体外定向进化

作品数:26被引量:81H指数:5
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草生欧文氏菌中酪氨酸酚裂解酶的体外定向进化及结构模拟
《化学与生物工程》2023年第7期34-39,44,共7页郭小雷 
福建省中科院STS院省合作重大项目(2022T3004)。
以来源于草生欧文氏菌(Erwinia herbicola)的酪氨酸酚裂解酶(Eh-TPL)为目的基因,通过易错PCR定向进化技术构建突变体文库,利用高通量筛选方法获得了比酶活提高的突变体S20C和E202R,再通过定点突变得到突变体S20C/E202R/N161S。经摇瓶发...
关键词:易错PCR 定向进化 草生欧文氏菌 酪氨酸酚裂解酶 L-酪氨酸 
转座酶Tn3体外定向进化和酶活力提高方法的建立
《中国畜牧兽医》2020年第4期984-991,共8页宋尚桥 马围围 李晓剑 曾素先 李鑫 严瑾 孙翠翠 黎宗强 
广西壮族自治区科技计划项目-重点研发计划(桂科AB16380072)。
试验旨在对转座酶Tn3的酶活力提高和进化进行初步探索。采用PCR扩增、限制性酶切、DNA连接、重组质粒的转化、易错PCR的优化及构建、D值的测定、酶切鉴定方法对转座酶Tn3进行体外定向进化研究。结果表明,用SacⅠ和XbaⅠ对重组质粒进行酶...
关键词:Tn3 易错PCR DNA重排 定向进化 酶切产物 基因序列 
转座酶TN3体外定向进化研究概况被引量:1
《动物医学进展》2020年第2期109-113,共5页马围围 曾素先 宋尚桥 王睿敏 严瑾 孙翠翠 李鑫 黎宗强 
广西壮族自治区科技计划项目(桂科AB16380072)
Tn3是存在于生物体内的一种非常重要的转座酶,其是基因组中具有一段特异的转位特性的独立的DNA序列,从而对目的基因起调控作用。转座酶Tn3具有基因敲除的功能,Gal4能识别DNA启动子上游两端保守的17bp长的一段序列,因此将Tn3与Gal4相组合...
关键词:Tn3 转座酶 Gal4 基因敲除 定向进化 
DNA展示系统介导的断裂蛋白质内含子体外定向进化方法的研究
《中国生物化学与分子生物学报》2016年第10期1121-1131,共11页林森珠 陈格飞 孟清 
上海市科委攻关项目(No.14521100700);上海市科委国际合作项目(No.14520720200);国家外专局"高端外国专家项目"(No.GDW20143100071);国家自然科学基金面上项目(No.31570721);教育部直属高校学校特色项目(No.TS2011DHDX025)资助~~
蛋白质内含子对于外显子的选择性限制了它的应用范围。目前,已经建立的卡那霉素定向进化系统适用于微小蛋白质内含子,但不适用于断裂蛋白质内含子。为了研究适用于断裂蛋白质内含子的定向进化的方法,我们引入了DNA展示系统。在该系统中...
关键词:断裂蛋白质内含子 体外定向进化 DNA展示系统 人工细胞 体外转录翻译系统 
枯草芽孢杆菌β-糖苷酶的克隆表达、体外定向进化及结构模拟被引量:1
《微生物学报》2015年第10期1273-1283,共11页刘震 陈倩 陈荫楠 王祖鑫 朱秋享 石贤爱 
国家海洋公益性行业科研专项子课题(201205022-3);福建省科技重大专项(2013NZ0003)~~
【目的】从枯草芽孢杆菌基因组DNA中扩增出bgl C基因并在大肠杆菌中表达,分析表达产物的酶学性质并进行结构模拟,为进一步研究其生理功能及结构解析奠定基础。【方法】将bgl C基因克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,通...
关键词:异源表达 易错PCR 底物特异性 CD光谱 寡聚体 结构建模 
木聚糖酶基因的体外定向进化被引量:3
《动物营养学报》2013年第10期2202-2211,共10页杜文 王谦 王佳堃 刘建新 
国际原子能合作项目(RC-16327-R0)
木聚糖酶在天然材料中基因表达水平低、活性差、生产成本高,严重限制了它的推广应用。宏基因组学通过免培养技术,研究生境中全部微小生物遗传物质的总和,在开发微生物酶资源上具有强劲的优势。体外定向进化技术模拟达尔文的自然进化论,...
关键词:木聚糖酶基因 宏基因组学 体外定向进化 
蛋白质体外定向进化策略研究进展被引量:4
《生物技术通报》2012年第7期36-40,共5页付畅 林海龙 李海莹 王得江 
国家自然科学青年基金项目(51108146);教育部高等学校博士学科点专项科研基金联合资助课题(20102329120002)
定向进化已广泛应用于蛋白质的分子改造,是改善蛋白质特性的最有效策略之一。为了获得更高的突变效率,构建含有更多突变体的文库,不断地发明创新各种高效的蛋白质体外定向进化方法。对近年来出现的几种定向进化方法三核苷酸突变(TriNex...
关键词:定向进化 三核苷酸突变 序列饱和突变 随机链交换突变法 重叠延伸蛋白域文库法 迭代饱和突变法 
构建突变基因文库的定向进化研究进展被引量:1
《科技信息》2012年第10期98-99,共2页马玉成 姜玉新 
1.介绍定向分子进化是在实验室条件下模拟自然选择过程,改变原有蛋白的氨基酸序列,以期找寻预期性能的突变蛋白。定向分子进化实验的成功与否取决于制备的突变体库的质量和简捷、高效的筛选方法。随着体外定向进化分子改造新策略的不断...
关键词:体外定向进化 基因文库 突变体库 功能蛋白质组学 实验室条件 功能基因组学 分子进化 氨基酸序列 
典型POPs的生物降解修复技术研究与发展被引量:6
《生态环境学报》2012年第1期166-171,共6页吴海珍 韦朝海 周盛 
国家教育部高校博士点基金项目(20090172110028);国家自然科学基金项目(21037001);国家863计划项目(2009AA06Z319);广东省科技计划项目(2009B020311001)
生物吸附与降解是解决持久性有机污染物(POPs)最有潜力的方法之一,有必要介绍利用微生物把目标污染物转化为易降解的物质甚至矿化的POPs修复原理及其技术。对此,概述了近年来国内外基于微生物通过膜融合、胞质融合和核融合形成能够降解P...
关键词:生物修复 持久性污染物 多溴联苯醚 细胞融合技术 酶固定化技术 基因工程 体外定向进化 
蛋白质工程技术及其在生物药物研发中的应用被引量:5
《药学进展》2011年第12期529-536,共8页张新国 陈文洁 曾艳龙 王强林 李坤 
甘肃省自然基金(No.1107RJZA225);兰州理工大学科研发展基金(No.0908ZXC126)
蛋白质工程技术是在基因水平上通过分子设计和DNA重组技术合成自然界不存在的蛋白质的新技术。介绍定点突变、体外定向进化和tRNA介导蛋白质工程3类蛋白质工程技术,并综述其在生物药物研发中的应用。
关键词:蛋白质工程技术 生物药物 定点突变 体外定向进化 tRNA介导蛋白质工程 
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