北京市科委基金(Z07010501780701)

作品数:8被引量:29H指数:4
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相关机构:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所吉林大学河北北方学院兰州军区兰州总医院更多>>
相关期刊:《中国动物保健》《中国人兽共患病学报》《中国兽医学报》《甘肃农业大学学报》更多>>
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狂犬病病毒基质蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立被引量:8
《中国人兽共患病学报》2013年第1期17-22,26,共7页宫苗苗 曾妮 程朝飞 李刚 
国家自然科学基金(No.31172342);国家高技术研究发展计划"863"计划(No.2008AA10Z411);北京市科委基金项目(No.Z07010501780701);国家农业行业公益项目(No.200903037);FAO/IAEA项目(No.14133;No.14515;No.17453)联合资助~~
目的以原核表达的狂犬病病毒M蛋白作为检测抗原,建立间接ELISA方法用来检测狂犬病病毒抗体。方法为表达狂犬病病毒(RV)基质蛋白(M),采用RT-PCR方法从狂犬病病毒Flury-LEP株中扩增RV基质蛋白基因,双酶切后定向克隆至原核表达载体pET-32a(...
关键词:狂犬病病毒 基质蛋白 原核表达 蛋白纯化 酶联免疫吸附试验 
犬细小病毒北京分离株VP2基因克隆及变异分析被引量:6
《中国兽医学报》2011年第5期649-653,共5页王净 李英俊 李刚 史利军 
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目(2010JS-2;2009QN-3;0032007008);北京市科委基金资助项目(Z07010501780701)
对北京昌平地区分离的9株犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)进行VP2基因克隆测序,并利用生物信息学软件,将克隆的VP2基因与GenBank公布的国内外部分毒株序列相比较,绘制系统进化树,分析9株CPV VP2蛋白亲水性和抗原指数。结果表明,分离...
关键词:犬细小病毒 VP2基因 序列分析 
减蛋综合征病毒环介导等温扩增检测方法的建立被引量:3
《甘肃农业大学学报》2011年第2期1-5,共5页董春娜 李刚 李伟 张坤 史利军 哈小琴 胡永浩 
国家"863"计划项目(2008AA10Z411);中央级公益性科研院所基本业务费专项(0032007008);北京市科委基金项目(Z07010501780701)
根据GenBank登录的减蛋综合征病毒(EDSV)六邻体基因的保守区,设计了3对环介导等温基因扩增(LAMP)引物,优化反应体系,并对其灵敏性、特异性进行验证.结果表明:LAMP优化后的反应体系为外引物浓度0.1μmol·L-1,内引物浓度0.8μmol·L-1,...
关键词:减蛋综合征病毒 环介导等温扩增 检测 
狂犬病病毒G基因的克隆表达及间接ELISA检测方法的初步建立与应用被引量:1
《中国人兽共患病学报》2011年第4期279-282,共4页王净 李刚 史利军 邱文英 曾妮 穆秀明 高志花 王慧文 
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(2009QN-3;2010JS-2;0032007008);北京市科委基金项目(Z07010501780701);国家农业行业公益项目(2008-3)联合资助
目的以重组G蛋白为检测抗原,应用间接ELISA方法检测狂犬病病毒抗体。方法根据GenBank公布的狂犬病病毒LEP-Flury株基因序列设计引物,PCR扩增出目的基因,连接pGM-T载体,重组质粒经BamH I和XhoⅠ双酶切,连接到表达载体pGEX-6P-1,构建重组...
关键词:狂犬病病毒 G蛋白 表达 间接ELISA 
减蛋综合征病毒NE4株全基因组序列测定与分析
《甘肃农业大学学报》2010年第5期21-28,共8页董春娜 李刚 邱文英 张坤 哈小琴 
国家"863"计划(2008AA10Z411);中央级公益性科研院所基本业务费专项(0032007008);北京市科委基金项目(Z07010501780701)
根据减蛋综合征病毒(EDSV-76)AV-127株的全基因序列(序列号BK000404),用Premier5.0软件设计22对引物,利用PCR方法对EDSV-76病毒NE4株的全基因组进行了分段扩增、克隆和序列测定,并用DNAStar分析软件对各片段的测序结果进行拼接,将该序列...
关键词:减蛋综合征病毒 基因组 同源性 序列分析 
犬细小病毒环介导等温扩增快速检测方法的初步建立被引量:5
《中国预防兽医学报》2010年第4期263-266,共4页张坤 马丽娟 张乃生 李刚 邢国栋 史利军 李伟 
国家"863"计划(2008AA10Z411);中央级公益性科研院所基本业务费专项(0032007008);北京市科委基金项目(Z07010501780701)
为建立犬细小病毒(CPV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法,实现CPV的早期快速诊断,本研究根据GenBank登录的CPV VP2基因序列,在其序列保守区域设计LAMP引物,利用CPV基因组DNA为模板进行扩增。结果表明:LAMP方法检测灵敏度达到10-1TCID50/mL...
关键词:犬细小病毒 环介导等温扩增 条件优化 
狂犬病病毒P基因的原核表达及间接ELISA方法的应用被引量:4
《中国人兽共患病学报》2010年第2期163-167,共5页赵刚 李刚 陈铁桥 范晓娟 
国家高技术研究发展计划"863"计划(2008AA10Z411);中央级公益性科研院所基本业务费专项(0032007008);北京市科委基金项目(Z07010501780701);国家农业行业公益项目(2008-3);联合资助
目的以狂犬病病毒P蛋白作为检测抗原,用间接ELISA方法检测狂犬病病毒抗体。方法根据GenBank发表的狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)LEP-Flury株的基因序列设计引物,通过RT-PCR扩增出P基因的全长序列,克隆于pGM-T载体中,获得重组质粒pGM-T-P...
关键词:狂犬病病毒LEP—Flury株 P基因 P蛋白 原核表达 间接ELISA 
犬细小病毒VP2基因的原核表达及纯化被引量:2
《中国动物保健》2009年第12期46-51,共6页张坤 马丽娟 李刚 黄伟 李伟 贾凤琴 
中央级公益性科研院所基本业务费专项(0032007008);北京市科委基金项目(Z07010501780701)
参照GenBank中犬细小病毒VP2基因序列设计了一对添加EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物,对CPV VP2基因进行PCR扩增,克隆至pGM-T载体,获得重组质粒pGM-T-VP2,将重组质粒亚克隆到表达载体pET-32a上,获得表达重组子pET-32a-VP2,经EcoRⅠ和XhoⅠ...
关键词:犬细小病毒 原核表达 纯化 
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