国家自然科学基金(30671551)

作品数:8被引量:25H指数:3
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相关作者:陆慧君贺文琦高丰常灵竹陈克研更多>>
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猪血凝性脑脊髓炎病毒单克隆抗体的制备与鉴定被引量:3
《中国生物制品学杂志》2009年第9期907-910,共4页陈克研 赵传博 贺文琦 陆慧君 高巍 常志广 王丽 高丰 
国家自然科学基金资助项目(30671551);吉林省科技发展计划重点资助项目(20060206-2);吉林省科技发展计划项目(20090154);吉林省国际合作项目(20080722)
目的制备猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)单克隆抗体,并进行鉴定。方法通过差速离心和蔗糖密度梯度离心法对猪HEV进行纯化,免疫BALB/c小鼠后,取其脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合,经间接ELISA和血凝抑制试验(HI)筛选能稳定分泌抗HEV单克隆...
关键词:血凝性脑脊髓炎病毒 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 
猪血凝性脑脊髓炎病毒不同佐剂灭活疫苗免疫BALB/c小鼠的比较试验被引量:2
《中国畜牧兽医》2009年第6期34-37,共4页陈克研 贺文琦 陆慧君 赵魁 赵传博 曾凡勤 高丰 
国家自然科学基金资助项目(30671551);吉林省科技发展计划重点资助项目(20060206-2)
用血凝/血凝抑制试验(HA/HI)检测自制的猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)氢氧化铝胶灭活苗和蜂胶佐剂灭活苗免疫BALB/c小鼠后的抗体效价,依据小鼠抗体效价比较不同免疫佐剂的效果。结果表明,用氢氧化铝胶佐剂配制的疫苗可刺激接种动物产生快...
关键词:血凝性脑脊髓炎病毒 灭活疫苗 佐剂 
猪血凝性脑脊髓炎病毒HE基因的克隆及真核表达被引量:2
《吉林农业大学学报》2008年第6期853-857,共5页陆慧君 宋德光 贺文琦 尹继刚 王龙涛 高丰 
国家自然科学基金项目(30671551);吉林省科技发展计划重点项目(20060206-2)
应用特异性引物,从猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)中扩增出HE蛋白基因,PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体,得到重组质粒pTHE。用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pTHE,回收目的基因HE片段并将其定向克隆到pPICZαA中,构建重组质粒pPICZαA HE。用BstXⅠ酶切...
关键词:血凝性脑脊髓炎病毒 HE蛋白 克隆 表达 
猪血凝性脑脊髓炎病毒HE基因的克隆及原核表达被引量:2
《中国生物制品学杂志》2008年第4期273-276,280,共5页常灵竹 宋德光 贺文琦 陆慧君 李志萍 陈克研 高丰 
国家自然科学基金资助项目(30671551);吉林省科技发展重点项目(20060206-2)
目的构建猪血凝性脑脊髓炎病毒株(67N)血凝素酯酶蛋白(HE蛋白)原核表达系统,为建立特异性免疫学诊断方法提供备选材料。方法克隆猪血凝性脑脊髓炎病毒(67N)HE蛋白抗原表位富集区基因,构建重组表达质粒pET-HE,并在大肠杆菌中诱导表达。...
关键词:猪血凝性脑脊髓炎病毒 血凝素酯酶蛋白 克隆 原核表达 
猪血凝性脑脊髓炎病毒S1蛋白基因在毕赤酵母中的表达被引量:1
《中国兽医学报》2008年第1期1-4,共4页陆慧君 贺文琦 高丰 常灵竹 赵魁 盖显英 王龙涛 宋德光 
国家自然科学基金资助项目(30671551);吉林省科技发展计划重点资助项目(20060206-2)
应用特异性引物从猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)中扩增出S1蛋白基因,PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体中,得到重组质粒pTS1。用EcoRI和Not I双酶切pTS1,回收目的基因S1片段将其定向克隆到pPICZαA中,构建重组质粒pPICZαAS1。用BstXI酶切pPIC...
关键词: 血凝性脑脊髓炎病毒 S1蛋白 毕赤酵母 表达 
猪血凝性脑脊髓炎病毒PK细胞膜受体的鉴定
《农业生物技术学报》2008年第1期20-23,共4页陆慧君 贺文琦 宋德光 刘立国 常灵竹 李志萍 陈克研 高丰 
国家自然科学基金项目(No.30671551);吉林省科技发展计划重点项目(No.20060206-2)
在毕赤酵母(Pichia pastoris)中表达猪血凝性脑脊髓炎病毒(Hemagglutinating encephalomyelitis virus,HEV)67N株S蛋白片段,纯化后免疫家兔,获得兔抗HEV-S蛋白特异性抗体;提取PK细胞膜蛋白,SDS-PAGE电泳后,转印NC膜,以纯化的S1蛋白代替...
关键词:血凝性脑脊髓炎病毒(HEV) 病毒铺覆蛋白结合试验(VOPBA) 受体 
1株高致病性血凝性脑脊髓炎病毒的分离与鉴定被引量:9
《中国兽医学报》2007年第6期781-784,共4页贺文琦 陆慧君 宋德光 陈艳玲 李志萍 周玉 常灵竹 高丰 
国家自然科学基金资助项目(30671551);吉林省科技发展计划重点资助项目(20060206-2)
利用细胞培养方法从临床表现神经症状的死亡仔猪脑组织内分离获得1株病毒,同时对该病毒进行电镜负染观察、昆明种小鼠致病性试验、RT-PCR检测和部分基因测序分析。电镜观察可见细胞培养物中有大量的直径约115 nm的冠状病毒样粒子;接种...
关键词:猪血凝性脑脊髓炎病毒 分离鉴定 序列分析 
猪血凝性脑脊髓炎病毒RT-PCR方法的建立及初步应用被引量:15
《中国农学通报》2007年第9期15-18,共4页常灵竹 贺文琦 陆慧君 单昭 李志平 陈克研 高丰 
国家自然科学基金资助项目(30671551);吉林省科技发展发展重点项目(20060206-2)。
为了建立快速检测猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)的RT-PCR方法,根据GenBank中HEV的HE基因和S基因设计了1对引物,在优化RT-PCR反应条件的基础上,成功的扩增出323bp的特异性条带。检测与HEV亲缘性较高的牛冠状病毒及猪的伪狂犬病毒均为阴性,...
关键词:猪血凝性脑脊髓炎病毒 RT-PCR 病毒检测 
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