PIGGYBAC转座子

作品数:61被引量:99H指数:6
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基于PiggyBac转座子优化稳定表达细胞系的新型瞬时受体电位M2通道抑制剂筛选
《浙江大学学报(医学版)》2024年第5期604-614,共11页应凯悦 华宁 骆燕萍 刘星宇 刘敏 杨巍 
国家自然科学基金(82030108);宁夏回族自治区重点研发项目(2019BFH02003)。
目的:使用PiggyBac(PB)转座系统建立稳定表达瞬时受体电位M2(TRPM2)通道的人胚胎肾细胞HEK293T,并进行TRPM2通道抑制剂筛选,为治疗脑缺血等疾病寻找潜在的药物。方法:根据PB转座原理,构建pPB-hTRPM2真核表达载体。将重组质粒和辅助质粒...
关键词:PiggyBac转座系统 瞬时受体电位M2型 高通量筛选 膜片钳 氧糖剥夺/再灌注损伤 短暂性大脑中动脉栓塞 小鼠 
新型二合一PiggyBac转座系统的构建及功能验证
《中国生物工程杂志》2022年第6期39-46,共8页张尧仓 彭玉 丁可昕 台福敏 郑晓飞 秦宜德 付汉江 
国家自然科学基金(81773038、32071290)资助项目。
目的:PiggyBac(PB)转座子是一种可移动的遗传元件,采用“剪切和粘贴”机制在载体和染色体之间进行转座;通过将转座子元件和转座酶表达框整合到一个表达载体中,构建简便易用的二合一PB转座系统。方法:通过聚合酶链式反应(polymerase chai...
关键词:PIGGYBAC转座子 稳定转染 EGFP 
人γ干扰素转座子质粒构建及其在HEK293T细胞中的表达
《生物技术》2021年第6期521-526,572,共7页陈秋玉 徐闰 刘灵康 韦茏芹 吴文德 郑喜邦 李恭贺 
国家自然科学基金项目(32060738);广西自然科学基金重点项目(2018GXNSFDA281026);广西科技计划重点研发项目(桂科AB16380098);广西大学基金项目(XBZ110929)。
[目的]克隆人γ干扰素(hIFNγ)基因,借助自剪切肽P2A,构建hIFNγ-P2A-RFP(红色荧光蛋白)融合基因转座子表达载体,并在HEK293T细胞中检测其表达水平。[方法]首先,以脂多糖(LPS)激活人外周血淋巴细胞,提取总RNA,经RT-PCR扩增hIFNγ基因;...
关键词:人γ干扰素 重叠延伸PCR 自剪切肽P2A PIGGYBAC转座子 HEK 293T细胞 
利用可诱导表达Cas9的HeLa细胞系进行顺铂耐药性基因筛选
《南京医科大学学报(自然科学版)》2021年第10期1432-1439,1452,共9页陈红全 王建瑛 
南京医科大学自然科学基金(NMUB2019033)。
目的:利用PiggyBac转座子系统,构建可诱导表达Cas9的稳定HeLa细胞系,并针对人核受体基因构建sg RNA文库,进行顺铂耐药性基因筛选。方法:构建PB-TRE-Cas9-NLS-IRES-hrGFP-Zeo载体,与PB-CAG-rtTA以及转座酶载体一同电转到HeLa细胞中,通过...
关键词:CRISPR/Cas9 PIGGYBAC转座子 可诱导表达 文库筛选 
piggyBac转座子AgoPLE1.1在黑腹果蝇种系转化中的应用
《昆虫学报》2021年第6期676-681,共6页张浩淼 王晓芳 罗光华 韩湘豫 王秋霞 韩召军 吴敏 
国家自然科学基金项目(31301729)。
【目的】通过检测黑腹果蝇Drosophila melanogaster中piggyBac(PB)转座子AgoPLE1.1的转化活性,明确AgoPLE1.1开发为昆虫转基因载体的潜力。【方法】构建AgoPLE1.1转座酶辅助质粒pAgoHsp和带有红色荧光标记的供体质粒pXLAgo-PUbDsRed,辅...
