国家自然科学基金(30571375)

作品数：17被引量：55H指数：5
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相关期刊：《中国兽医杂志》《中国生物制品学杂志》《中国兽医学报》《吉林农业大学学报》更多>>
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麻鸡副黏病毒ZH-1株HN基因真核表达载体的构建及其免疫试验
《中国兽医杂志》2011年第9期15-17,I0002,共4页李红丽 詹丽娥 王彩先 唐娟 陆冰洋 
国家自然科学基金(30571375)
应用RT-PCR方法从麻鸡副黏病毒ZH-1株中扩增HN基因并克隆入pGEM-T载体,经序列测定、分析,结果显示ZH-1株HN基因与NDV国家标准强毒F48E9株的核苷酸、氨基酸序列同源性均达到92%。将HN基因克隆入真核表达载体pCI-neo,构建真核表达质粒pC-I...
关键词：麻鸡 副黏病毒 HN基因 表达 
麻鸡副黏病毒ZH-1株F基因核酸疫苗的构建及其免疫效果
《中国兽医学报》2010年第1期19-23,共5页詹丽娥 李红丽 丁壮 乔忠 王彩先 陆冰洋 
国家自然科学基金资助项目(30571375)
应用RT-PCR方法从麻鸡副黏病毒ZH-1株中扩增F基因并克隆入pGEM○R-T载体,经序列测定、分析,结果显示ZH-1株F基因与NDV国家标准强毒F48E9株的核苷酸、氨基酸序列同源性均达到99%。随后将F基因克隆入真核表达载体pCI-neo,构建真核表达质粒...
关键词：麻鸡 副粘病毒 F基因 表达 
RNAi靶向NP、L基因抑制鹅源副黏病毒在鸡胚成纤维细胞中的复制被引量：2
《中国兽医学报》2009年第6期705-709,共5页刘美 母连志 孟轲音 丁壮 丛彦龙 尹仁福 李志杰 
国家自然科学基金资助项目(30571375,30771606)
构建了针对鹅源副黏病毒(GPMV)NA-1株NP及L基因的RNA干扰质粒;将转染质粒36 h后的鸡胚成纤维细胞接种病毒,通过病毒滴度、实时荧光定量RT-PCR、细胞病变以及间接免疫荧光结果分析,表明均能抑制GPMV在CEF中复制和增殖。本试验对研究GPMV...
关键词：鹅源副黏病毒 RNA干扰 鸡胚成纤维细胞 抑制 
猪源副黏病毒JL-1株全基因获得及遗传变异分析被引量：2
《中国兽医学报》2009年第2期125-128,共4页吴昊 孟轲音 丁壮 尹仁福 毕玉海 丛彦龙 李志杰 王昌庆 刘美 邱蜜蜜 李少丽 
国家自然科学基金资助项目(30571375,30771606)
利用本实验室分离保存的猪源副黏病毒JL-1株来提取病毒基因组RNA。参考GenBank发表的相关禽副粘病毒Ⅰ型（Avian paramyxovirus serotype1，APMV-1）基因组序列，设计了8对特异性引物，RT—PCR法分别特异性的扩增出病毒各基因片段，并...
关键词：猪源副黏病毒 新城疫病毒 全基因组 
鹅源新城疫病毒F基因的原核表达及间接ELISA诊断方法的建立被引量：1
《中国兽医学报》2008年第12期1383-1386,共4页刘新鑫 孟轲音 尹仁福 丁壮 
国家自然科学基金资助项目(30571375,30771606)
参照GenBank公布的鹅源新城疫病毒NA-1株F基因(DQ659677)的核苷酸序列设计1对引物,通过PCR扩增F基因全长,将其克隆到pET-22b(+)载体中,构建了原核表达载体pET-22b(+)-F,转化大肠杆菌BL21(DE3),表达并纯化了重组蛋白,Western-blot证明该...
关键词：鹅源新城疫病毒 F基因 原核表达 间接ELISA 
新城疫病毒自然宿主细胞膜受体的鉴定被引量：4
《中国生物制品学杂志》2008年第8期651-653,共3页刘伟 丁壮 宣华 丛彦龙 宋战昀 李少丽 
国家自然科学基金资助项目(30571375)
目的鉴定鸡源副黏病毒F48E9株的自然宿主细胞膜受体。方法采用蛋白膜提取试剂盒提取鸡胚成纤维细胞膜蛋白,用改进的间接ELISA方法检测鸡源副黏病毒分离株F48E9与细胞膜的结合活性,利用病毒铺覆蛋白印迹技术(VOPBA)鉴定新城疫病毒(NDV)...
关键词：新城疫病毒 自然宿主 细胞膜受体 病毒铺覆蛋白印迹技术 
鹅源副黏病毒NA-1株F基因定点突变及其在Bac-to-Bac系统中的表达
《吉林农业大学学报》2008年第3期348-351,355,共5页杜眉 丁壮 徐明 宋子运 毕玉海 尹仁福 
国家自然科学基金项目(30571375)
根据已发表的鹅源副黏病毒(GPMV)NA-1株F基因序列设计2对引物,引物中含有突变位点,分3次扩增F基因片段,从而得到目的基因片段,再利用酶切位点将基因片段与转座载体pFastBac 1连接,获得重组质粒,命名为pFastBac 1-F′,从而使改造后的F′...
关键词：鹅源副黏病毒 F基因 定点突变 表达 
“拯救”NA-1株鹅源副黏病毒辅助质粒的构建及鉴定被引量：3
《中国兽医学报》2008年第5期515-517,526,共4页宋子运 丁壮 徐明 马爱霞 杜眉 常爽 毕玉海 尹仁福 
国家自然科学基金资助项目(30571375)
将本实验室保存的NA-1株鹅源副黏病毒(GPMV)经SPF鸡胚增殖,收集尿囊液进行病毒纯化,提取病毒基因组RNA。参考GenBank已收录的ZJ1株GPMV基因组序列,设计了4对特异性引物,利用RT-PCR法分别特异性的扩增出病毒NP、P和L基因片段,并将目的基...
关键词：鹅源副黏病毒 反向遗传操作技术 辅助质粒 间接免疫荧光 
猪源副粘病毒的分子鉴定被引量：7
《中国兽医学报》2008年第4期343-349,共7页毕玉海 丛彦龙 李志杰 吴昊 丁壮 
国家自然科学基金资助项目(30571375,30771606)
参照GenBank发表的相关猪源副粘病毒和禽源副粘病毒融合蛋白F基因核苷酸序列,设计并合成了4对引物,采用RT-PCR技术对本研究室分离的猪源副粘病毒JL-1株F基因进行探索性扩增、序列测定,在此基础上设计引物扩增HN基因、进行序列测定,分析F...
关键词：猪源副粘病毒 分子鉴定 融合蛋白基因 禽副粘病毒1型 
鹅源副粘病毒NA-1株与鸡新城疫病毒F48E9株的抗原变异关系分析被引量：4
《中国兽医学报》2008年第3期235-238,共4页李志杰 丁壮 毕玉海 徐明 
国家自然科学基金资助项目(30571375)
对鹅源副粘病毒NA-1株和鸡新城疫病毒F48E9株进行鸡胚半数感染量(EID50)与半数细胞感染量(TCID50)的测定,并采用交叉血凝抑制试验、鸡胚交叉中和试验、细胞交叉中和试验、交叉动物保护试验的比较,确定2种抗原的抗原比值和相似程度。结...
关键词：鹅源副粘病毒 鸡新城疫病毒 抗原变异 R值 病毒中和试验 
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