关键词：MX 二次PCR-SSCP GED区 SNP 
人白介素24融合载体的构建、突变纠正和表达优化
《广西师范大学学报（自然科学版）》2016年第1期150-155,共6页范秋丽 宋德贵 
"桂科重"研究项目(14121003-3-1)
以武汉大学病毒学国家重点实验室保存的白介素24(IL-24)为模板,构建原核表达载体pET28a-IL-24,转化大肠杆菌DH5α,挑取单克隆,测序结果显示:在IL-24第18位A→G,21位C→T,412位G→A,18位和21位的突变没有使该位上的氨基酸发生改变,而412...
关键词：大肠杆菌 人白介素24 原核表达 二次PCR 融合蛋白 
一种从非变性聚丙烯凝胶中回收小片段DNA的方法被引量：2
《生物技术通报》2015年第5期68-72,共5页向小华 焦禹顺 吴新儒 程亚增 侯烁 刘贯山 王元英 
公益行行业专项(201203091);国家烟草专卖局重点项目(110201002002)
利用高分辨率的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、纯化特异性小片段DNA的首选方法,也是开展后续多种分子生物学试验的前提。本试验比较了改良煮沸法(液氮研磨+煮沸+低温浓缩)、煮沸法及直取法回收小片段DNA,以回收样品模板进行第二次PC...
关键词：非变性聚丙烯凝胶 DNA小片段 二次PCR 改良煮沸法 胶回收 
环境水体中霍乱弧菌的二次PCR检测方法被引量：1
《环境与健康杂志》2012年第7期643-645,共3页黄海 周登仁 王琼妹 邝仕壮 庞燕 
目的建立环境水体中霍乱弧菌的二次PCR检测方法。方法对霍乱弧菌的外环境水监测样本进行PCR检测;确定弱电泳条带或无电泳条带的稀释度,将第一次PCR的产物梯度稀释后进行二次PCR。采用琼脂凝胶糖电泳进行分析。结果对378件环境水样分别...
关键词：二次PCR 水 霍乱弧菌 
维甲酸核受体RARα真核表达载体的构建、突变纠正及表达
《中国微生态学杂志》2009年第10期898-901,共4页候艳 陈全 王瑜伟 
目的构建维甲酸核受体RARα真核表达载体,并检测其在人肺腺癌细胞A549中表达。方法从小鼠巨噬细胞RAW264.7中提取总RNA,以RT-PCR法扩增RARαcDNA,克隆至真核表达载体pDsRed1-C1中,测序结果显示RARα第1040位A→G,导致其编码蛋白的氨基...
关键词：维甲酸核受体 细胞内病原体抗性基因1 二次PCR 突变纠正 转染 
二次PCR用于临床标本真菌感染快速分子诊断的研究被引量：6
《中华皮肤科杂志》2009年第6期390-392,共3页吕雪莲 刘泽虎 梅亚宁 张晓利 刘维达 
国家“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项（2008ZX10004-002）;2007-2009年度卫生部部属（管）医院临床学科重点项目（7）;卫生部公益行业科研专项经费（200802032）
目的探讨二次PCR技术诊断疑似真菌感染临床标本的敏感性。方法收集临床疑似真菌感染的深部位痰及肺泡灌洗液标本共29份，分别进行真菌直接镜检、真菌培养、真菌通用引物单次与二次PCR扩增rDNA的ITS区，并对真菌检出阳性率和多种真菌菌...
关键词：聚合酶链反应 真菌病 分子诊断技术 
人白介素24cDNA克隆、突变纠正和原核表达被引量：2
《西安交通大学学报（医学版）》2007年第2期130-133,共4页魏丽丽 李成华 袁成福 陈济 丁嵩涛 刘革力 易发平 宋方洲 
目的获取人白介素24(IL-24)cDNA,构建原核表达载体以表达含有谷胱甘肽S转移酶(GST)的融合蛋白GST-IL-24。方法以人外周血单核细胞(PBMC)总RNA为模板,RT-PCR扩增IL-24 cDNA,克隆入原核表达载体pGEX-4T-2,测序结果显示在IL-24 cDNA第223位...
关键词：白介素24 二次PCR 突变纠正 融合蛋白 克隆 原核表达 
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