RED重组系统

作品数：90被引量：258H指数：10
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肠炎沙门菌greB基因缺失株构建及其生物学特性初步研究被引量：3
《中国人兽共患病学报》2023年第4期325-332,共8页蔡梦雷 姜婷婷 吴村 刘东海 焦晓丽 张凯迪 荣丽娟 王俊 崔国林 
河北省自然科学基金项目(No.C2019402120);河北省高等学校科学技术研究项目(No.QN2019015);嘉兴职业技术学院人才启动基金专项(No.20407030086)。
目的研究旨在探究转录延长因子GreB对肠炎沙门菌致病力相关生物表型的影响。方法以肠炎沙门菌ATCC13076为亲本株,利用λ-Red重组系统构建ΔgreB基因缺失株及其回补株,测定肠炎沙门菌及其衍生菌在多种抑菌环境中生存能力、对细胞感染能...
关键词：肠炎沙门菌 greB基因 λ-Red重组系统 生物学特性 RNA-seq 
大肠杆菌诺氟沙星超敏感多基因敲除株KYAH06构建与功能验证
《东北农业大学学报》2023年第2期49-55,86,共8页姜巨全 宋阳 Heba Abdel-Motaal 邹俏 
国家自然科学基金项目(32070031,31770051)。
以E.coli DH5α为出发菌株采用pKD46质粒提供λRed重组系统完成以下三步基因敲除:大肠杆菌中RND超家族多药物抗性蛋白acrAB基因并借助其与pKD3质粒的氯霉素抗性片段同源重组被敲除;大肠杆菌中MATE家族多药物抗性蛋白ydhE基因通过卡那霉...
关键词：诺氟沙星 λRed重组系统 多药物逆向转运蛋白 AcrAB YdhE MdtH 
鼠伤寒沙门菌spvBC基因编辑株的构建被引量：1
《生物技术通报》2021年第2期253-260,共8页左玲莉 周丽婷 吴兴旗 吴超逸 吴淑燕 
国家自然科学基金面上项目(81671976,31970132)。
利用λRed重组系统和pBAD原核表达载体构建鼠伤寒沙门菌spvBC质粒毒力基因修饰菌株,为深入探究沙门菌毒力基因spv的功能和致病机制及宿主抗感染免疫提供工具菌。以pKD4为模板,PCR扩增含spvBC同源臂的卡那霉素抗性基因以构建同源打靶片段...
关键词：鼠伤寒沙门菌 spvBC基因 λRed重组系统 基因编辑 
肠出血型大肠埃希菌O157:H7 espG基因缺失株的构建及其生物学特性分析被引量：1
《中国病原生物学杂志》2020年第10期1144-1150,共7页延凯娜 王湘雨 万成松 
广东省自然科学基金-重点项目(No.2018B030311063)。
目的利用λRed重组系统构建肠出血型大肠埃希菌O157:H7 espG基因缺失株,并研究其生物特性,对EspG蛋白进行初步生物信息学分析。方法设计并合成一对同源臂引物,每条引物5’端与espG基因同源,3’端与卡那霉素抗性基因同源,扩增卡那霉素抗...
关键词：肠出血型大肠埃希菌O157:H7 espG基因 λRed重组系统 B细胞表位 生物信息学 
肠炎沙门氏菌yjeA基因缺失株的构建及其生物学功能测定被引量：2
《北京农学院学报》2020年第2期16-20,共5页曹莉 孙路 孔梓安 吴竹青 别鹏飞 王真 
北京市优秀人才培养资助项目(胞内寄生病原菌抗菌肽耐受与持续性感染相关性研究,2017000026833ZK18);2019年北京市属高校高水平教师队伍建设支持计划——青年拔尖人才培育计划项目(CIT&TCD201904052);北京农学院学位与研究生教育改革与发展项目。
【目的】为了研究yjeA基因的缺失肠炎沙门氏菌的生物学特性和毒力的影响。【方法】以肠炎沙门氏菌为亲本菌株,构建沙门氏菌yjeA基因缺失株,并对其生物学特性进行研究。【结果】利用Red重组系统成功构建沙门氏菌yjeA基因缺失株,进一步生...
