国家科技支撑计划(2007BAD40B01)

作品数：19被引量：66H指数：6
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相关作者：何孔旺张雪寒茅爱华俞正玉骆学农更多>>
相关机构：江苏省农业科学院南京农业大学中国农业科学院兰州兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
相关期刊：《中国兽医科学》《中国兽医学报》《中国农业科学》《中国人兽共患病学报》更多>>
相关主题：H7TIR溶血素O157:H7出血性大肠杆菌O157:H7更多>>
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单增李斯特菌P60单克隆抗体的制备及初步应用被引量：1
《中国人兽共患病学报》2015年第6期527-531,共5页殷茵 刘溯 王芳 朱学亮 周邦信 骆学农 
国家“十一五”科技支撑计划项目(No.2007BAD40B01)~~
目的制备并筛选单增李斯特菌P60特异性单克隆抗体,初步建立其快速检测方法。方法以体外表达并纯化的李斯特菌P60蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗李斯特菌P60的McAb,鉴定其抗体亚型,并对单抗的腹水效价、稳定性及亲和力...
关键词：单增李斯特菌 P60 单克隆抗体 鉴定 ELISA 
肠出血性大肠杆菌O157∶H7 Intimin和Tir-Tccp蛋白质对小鼠的免疫保护性
《江苏农业学报》2011年第6期1300-1304,共5页赵攀登 张雪寒 何孔旺 姜平 卢维彩 栾晓婷 叶青 温立斌 倪艳秀 李彬 王小敏 郭容利 周俊明 吕立新 俞正玉 茅爱华 
国家“十一五”科技支撑计划项目(2007BAD40B01);江苏省农业科技自主创新基金项目[CX(09)106];江苏省农业科学院后备人才基金项目(6510804);江苏省自然科学基金项目(BK2010068)
为了研究不同浓度的肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7 Intimin和Tir-Tccp蛋白质对接受1010 CFUEHEC O157∶H7小鼠的免疫保护作用,将Intimin和Tir-Tccp蛋白质和佐剂充分乳化后,通过皮下多点注射免疫小鼠,对照组注射等量的磷酸盐缓冲液。...
关键词：肠出血性大肠杆菌O157∶H7 Intimin蛋白质 Tir-Tccp蛋白质 免疫原性 小鼠 
EHEC O157：H7二重PCR的建立及应用被引量：7
《华北农学报》2011年第6期59-66,共8页李丽 张雪寒 何孔旺 姜平 赵攀登 叶青 栾晓婷 温立斌 倪艳秀 周俊明 吕立新 郭容利 俞正玉 茅爱华 李彬 王小敏 
国家“十一五”科技支撑计划(2007BAD40B01);江苏省农业科技自主创新资金(cx(09)106);江苏省农业科学院后备人才基金(6510804);江苏省自然科学基金(BK2010068)
建立用于从临床样品中检测EHEC O157:H7的二重PCR方法。根据GenBank登录EHEC O157:H7序列,通过对菌体和鞭毛抗原保守性核苷酸序列的比对和分析,分别设计编码O抗原rfbE基因和编码H抗原fliC基因各1对特异性引物,建立二重PCR检测方法,并以E...
关键词：O157:H7 二重PCR 方法建立 细菌分离 样品检测 
出血性大肠杆菌O157：H7 Stx2B-Tir-Stx1B多价融合蛋白表达及免疫原性研究被引量：9
《华北农学报》2010年第4期180-185,共6页张雪寒 何孔旺 卢维彩 赵攀登 温立斌 李彬 郭容利 王小敏 倪艳秀 周俊明 俞正玉 茅爱华 吕立新 
国家支撑计划(2007BAD40B01);江苏省农业自主创新资金(cx(09)106);江苏省农业科学院后备人才基金(6510804)
为了更好防治由出血性大肠杆菌O157∶H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗时具有很大优势。构建表达tir和stx1b的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stx1b亚基基因72个氨基酸串联构建pGEX-stx2b-tir-stx1b...
