魏永伟

作品数：14被引量：50H指数：3
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供职机构：浙江大学更多>>
发文主题：传染性法氏囊病病毒IBDV克隆RNA聚合酶反向遗传系统更多>>
发文领域：农业科学生物学自动化与计算机技术医药卫生更多>>
发文期刊：《黑龙江畜牧兽医》《科学通报》《浙江大学学报（农业与生命科学版）》《科技通报》更多>>
所获基金：浙江省科技计划项目国家科技攻关计划国家自然科学基金浙江省科技厅重点资助项目更多>>
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重组宁乡猪生长激素真核表达质粒(pCI-GH-EGFP)的构建及其在Vero细胞中的表达被引量：2
《黑龙江畜牧兽医》2016年第7期86-89,277,共5页王文策 翟双双 耿梅梅 褚武英 魏永伟 于涟 杨琳 
国家自然科学青年基金项目(31501959);国家现代农业产业技术体系水禽产业技术体系项目(nycytx-45-09);华南农业大学校长基金项目(4300-k12226)
为了构建宁乡猪生长激素(GH)真核表达系统,并转染非洲绿猴肾细胞系(Vero)观察其表达情况,试验选用宁乡猪脑垂体组织总RNA反转录获得的c DNA为模板,克隆宁乡猪生长激素(nxGH)基因序列,将其定向插入p CI载体构建重组质粒p CI-GH,并将增强...
关键词：宁乡猪 生长激素(GH)基因 增强型绿色荧光蛋白(EGFP) 克隆 真核表达 
稳定表达传染性法氏囊病病毒VP2蛋白突变体细胞系的建立
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》2011年第5期473-478,共6页孙静 魏永伟 章晓栋 于涟 
根据传染性法氏囊病病毒(IBDV)HZ2株VP2基因序列设计1对引物,将该基因成功克隆到真核表达载体pDsRed2-N1中,构建重组质粒pDsRed2-N1-VP2(简称PVP2);以PVP2作为过渡载体,运用PCR定点突变技术,对第279位点和第284位点的氨基酸残基分别或...
关键词：传染性法氏囊病病毒 VP2基因 定点突变 突变体 Vero细胞系 
人纤维蛋白原α、β、γ基因的克隆和表达研究被引量：3
《科技通报》2011年第6期859-862,共4页黄星 许健 魏永伟 章晓栋 邓同乐 孙静 于涟 
国家自然基金(30800218);浙江省自然科学基金(Y2080889);浙江省教育厅重点项目(Z200908281)
纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)是凝血因子I,在体内经凝血酶(thrombin)作用下转变为纤维蛋白,发挥其凝血和止血功能。本研究通过反转录的方法,从杭州人肝脏中成功克隆到人纤维蛋白原α、β、γ基因,并将其定向插入原核表达载体中,人纤维蛋...
关键词：纤维蛋白原 基因序列 纤维蛋白封闭剂 
IBDV VP2/4/3与ChIL-18融合基因真核表达质粒和基因共表达质粒的免疫原性比较被引量：3
《中国预防兽医学报》2010年第10期785-789,共5页侯贤宏 魏永伟 章晓栋 于涟 
浙江省重点科技攻关计划(2006C22100)
为比较已构建的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)重组质粒的免疫原性、进一步研究ChIL-18的分子免疫佐剂作用,本研究将2周龄SPF鸡随机分为6组,以200μg/羽剂量首免:A组免疫重组真核表达重组质粒pCI-VP2/4/3-ChIL-18,B组免疫pCI-ChIL-18-VP2/4...
关键词：真核表达载体 DNA疫苗 免疫原性 免疫效果 
IBDV VP2/4/3、ChIL-18共表达载体的构建及在Vero细胞上的表达被引量：3
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》2010年第1期1-8,共8页侯贤宏 魏永伟 章晓栋 于涟 
浙江省重点科技攻关计划资助项目(2006C22100)
为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多聚蛋白(VP2/4/3)DNA疫苗的免疫效果,应用重叠延伸剪切技术(splicing by overlapping extension)将IBDV VP2/4/3基因与鸡白细胞介素18(ChIL-18)基因分别经3次PCR获得融合基因片段VP2/4/3-ChIL-18和ChIL-...
