感染性克隆

作品数：253被引量：387H指数：9
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口蹄疫病毒O型OHM/02株全长cDNA感染性克隆的构建被引量：1
《动物医学进展》2018年第1期1-6,共6页苗书魁 魏玉荣 魏婕 米晓云 汪萍 马文戈 王延 薛英 易忠 黄炯 
国家科技支撑计划项目(2013BAD12B04);新疆维吾尔自治区科研机构创新发展专项资金项目(2016D04008);新疆维吾尔自治区公益性科研院所基本科研业务经费项目(2014;2015)
为构建O型口蹄疫病毒(FMDV)的感染性克隆,采用RT-PCR将O型FMDV OHM/02株全长基因组分为5个重叠的片段进行扩增,克隆至载体pUC57中,获得全长cDNA克隆pPO-1。将线性化的pPO-1与含有编码T7 RNA聚合酶的真核表达重组质粒共转染BHK-21细胞,...
关键词：口蹄疫病毒 全长CDNA 转染 病毒拯救 
猪圆环病毒2型不同基因型毒株感染性克隆的构建及拯救毒株的体外生物学特性被引量：5
《中国农业科学》2011年第23期4918-4925,共8页郭龙军 陆月华 黄立平 危艳武 刘长明 
国家自然科学基金项目(30871859);国家科技支撑计划项目(2006BAD06A07);中央级公益性科研院所基本科研业务费(2008-07);兽医生物技术国家重点实验室基金(NKLVBP2008-07)
【目的】中国猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)感染存在不同基因型毒株(PCV2a、PCV2b和PCV2d),有必要阐明不同基因型PCV2毒株的致病性差异。【方法】采用感染性克隆技术构建了不同基因型代表性毒株,对拯救的毒株进行体外生物学特性试验。【结...
关键词：PCV2 不同基因型 感染性克隆 病毒拯救 生物学特性 
猪圆环病毒2型感染性DNA的构建及病毒拯救被引量：7
《中国兽医学报》2011年第2期169-173,188,共6页杨顺利 尹双辉 沈小燕 尚佑军 刘湘涛 
国家科技支撑计划(2006BAD06A012);家畜疫病病原生物学国家重点实验室课题(SKLVEB2008ZZKT041)
用PCR法扩增猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)全长基因组。将全基因组插入到真核生物表达载体PcDNA3.1的多克隆位点中,获得单拷贝重组质粒P-PCV2和串连双拷贝重组质粒p-2PCV2,将所得质粒分别转染无PCV污染的PK-15细胞系,经7次连续传代后,间接免疫...
关键词：猪圆环病毒2型 感染性克隆 病毒拯救 
Asia1型口蹄疫病毒含RSD受体识别位点感染性克隆的构建与病毒拯救被引量：2
《畜牧兽医学报》2011年第2期210-216,共7页李平花 白兴文 孙普 卢曾军 曹伟军 谢宝霞 吴润 殷宏 刘在新 
国家”973”项目(2005CB523201);国家“十一五”科技支撑计划项目(2006BAD06A12)
口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)具有高的突变率和很强的适应性,在环境条件变化时会迅速从准种种群中选择变异株来适应新的环境,这些变异株包括在RGD受体结合基序内部或附近氨基酸的替换。FMDV Asia1/JS/China/05株经不...
关键词：口蹄疫病毒 RSD受体结合位点 感染性cDNA克隆 病毒拯救 
肠道病毒71型（EV71）基因组全长cDNA感染性克隆的构建及鉴定被引量：2
《中华微生物学和免疫学杂志》2010年第9期809-815,共7页郭会杰 李秀玲 
国家科技支撑计划（2008BA169D03）
目的 构建肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）基因组全长cDNA感染性克隆,为EV71分子遗传学、致病机制及疫苗研究等建立技术平台.方法 根据EV71 085株病毒全基因组序列,分4个片段对基因组cDNA进行扩增后,将扩增片段定向、顺序克隆至pBl...
关键词：肠道病毒71型 全长CDNA克隆 体外转录 病毒拯救 
牛Asia 1型口蹄疫病毒感染性克隆的构建被引量：2
《生物工程学报》2009年第11期1621-1626,共6页李爽 张润祥 宋鸽 高明春 刘湘涛 王君伟 
国家科技支撑计划(No.2006BAD06A17-08);黑龙江省科技计划(No.GA06B202);现代农业产业技术体系建设专项资金(No.nycytx-0303)资助~~
本研究在完成Asia1型口蹄疫病毒(FMDV)As01株全基因组测序的基础上,采用融合PCR扩增得到含有15个C碱基的5′端片段(约1800bp),并利用长片段PCR扩增得到基因组3′端片段(约6700bp)。再利用单一的酶切位点将2个片段克隆到pBluescript SK...
关键词：口蹄疫病毒 全长CDNA 感染性克隆 反向遗传 病毒拯救 体外转录 
猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合感染性克隆的构建和应用被引量：3
《生物工程学报》2008年第9期1573-1581,共9页李祥健 张建武 吕健 余丹丹 姚火春 袁世山 
国家"十一五"科技支撑计划(No.2007BAD86B06-3);上海市科技兴农计划(No.2006-10-4);上海浦江人才计划(No.06PJ14118);"973"项目(No.2005CB523202)资助~~
高致病性猪蓝耳病近年来在我国广泛流行,目前尚无高效疫苗用于该病的防制。本研究以PRRSV弱毒感染性克隆-pAPRRS作为主要骨架,将高致病性猪蓝耳病病毒江西分离株(JX143)的主要结构蛋白基因(ORF4-7)以及3′UTR区域替换入pAPPRS相应编码区...
关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征 高致病性猪蓝耳病 感染性克隆 嵌合病毒 候选疫苗 
稳定表达T7RNA聚合酶IBRS-2细胞系的建立以及利用该细胞系对SVDV的体内拯救被引量：7
《生物化学与生物物理进展》2008年第4期449-456,共8页郑海学 田宏 靳野 吴锦艳 尚佑军 刘湘涛 谢庆阁 
国家重点基础研究发展计划(973)(2005CB523201);国家科技支撑计划(2006BAD06A03)资助项目~~
利用PCR从!溶原性细菌DE3中扩增出T7RNA聚合酶基因,定向克隆进逆转录病毒载体pBABEpuro,得到阳性重组质粒pT7BABEpuro.把该重组质粒与pVSV-G共感染GP2-293包装细胞系,形成假型病毒.通过polybrene介导假型病毒感染IBRS-2细胞,利用嘌呤霉...
关键词：T7RNA聚合酶 IBRST7细胞系 假型病毒 SVDV 病毒拯救 逆转录病毒载体 感染性克隆 
猪圆环病毒1型感染性克隆的构建与病毒拯救被引量：7
《中国预防兽医学报》2008年第3期161-165,共5页刘长明 危艳武 陆月华 张朝霞 袁婧 黄立平 
国家"948"项目(2006-Z6);国家科技支撑计划项目(2006BAD06A07)
用PCR法扩增猪圆环病毒1型(PCV1)全长基因组,将2个基因组顺式连接插入到pUC19质粒载体中构建感染性分子克隆。通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入SalⅠ酶切位点作为分子靶标,拯救出带有分子标记的克隆病毒,命名为recPCV1/G株。通...
关键词：猪圆环病毒1型 感染性克隆 病毒拯救 
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