关键词：肠炎沙门氏菌 yjeA RED重组系统 毒力 免疫原性 
一种检测生活饮用水和污水中生物有效性铜离子的微生物报告菌株的构建被引量：1
《温州医科大学学报》2020年第5期345-355,共11页周怀彬 王娟娟 赵建国 洪旭芬 庞一林 李江辉 谭国强 
国家自然科学基金资助项目(81500440);国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2014AA06A514)。
目的:构建一种能够检测生活饮用水和污水中生物有效性铜离子的微生物报告菌株。方法:首先采用交叉PCR将增强型绿色荧光蛋白与铜离子“外排泵”基因copA的启动子融合构建响应铜离子的CopAp::gfpmut2-pET28a感应元件。然后利用Red重组系...
关键词：大肠杆菌全细胞报告菌株 铜离子检测 增强型绿色荧光蛋白 RED重组系统 
新型Red重组质粒pRO38的构建及Red系统的定向进化
《生物技术》2019年第6期513-518,524,共7页陈如意 李玉娟 陈伟 
广东省科技计划项目(2015A010107014);国家自然科学基金项目(31501895)
[目的]构建新型Red同源重组质粒,对red基因进行分子定向进化,获取高重组效率的red突变基因。[方法]采用PCR的方法扩增不同的功能片断,通过体外同源重组的方法构建Red同源重组质粒pRO38。采用双链重组的实验验证质粒的同源重组功能后,随...
关键词：RED重组系统 大肠杆菌 双链重组 单链重组 缺失突变 分子定向进化 
pSim6质粒与新型反选择kil系统联用在重组工程的应用
《生物工程学报》2019年第9期1761-1770,共10页李玉娟 陈如意 杨缅峰 陈伟 
广东省科技计划项目(No.2015A01017014)资助;国家自然科学基金(No.31501895)~~
基因工程中,无痕修饰是一种很受欢迎的基因组操作技术。反选择系统的严谨性决定了无痕修饰的效率。近期有文献报道了一种新型的反选择系统kil,该系统与质粒pSim6联用后反选择严谨性较pKD46质粒更高,预示着kil与pSim6质粒联用可以更高效...
关键词：RED重组系统 选择反选择系统 无痕修饰 大肠杆菌 
利用Red重组系统敲除鲍曼不动杆菌asa A基因被引量：1
《微生物学免疫学进展》2019年第1期14-18,共5页李磊 王一诺 邹清华 
国家自然科学基金(81572041)
目的利用Red重组系统敲除鲍曼不动杆菌ATCC 17978的asaA。方法设计上下游引物中包含asaA的同源序列,并以pKD4质粒为模板,扩增含有卡那霉素抗性基因的DNA片段。将该片段转化于表达重组酶的17978感受态细胞中,在卡那霉素筛选压力下,得到...
关键词：鲍曼不动杆菌 基因敲除 Ⅵ型分泌系统 asaA 
UPEC双组分信号系统KguS/KguR调控基因缺失株的构建及其生长特性研究被引量：1
《南京农业大学学报》2018年第6期1113-1117,共5页李国强 朱丽萍 朱丽臻 陈蕾蕾 颜世敢 
国家重点研发计划项目(2017YFC1601404);山东省自然科学基金项目(ZR2018LC003);国家自然科学基金项目(31470243);山东省重点研发计划项目(2014GSF120006);山东省研究生教育创新计划项目(SDYY14024)
[目的]构建尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC) CFT073株的双组分信号系统Kgu S/KguR调控的c5032—c5037基因的缺失株,并研究基因缺失株在有氧和厌氧条件下的生长特性。[方法]运用Red重组系统将带有c5032—c5037...
关键词：尿道致病性大肠杆菌 KguS/KguR c5032-c5037基因 RED重组系统 
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