乙酸异戊酯高产菌株脂肪酶基因Lip2的克隆及表达研究  

Study on the cloning and prokaryotic soluble expression of Lipase gene Lip2 of high- yield isoamyl acetate strain

作　　者：谭才邓[1] 朱美娟[1] 廖延智[1] 朱晓立[1] 

机构地区：[1]广东轻工职业技术学院,广东广州510300

出　　处：《食品工业科技》2016年第1期153-155,160,共4页Science and Technology of Food Industry

基　　金：广东省高等学校优秀青年教师培养计划资助项目(Yq2013166);广东轻工职业技术学院自然科学基金重点项目(KJ201308);广东轻工职业技术学院创新强校重大科研项目培养计划(1A20205)

摘　　要：通过PCR扩增了乙酸异戊酯高产菌Loq-c的脂肪酶基因Lip2,其序列与Gene Bank中的Candida cylindracea Lip2 gene(序列号X64704.1)的序列相似度最高,为89%。构建原核表达载体p QE-lip2,转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),获得了重组菌BL21(p QE-lip2)。经过表达条件探索,用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,脂肪酶Lip2原核可溶表达最佳条件为:诱导温度30℃,IPTG使用浓度为1.5 mmol/L,150 r/min转速的条件下诱导表达5 h。The gene encoding Lipase2（ Lip2） from high- yield isoamyl acetate strain Loq- c was amplified by polymerase chain reaction（ PCR）,its sequence was most similar to Candida cylindracea Lip2 gene（ X64704.1）,the similarity was 89%.Subsequently,the corresponding expression vector p QE- lip2 was constructed and cloned into E.coli BL21（ DE3）,resulting in recombinant strain BL21（ p QE- lip2）.After explorations,SDS- PAGE analysis showed that the best conditions for soluble expression of Lip2 was： 30 ℃,IPTG 1.5 mmol / L,150 r / min,induced for 5 hours.

关 键 词：乙酸异戊酯 脂肪酶 克隆 表达 

分 类 号：TS201.3[轻工技术与工程—食品科学]