宋大新

作品数:23被引量:50H指数:4
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供职机构:复旦大学更多>>
发文主题:毕赤氏酵母大肠杆菌基因毕赤酵母酵母更多>>
发文领域:生物学轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
发文期刊:《微生物学杂志》《Acta Biochimica et Biophysica Sinica》《生物工程学报》《昆虫学报》更多>>
所获基金:国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目国家高技术研究发展计划更多>>
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Tn5转座子插入p95基因不影响AcMNPV的复制被引量:2
《复旦学报(自然科学版)》2008年第3期301-305,共5页尹隽 胡志鹏 宋大新 钟江 
从Tn5转座子介导的AcMNPV随机插入突变体库中,分离到一株复制正常的突变体AcApra41.突变定位发现Tn5转座子插入了病毒p95基因中.为了排除AcApra41中还有其他突变,利用同源重组法构建了p95基因定点插入突变的重组病毒AcGFP-P95in.PCR确认...
关键词:杆状病毒 突变体 复制 基因表达 
重组人载脂蛋白AⅠ米兰突变体在酵母中的分泌表达
《复旦学报(自然科学版)》2008年第3期306-310,共5页张彦 赵志安 王明贵 宋大新 
复旦大学Med-X基金重点资助项目
将重组质粒pPIC9K-apoAⅠ-milano用BglⅡ酶切后转化Pichia pastorisGS115菌株,筛选得到G418高抗性转化子,经甲醇诱导和摇瓶发酵,用SDS-PAGE与Western blot检测上清液,发现有明显的重组人载脂蛋白AⅠ米兰突变体(rAIM)表达,但其分子量比...
关键词:载脂蛋白AⅠ米兰突变体 毕赤酵母 分泌表达 优化表达 
粉纹夜蛾颗粒体病毒增强蛋白锌离子结合域定点突变被引量:7
《昆虫学报》2007年第11期1111-1115,共5页尹隽 单梁 宋大新 钟江 
国家自然科学基金项目(39870006)
粉纹夜蛾颗粒体病毒(Trichoplusia ni granulovirus,TnGV)增强蛋白(enhancin)具有增强病毒感染力的作用。该蛋白包含一个多种杆状病毒增强蛋白都具有的保守结构域HELGH,是典型的金属蛋白酶锌离子结合域,但该结构域对增强蛋白生物活性的...
关键词:杆状病毒 增强蛋白 金属蛋白酶 围食膜 定点突变 
人载脂蛋白基因apoAⅠ在毕赤氏酵母中的胞内表达被引量:2
《复旦学报(自然科学版)》2004年第6期1035-1038,共4页杨婷婷 赵志安 张彦 宋大新 
复旦大学Med X基金重点资助项目;上海市科学技术委员会资助项目(024319204)
将PCR扩增得到的apoAⅠ基因片段插入胞内表达质粒pPIC3.5K,重组的pPIC3.5K apoAⅠ用BglⅡ酶切后,转化PichiapastorisGS115菌株,筛选获得G418高抗性转化子,再通过PCR鉴定证实apoAⅠ基因已整合到染色体上.其转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导,...
关键词:表达质粒 ApoAⅠ 载脂蛋白 基因 人血浆 再通 诱导 毕赤氏酵母 转化子 细胞裂解 
人纤溶蛋白酶原K5在毕赤酵母中的表达及其生物活性鉴定
《生物工程学报》2004年第6期879-883,共5页沈利 宋大新 高卜渝 吕红 李育阳 
化学合成人纤溶蛋白酶原K5 (pK5 )的编码基因并克隆到毕赤氏酵母表达系统的分泌型载体pPIC9K上 ,将重组质粒经BglⅡ单酶切后电转化PichiapastorisGS115菌株 ,筛选出对G4 18有高抗性和在MM培养基上生长缓慢的转化子。经摇瓶发酵和甲醇诱...
