孙长俭

作品数：9被引量：45H指数：5
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供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室更多>>
发文主题：贝氏柯克斯体Q热疫苗实时荧光定量PCR检测实时定量PCR免疫原性更多>>
发文领域：医药卫生更多>>
发文期刊：《中国人兽共患病学报》《中华流行病学杂志》《解放军医学杂志》《微生物与感染》更多>>
所获基金：国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
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贝氏柯克斯体感染小鼠血清与其毒力相关蛋白的免疫印迹反应
《中国人兽共患病学报》2008年第7期593-596,共4页王锡乐 陈梅玲 吴德平 孙长俭 杨晓 温博海 
国家自然科学基金(No.30670101);国家自然科学青年基金(No.30700744)
目的筛选与贝氏柯克斯体感染血清反应的贝氏柯克斯体毒力相关蛋白。方法以贝氏柯克斯体标准株九里株为模板,采用PCR扩增包括IV型分泌系统、分泌性蛋白和膜蛋白在内的毒力及毒力相关的基因,将扩得目的基因片段与原核表达质粒pET32a重组,...
关键词：贝氏柯克斯体 毒力 重组蛋白 免疫印迹 
贝氏考克斯体毒力与毒力相关蛋白芯片的研制被引量：2
《军事医学科学院院刊》2008年第2期121-125,共5页王锡乐 温博海 陈梅玲 王君 孙长俭 杨晓 
国家自然科学基金资助(30670101);国家自然科学基金青年基金(30700744)
目的:构建贝氏考克斯体毒力与毒力相关蛋白芯片。方法:根据贝氏考克斯体全基因组序列,筛选出约160个编码毒力及毒力相关蛋白的基因,采用PCR扩增基因片段,将获得的基因片段与pET32a表达载体连接,然后将该重组质粒转化大肠杆菌并使目的基...
关键词：贝氏考克斯体 重组蛋白 蛋白芯片 
实时荧光定量PCR检测莫氏立克次体被引量：14
《解放军医学杂志》2007年第10期1054-1056,共3页杨晓 陈梅玲 温博海 牛东升 孙长俭 李青凤 
国家"十五"科技攻关项目(2003BA712A04-07)
目的采用TaqMan-MGB探针建立检测莫氏立克次体的实时荧光定量PCR。方法依据莫氏立克次体外膜蛋白B基因(ompB)设计引物和探针,以克隆的ompB作模板建立实时荧光定量PCR方法。结果建立的定量标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线...
关键词：莫氏立克次体 实时定量PCR 外膜蛋白B基因 地方性斑疹伤寒 
灭活贝氏柯克斯体免疫小鼠抗登革病毒感染的实验研究
《微生物与感染》2007年第4期211-214,共4页孙长俭 陈梅玲 王锡乐 杨晓 温博海 
国家863计划项目(2006AA02Z459)资助
目的研究灭活贝氏柯克斯体增强小鼠非特异性抗登革病毒感染的免疫效能。方法用灭活贝氏柯克斯体全细胞疫苗（WCV）免疫BALB／c小鼠，每只小鼠皮下注射50μgWCV，初次免疫后第5周及第7周分别腹腔注射20μg WCV加强免疫。1周后，用10^5 TC...
关键词：贝氏柯克斯体 登革病毒 非特异性免疫 
氯仿-甲醇提取贝氏柯克斯体残存组分Q热疫苗的免疫原性及免疫保护性研究被引量：6
《中国人兽共患病学报》2007年第6期544-547,共4页孙长俭 陈梅玲 杨晓 温博海 牛东升 李青凤 王锡乐 
国家863计划项目(2006AA02Z459)资助
目的实验评价氯仿-甲醇提取贝氏柯克斯体残存组分(CMR)疫苗的免疫特性及免疫保护性。方法采用国内分离贝氏柯克斯体新桥株制备CMR疫苗,用CMR免疫Balb/c小鼠;采用间接免疫荧光法检测CMR免疫小鼠血清特异性抗体水平和用淋巴细胞增殖试验评...
关键词：贝氏柯克斯体 Q热疫苗 氯仿-甲醇提取残存组分 
实时荧光定量PCR检测普氏立克次体被引量：6
《中华流行病学杂志》2006年第11期963-967,共5页杨晓 陈梅玲 温博海 牛东升 朱丽娜 李青凤 孙长俭 
国家科技攻关课题资助项目(2003BA712A04-07)
目的采用新型TaqMan-MGB探针建立检测普氏立克次体的实时荧光定量PCR方法。方法根据普氏立克次体外膜蛋白B的基因(ompB)序列设计引物和探针,以克隆的OmpB基因片段作DNA模板,在荧光定量PCR检测仪(ABI 7900型)上建立实时荧光定量检测方法...
关键词：流行性斑疹伤寒 普氏立克次体 实时定量PCR 外膜蛋白B基因 
两种Q热疫苗的脂肪酸分析被引量：5
《中国人兽共患病学报》2006年第11期1009-1012,共4页孙长俭 陈梅玲 温博海 刘海洪 杨晓 牛东升 
目的比较分析灭活贝氏柯克斯体全细胞(WC)和氯仿-甲醇提取WC的残存组分(CMR)Q热疫苗的脂肪酸种类及含量差异。方法制备WC和CMR,采用高压气相色谱检测WC和CMR脂肪酸种类及相对含量。结果WC经氯仿-甲醇回馏处理后得到的不溶性组分CMR。气...
关键词：贝氏柯克斯体 疫苗 脂肪酸 
实时荧光定量PCR检测五日热巴通体被引量：6
《中国人兽共患病学报》2006年第6期510-513,557,共5页陈梅玲 张晶波 孙长俭 温博海 杨晓 牛东升 
国家科技攻关项目(2003BA712A04-07)
目的采用TaqMan- MGB探针建立检测五日热巴通体的实时荧光定量PCR(real- timequantitativePCR)方法。方法根据五日热巴通体特异的16-23SrRNA间隔区序列设计引物和探针,以克隆的1623SrRNA间隔区基因片段作DNA模板,建立了检测五日热巴通...
关键词：五日热巴通体 实时定量PCR 16S-23S RRNA 巴通体感染 
实时荧光定量PCR检测恙虫病东方体被引量：14
《中国人兽共患病学报》2006年第3期228-231,共4页朱丽娜 张晶波 陈梅玲 温博海 牛东升 李青凤 孙长俭 杨晓 
国家科技攻关项目(2003BA712A04-07)
目的建立检测恙虫病东方体的实时荧光定量PCR(quantitative real-ti me PCR)方法。方法根据恙虫病东方体56kD外膜蛋白基因序列设计引物和探针,以克隆的56kD基因片段作DNA模板,建立实时荧光定量PCR检测方法。结果建立的荧光定量PCR标准...
关键词：恙虫病东方体 实时荧光定量PCR 
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