关键词:黑腹果蝇 PIGGYBAC转座子 PB类似因子 种系转化 剪切 转座 
一种由piggyBac转座子介导高效构建稳定细胞株的策略被引量:2
《实验技术与管理》2021年第3期45-50,共6页盛哲津 王亮 周斌 李利妹 
中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(1507219059);同济大学第15期实验教改项目(2000104092)。
构建稳定细胞株的关键是如何提高外源目的基因插入基因组的效率。piggyBac转座子(简称PB)通过"切离-粘贴"的机制实现在基因组上的转座,其本质是在基因组的不同位点间进行插入。利用PB转座子高效插入基因组的特性,并通过改造该转座系统,...
关键词:PIGGYBAC转座子 稳定细胞株 基因组整合 
基于piggyBac转座子系统构建长期表达人细胞因子的免疫缺陷小鼠模型
《吉林大学学报(医学版)》2020年第1期176-181,共6页吕亚楠 范伟 胡正 
国家自然科学基金资助课题(81870091,81570145)
目的:探讨表达人白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素3 (IL-3)、白细胞介素15 (IL-15)、干细胞生长因子(SCF)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因的piggyBac (PB)转座子系统在免疫缺陷小鼠体内的长效表达情况,为改善人源化小鼠模型...
关键词:免疫系统人源化小鼠 白细胞介素6 白细胞介素3 白细胞介素15 干细胞生长因子 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 转座子 
纳米载体介导的PiggyBac转座子制备CAR-NK细胞被引量:3
《中国肿瘤生物治疗杂志》2020年第2期109-114,共6页岳冉 刘子洋 郑岩 陆小丹 胡珊珊 张炳勇 李修岭 李景果 韩双印 
国家自然科学基金资助项目(No.81772670)。
目的:探索新型阳离子聚合物纳米载体mPEG-P(Asp-AED-g-HFB)(PAEF)和PiggyBac转座子介导嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰自然杀伤(natural killer,NK)细胞的基因转染方法,为肿瘤细胞免疫治疗制剂研发提供新策略。方法:...
关键词:纳米载体 PIGGYBAC转座子 嵌合抗原受体 NK细胞 肿瘤免疫治疗 
人IL-12基因载体的构建及其在T细胞中的表达研究被引量:2
《中国免疫学杂志》2019年第21期2651-2655,共5页邹云莲 胡边 张李琛 张进萍 朱学锴 黄行许 严新民(指导) 
云南省科技厅-昆医联合专项(2015FB102);云南省卫生厅内设机构项目(2017NS226,2018NS0247);云南省临床病毒学重点实验室子课题(2018DG010);昆明市肿瘤分子与免疫防治重点实验室项目(2018-1-A-17334);云南省第一人民医院小肠疾病临床诊疗及研究省创新团队项目(2018HC006)资助
目的:探究T细胞携载人IL-12基因对T细胞生长和功能的影响。方法:构建表达人IL-12基因的PiggyBac转座子载体,在电转下,将携载IL-12基因的转座子系统导入新鲜分离的淋巴细胞获得持续稳定表达。通过T细胞表型分析及体外功能实验研究初步探...
关键词:IL-12 基因工程 T细胞 PIGGYBAC转座子 
酿酒酵母中PiggyBac转座子筛选系统的构建被引量:1
《食品与生物技术学报》2019年第10期15-22,共8页周林希 柳艺石 赵神保 张慧杰 高晓冬 藤田盛久 
国家自然科学基金项目(31400693);江苏省自然科学基金项目(BK20140141);中央高校基本科研业务费专项(JUSRP51508)
PiggyBac(PB)是来源于粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)的TTAA型转座子。PB转座子系统可作为一种插入型突变工具,应用于多种真核细胞中。本研究在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中构建了一个基于PB转座子的筛选系统。系统由插入ADE2基因...
关键词:酿酒酵母 PIGGYBAC转座子 基因筛选 
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