关键词:人纤溶蛋白酶原K5 酵母 分泌表达 内皮细胞增殖分析 
重组人载脂蛋白A-Ⅰ在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的高表达被引量:2
《生物工程学报》2004年第6期906-911,共6页冯美卿 蔡钦生 宋大新 钟江 吴满平 周珮 
海市科委重点项目基金资助 (No .0 2 43 192 0 4)~~
高密度脂蛋白 (High densityLipoprotein ,HDL)是血浆中重要的脂蛋白 ,其主要成分为载脂蛋白AⅠ(ApoliproteinAⅠ ,ApoAⅠ为了大量制备该蛋白 ,首先尝试利用Pichiapastoris表达系统高效表达ApoAⅠ。通过PCR扩增获得天然含人载脂蛋白Apo...
关键词:重组人载酯蛋白ApoA  毕赤酵母 表达优化 
结核分枝杆菌ESAT-6蛋白在毕赤酵母中的融合表达及其活性研究
《生物工程学报》2004年第6期958-962,共5页刘林 赵志安 王洪海 宋大新 
国家"863"计划项目基金资助 (No .2 0 0 1AA2 15 2 0 1)~~
为了获得结核分枝杆菌ESAT 6蛋白在毕赤氏酵母中的高效表达 ,将人α 2a干扰素基因、结核分枝杆菌esat 6基因经PCR扩增并加上相应的酶切位点 ,两基因之间的DNA接头编码肠激酶识别的多肽 ,DNA经酶切连接插入分泌型载体pPIC9K ,将重组表达...
关键词:ESAT-6蛋白 人α-2a干扰素 分泌型载体 酵母SMD1168 融合表达 
人载脂蛋白基因apoAⅠ在毕赤氏酵母中的表达被引量:2
《复旦学报(自然科学版)》2004年第2期181-184,189,共5页张淼 赵志安 杨婷婷 刘林 宋大新 
复旦大学Med X基金重点资助项目 ;上海市科学技术委员会资助项目 (0 2 4 3192 0 4 )
将化学法合成的apoAⅠ基因插入分泌型载体 pPIC9K .将重组的 pPIC9K apoAⅠ用BglⅡ酶切后 ,转化PichiapastorisGS115菌株 ,筛选获得G4 18高抗性转化子 .转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导 ,上清液用SDS PAGE检测 ,有明显的rApoAⅠ表达 .经Phen...
关键词:人载脂蛋白ApoAI 分泌型载体 毕赤氏酵母 蛋白质印迹 N末端氨基酸顺序测定 
大肠杆菌tyrR基因剔除及其对苯丙氨酸生物合成的影响被引量:4
《生物化学与生物物理学报》2003年第8期728-733,共6页商量 范长胜 金瑞良 刘东信 王建刚 尹隽 宋大新 
国家自然科学基金资助项目 (No .3 0 0 70 0 2 0 )~~
TyrR是大肠杆菌芳香族氨基酸生物合成和运输途径中的一种全局性调控蛋白质。采用双交换同源重组的方法定位突变大肠杆菌染色体tyrR基因 ,在该基因中插入带有卡那霉素抗性基因的DNA片段 ,使之失活 ,实现基因剔除。经PCR、DNA测序、lacZ...
关键词:基因剔除 苯丙氨酸生物合成 代谢调控 大肠杆菌 
转甲状腺素蛋白基因在毕赤氏酵母中的非融合表达
《复旦学报(自然科学版)》2002年第6期646-649,共4页翟杰 高卜渝 裴黎霞 吴俊 宋大新 
国家自然科学基金资助项目(39970019)
用限制酶将pSK TTR质粒上TTR基因切下,分别插入分泌型载体pPIC9和pPIC9K.将重组的pPIC9K TTR用BglⅡ酶切后,转化PichiapastorisGS115菌株,筛选获得G418高抗性转化子.转化子经摇瓶发酵,上清液用SDS PAGE检测,有明显的rTTR表达.经DEAE sep...
关键词:转甲状腺素蛋白基因 分泌型载体 毕赤氏酵母 蛋白质印迹 
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