应跃斌

作品数:9被引量:20H指数:3
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供职机构:浙江大学更多>>
发文主题:超抗原肠毒素金黄色葡萄球菌肠毒素C2大肠杆菌克隆表达更多>>
发文领域:医药卫生生物学更多>>
发文期刊:《中国生化药物杂志》《中国生物化学与分子生物学报》《药学学报》《免疫学杂志》更多>>
所获基金:浙江省科技攻关计划教育部留学回国人员科研启动基金浙江省自然科学基金更多>>
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金黄色葡萄球菌肠毒素C2中缺口的形成及影响因素的研究被引量:2
《浙江大学学报(医学版)》2009年第5期505-510,共6页应跃斌 孙红颖 丁丁 李丹曦 薛乔 陈枢青 
目的:探索影响金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)断裂的因素。方法:将纯化的肠毒素在不同条件下处理,观察环境因素对其断裂程度的影响。结果:重组SEC2断裂的位置可能位于其分子93位半胱氨酸与110位半胱氨酸之间。重组SEC2在37℃下、24 ...
关键词:肠毒素类 葡萄球菌 金黄色 超抗原 重组融合蛋白质类 生物降解 温度 氢离子浓度 蛋白酶抑制药 
表达rhTNFR-Fc的CHO细胞的氨基酸代谢特征及氨基酸流加培养工艺研究
《药物生物技术》2008年第1期35-39,共5页唐治华 应跃斌 江海燕 黄敏芬 罗家立 陈枢青 
为提高表达重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白(rhTNFR-Fc)的CHO工程细胞的培养密度和目的蛋白表达,研究了葡萄糖和谷氨酰胺流加-批式培养工艺的细胞氨基酸代谢特征及游离氨基酸和大豆蛋白水解物的补加策略。通过补加葡萄糖和谷氨酰胺...
关键词:重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白CHO细胞 氨基酸 流加-批式 代谢 
高效亲和色谱法检测细胞培养上清中的抗体融合蛋白质被引量:5
《中国生化药物杂志》2007年第5期342-343,共2页唐治华 应跃斌 黄敏芬 罗家立 陈枢青 
目的建立高效亲和色谱检测抗体融合蛋白质的方法,用于抗体及抗体融合蛋白质生产的过程控制。方法正压匀浆法装填rProtein A Sepharose,用不同pH值缓冲液分步洗脱。结果在25~1000μg/mL浓度范围内,重组人肿瘤坏死因子受体一抗体融...
关键词:抗体融合蛋白质 抗体 过程控制 高效亲和色谱 含量测定 
重组金黄色葡萄球菌肠毒素C2的表达及生物学活性分析被引量:1
《免疫学杂志》2007年第2期144-147,151,共5页应跃斌 李丹曦 潘映秋 薛乔 孙红颖 陈枢青 
浙江省科技厅重大科技攻关项目资助(2004C13041)
目的克隆金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)基因,添加亲和纯化标签进行原核表达,并对表达产物进行生物学活性分析。方法通过PCR从pGEM-T-SEC2质粒中亚克隆得到带有编码6个组氨酸的核苷酸序列的基因片断,构建了表达质粒pET-28a-SEC2,转化至...
关键词:肠毒素 超抗原 克隆表达 组氨酸标签 亲和纯化 
基于结构域活性分析的大肠杆菌T蛋白结构研究
《生物物理学报》2006年第5期338-344,共7页应跃斌 宋见惠 黄鹏 陈枢青 
浙江省自然科学基金(302110);国家教育部回国人员启动基金(J20040141)资助项目~~
大肠杆菌T蛋白含有三个结构域:分支酸变位酶、预苯酸脱氢酶和调节结构域。文章作者分段克隆了T蛋白的分支酸变位酶、预苯酸脱氢酶和调节结构域等片段,并对其进行了活性研究。研究发现,定位于N末端的分支酸变位酶结构域的比活性虽然不高...
关键词:大肠杆菌 T蛋白 分支酸变位酶 预苯酸脱氢酶 调节结构域 
金黄色葡萄球菌肠毒素SEC2的纯化与活性研究被引量:8
《中国医药工业杂志》2006年第10期665-668,共4页应跃斌 潘映秋 张伟 陈枢青 
浙江省科技厅重大攻关项目(G20040697)
从金黄色葡萄球菌发酵液中纯化金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)。发酵液经超滤浓缩、硫酸铵沉淀、阴离子交换色谱和分子筛色谱,获得了纯度为90%的SEC2,总收率23%。体外刺激脾淋巴细胞增殖实验以及体外肿瘤细胞增殖抑制试验表明该蛋白具备...
关键词:肠毒素 超抗原 纯化 
金葡菌肠毒素C_2的克隆表达及其生物学活性被引量:5
《药学学报》2006年第5期406-411,共6页薛乔 应跃斌 潘映秋 李丹曦 孙红颖 陈枢青 
浙江省科技厅重大攻关项目(2004C13041).
目的克隆金葡菌肠毒素C2全长基因,构建SEC2的表达载体,实现其可溶性表达,并对纯化的rSEC2蛋白的生物学活性进行研究。方法通过聚合酶链式反应(polym erase chain reaction,PCR)从金葡菌FR I1230菌株基因中得到肠毒素SEC2的基因,将其克...
关键词:GST-SEC2 超抗原 融合表达 大肠杆菌 MTT法 
野生型金黄色葡萄球菌肠毒素C2在E.coli中的表达和纯化研究
《中国生化药物杂志》2006年第5期262-266,共5页马凤森 应跃斌 陈枢青 
浙江省科技厅重大攻关项目(No.2004C13041)
目的克隆金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)基因在E.coli重组表达,纯化重组SEC2(rSEC2)并进行生物学活性分析。方法PCR获得正确编码SEC2的基因片断,构建表达质粒pET-28a-sec2在E.coliBL21中表达。利用离子交换和分子筛色谱纯化rSEC2,四甲基...
关键词:肠毒素 超抗原 克隆表达 阴离子交换色谱 分子筛色谱 四甲基偶氮唑盐法 生物学活性 
大肠杆菌P蛋白和T蛋白的调节结构域互换研究(英文)
《中国生物化学与分子生物学报》2006年第4期296-300,共5页薛乔 孙红颖 应跃斌 陈枢青 
浙江省自然科学基金(No.302110);国家教育部回国人员启动基金(No.J20040141)资助~~
在细菌、真菌及植物中,分支酸是一种位于关键分叉点上的中间代谢物,是所有芳香族氨基酸合成的共同前体.它可在双功能酶分支酸变位酶(CM)和预苯酸脱水酶(PDT)的催化下合成苯丙氨酸,在另一个双功能酶分支酸变位酶和预苯酸脱氢酶(PDH)的催...
关键词:大肠杆菌 P蛋白 T蛋白 调节结构域 分子元件 
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