关键词：EHECO157∶H7 转位紧密素受体 志贺毒素 融合基因 免疫原性 
重组蛋白P60与LLO对单核细胞增多性李斯特菌灭活疫苗的免疫增强效果被引量：1
《中国兽医科学》2010年第6期609-615,共7页周邦信 才学鹏 张少华 巩伟 曾巧英 窦永喜 王芳 骆学农 
国家"十一五"科技支撑计划项目(2007BAD40B01);国家农业公益性行业科研专项(200803026)
为增强单核细胞增多性李斯特菌(简称单增李斯特菌)灭活疫苗的免疫效果,对单增李斯特菌入侵相关蛋白(P60)基因进行了克隆、表达及纯化,分别与低剂量李斯特菌溶血素O(LLO)、单增李斯特菌灭活菌混合,以MontanideISA206为佐剂制成疫苗,皮下...
关键词：单核细胞增多性李斯特菌 重组蛋白P60 白介素-4 Γ干扰素 疫苗 保护性 
肠出血性大肠杆菌O157:H7Tir基因的克隆、表达及生物学活性研究
《中国农业科学》2010年第12期2570-2577,共8页张雪寒 何孔旺 茅爱华 周俊明 俞正玉 温立斌 倪艳秀 郭容利 吕立新 
国家"十一五"科技支撑计划(2007BAD40B01);江苏省农业科技自主创新资金(cx(09)106);江苏省农业科学院后备人才基金(6510804)
【目的】克隆、表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7转位紧密素受体(Tir)基因,并研究其抗原性。【方法】选用pET28原核表达载体,体外构建Tir原核表达重组菌,并在大肠杆菌中获得高效表达。选用家兔制备高滴度多克隆抗体,Western blot分析...
关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 转位紧密素受体 表达 粘附 A/E损伤 免疫保护 
大肠杆菌O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制被引量：9
《中国预防兽医学报》2010年第5期375-378,共4页刘洁 夏兴霞 王永山 张雪寒 费荣梅 何孔旺 
国家支撑计划资助项目(2007BAD40B01)
为建立快速检测鼠感染大肠杆菌O157∶H7后的抗体,本研究采用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157∶H7抗原和抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测...
关键词：肠出血性大肠杆菌O157∶H7 胶体金 免疫层析试纸条 鼠 
出血性大肠杆菌O157:H7的Tir与Hly融合基因的构建和表达
《中国兽医学报》2010年第5期647-650,共4页张雪寒 何孔旺 卢维彩 李丽 茅爱华 周萍 
国家支撑计划基金资助项目(2007BAD40B01)
构建表达Tir和Hly的融合基因,将Tir基因的C端414个氨基酸残基(Tir414)基因部分与Hly基因的C端300个氨基酸残基(Hly300)基因部分串联构建pET28a-Tir414-Hly300重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融...
关键词：EHECO157:H7 转位紧密素受体 溶血素 融合基因 
重组产单核细胞李斯特菌溶血素的应用研究
《中国畜牧兽医》2010年第3期105-108,共4页赵松波 张少华 周邦信 窦永喜 孙晓林 骆学农 
十一五国家支撑计划项目"食物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究(2007BAD40B01)"
李氏杆菌溶血素（Listeriolysin,LLO）是产单核细胞李斯特菌的主要毒力因子,为探索LLO的免疫保护性和作为诊断抗原的可行性,本研究用重组LLO抗原和单核细胞增多性李氏杆菌（Listeria monocytogenes,LM）全菌分别免疫BALB/c小鼠和家兔,...
关键词：重组LLO蛋白 ELISA 免疫 保护性 
鼠伤寒沙门氏菌Χ4550 FlhD基因缺失株的构建被引量：6
《中国兽医科学》2010年第1期1-6,共6页耿士忠 潘志明 方强 胡娇 陈祥 焦新安 
国家自然科学基金项目(30871860);国家科技支撑计划项目(2007BAD40B01);江苏省自然科学基金项目(BK2007511,BK2008011)
为构建鼠伤寒沙门氏菌Χ4550FlhD基因缺失所致的鞭毛缺失株,采用PCR技术从减毒鼠伤寒沙门氏菌Χ4550基因组DNA中扩增出了鞭毛控制操纵子基因(FlhD)两侧翼基因片段,作为FlhD基因敲除所需的上臂和下臂的同源序列;以pKD4质粒为模板,扩增了...
关键词：鼠伤寒沙门氏菌X4550 FlhD基因 同源重组 鞭毛缺失 
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