关键词：IBDV 基因融合 共表达 DNA疫苗 间接免疫荧光 
基于T7 RNA聚合酶的传染性法氏囊病病毒反向遗传系统的建立
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》2008年第6期602-607,共6页魏永伟 章晓栋 侯贤宏 徐弘 于涟 
国家科技计划资助项目(2004BA757C);浙江省科技计划重点资助项目(2003C22002)
为了建立传染性法氏囊病病毒反向遗传系统,应用PCR法在鸡传染性法氏囊病病毒基因组A、B两节段的5末端和3末端分别引入T7启动子和核酶HDV序列,然后分别将含有T7启动子和核酶HDV序列的A、B节段构建到载体PT-Pluc当中,构建感染性载体PT-mA...
关键词：IBDV 反向遗传 T7 RNA聚合酶 
基于RNA聚合酶Ⅱ的传染性法氏囊病病毒反向遗传系统的建立
《中国预防兽医学报》2008年第10期751-754,共4页魏永伟 侯贤宏 章晓栋 徐弘 吕冬梅 于涟 
国家科技计划项目(2004BA757C);浙江省科技计划重点项目(2003C22002)
应用重叠PCR法在鸡传染性法氏囊病病毒基因组A、B两节段的5'末端和3'末端分别引入具有自我剪切功能的核酶HamRz和HDV序列,然后分别将含有核酶序列的A、B节段构建到pCI真核载体当中,构建真核载体pCI-ma核pCI-mb。在脂质体介导下,将pCI-ma...
关键词：IBDV RNA聚合酶Ⅱ 反向遗传 
猪圆环病毒Ⅰ型全基因组的克隆及生物信息学分析被引量：1
《中国预防兽医学报》2008年第5期338-344,共7页徐弘 魏永伟 谢荣辉 吕冬梅 章晓栋 于涟 
猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)是引起临床断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的主要病原之一,而与之遗传相关的猪圆环病毒Ⅰ型(PCV1)无致病性。本研究从病猪的脾脏通过PCR扩增并成功克隆了PCV1的全基因组,在此基础上,对GenBank中发表的所有31株PCV...
关键词：猪圆环病毒Ⅰ型 猪圆环病毒Ⅱ型 断奶仔猪多系统衰竭综合症 
重组鸡白介素18真核表达质粒(pCI-ChIL-18)胚胎接种的研究被引量：3
《中国预防兽医学报》2008年第4期275-280,共6页吕冬梅 章晓栋 徐弘 魏永伟 于涟 
浙江省重点科技攻关计划资助项目(2006C22G2010005)
通过对孵化率、平均囊指数、脾指数、外周血淋巴细胞增殖反应和白介素18(IL-18)蛋白水平表达的检测,评定了重组鸡真核表达质粒(pCI-ChIL-18)胚胎接种的不同接种剂量和接种方法的效果。结果表明,pCI-ChIL-18质粒接种18日龄鸡胚不影响孵化...
关键词：鸡IL-18 胚胎接种 接种剂量 绒毛尿囊膜接种 尿囊腔接种 
副溶血弧菌ZJ2003株两种铁调外膜蛋白的克隆、表达和免疫原性被引量：31
《中国水产科学》2007年第4期563-569,共7页毛芝娟 由振强 魏永伟 于涟 
浙江省科技厅重点资助项目(2005C23082)
从浙江省象山港网箱养殖大黄鱼病鱼分离的一株副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)ZJ2003中克隆了两种铁调外膜蛋白psuA和pvuA的基因(GenBank登录号:DQ141607、DQ141608),经PCR的方法去除两基因的信号肽编码序列后亚克隆到原核表达载体...
关键词：副溶血弧菌 铁调外膜蛋白 克隆 表达 免疫原性 
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