德式乳杆菌保加利亚亚种thyA基因缺陷型菌株的构建  

Construction of Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus thy A-null Strains

作　　者：李晨[1] 郭鑫[1] 卢海强[1] 田晶晶[2] 谷新晰[1] 田洪涛[1] 罗云波[3] 

机构地区：[1]河北农业大学食品科技学院,河北保定071000 [2]北京农学院食品科学学院,北京102206 [3]中国农业大学食品科技与营养工程学院,北京100083

出　　处：《中国食品学报》2015年第11期23-28,共6页Journal of Chinese Institute Of Food Science and Technology

基　　金：国家高技术研究发展计划(863计划)项目(No.2006AA10Z317);国家自然科学基金项目(31301520);河北省高等学校科学技术研究项目(QN2014065)

摘　　要：目的:获得由插入序列ISS1构建的德式乳杆菌保加利亚亚种胸腺嘧啶合成酶thy A基因缺陷型菌株。方法:利用两端带有ISS1的载体p Ghost9:ISS1,经复制型转座构建突变体,以50μg/m L脱氧胸苷、梯度浓度三甲氧苄胺嘧啶(TMP)连续富集传代培养,以添加终质量浓度50μg/m L脱氧胸苷的SA平板以及未添加脱氧胸苷的SA平板筛选thy A基因缺陷型菌株。结果:获得生物学性状稳定,回复突变率低的thy A基因插入突变株。Objective： Using the insertion sequence ISS1 construction mutants, in order to isolate the Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus thy A-null strains. Methods： After ISS1 replicative transposition, the chromosome contains duplicated ISS1 sequences flanking p Ghost, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus is efficient mutagenesis. The mutants were cultivated on MRS supplement with deoxythymidine（50 μg·m L-1） and TMP（1 to 500 μg·m L-1, depending on the strain）. After about 33 generations of cultivation, each culture broth was spread on MRS agar plates containing deoxythymidine. Those single-colonies isolates of each strain were examined by growth on SA agar with and without added deoxythymidine. Results： Achieving the thy A-null strains with the insetion of ISS1 and the mutants are stable.

关 键 词：P Ghost9:ISS1 德式乳杆菌保加利亚亚种 THY A基因 插入突变 

分 类 号：TS201.3[轻工技术与工程—食品科学]