扩增内标

作品数：27被引量：150H指数：8
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2种十字花科检疫性病菌快速检测方法的建立
《西南农业学报》2023年第9期1962-1971,共10页于璇 魏霜 姜子德 王卫芳 
海关总署科研项目(2020HK147);广州海关科研项目(2020GZCK⁃004)。
【目的】人工构建一段随机序列并作为扩增内标(Internal amplification control,IAC)添加进实时荧光PCR体系中,建立含有扩增内标的十字花科细菌性黑斑病菌(Pseudomonas syringae pv.maculicola)和油菜茎基溃疡病菌(Leptosphaeria macula...
关键词：油菜籽 油菜茎基溃疡病菌 细菌性黑斑病菌 扩增内标 
马铃薯斑纹片病菌含扩增内标的双重实时荧光PCR检测
《植物检疫》2021年第2期53-58,共6页丁钿 魏霜 林晓红 李献锋 陈晓路 乾义柯 田茜 赵文军 
中国检验检疫科学研究院基本科研业务费项目(2019JK019);广州海关科技计划项目(2020GZCK-003);海关总署科技计划项目(2020HK147)。
马铃薯斑纹片病菌(Candidatus Liberibacter solanacearum)是一种主要为害伞形花科和茄科植物的重要有害生物,目前无法人工培养且可随种子远距离传播。准确灵敏的PCR检测方法对病害预警和防止扩散具有重要意义。本文通过复合引物法构建...
关键词：扩增内标 实时荧光 马铃薯斑纹片病菌 假阴性 
添加扩增内标的逆转录重组酶聚合酶扩增技术检测三种大豆病毒被引量：4
《农业生物技术学报》2020年第12期2261-2269,共9页袁俊杰 龙阳 渭婷玉 刘二龙 冯黎霞 刘思思 陈文 魏霜 
国家重点研发计划(2018YFC0809200);海关总署科技计划项目(2020HK147,2019HK052)。
假阴性结果是影响核酸检测结果的主要因素之一。扩增内标(internal amplification control,IAC)在监控PCR过程中假阴性结果发挥着重要作用。为探索扩增内标在逆转录重组酶聚合酶常温扩增(reverse transcription-recombinase polymerase ...
关键词：大豆花叶病毒(SMV) 菜豆荚斑驳病毒(BPMV) 南方菜豆花叶病毒(SBMV) 逆转录重组酶聚合酶常温扩增(RT-RPA) 扩增内标(IAC) 
利用添加扩增内标的重组酶聚合酶法检测霍乱弧菌被引量：1
《检验检疫学刊》2019年第5期1-5,共5页庄濠宇 李伟 李窕妍 张峥嵘 温尔英 陈冬娥 周广彪 
原广东出入境检验检验局科技计划项目(2017GDK48);汕头市科技计划项目(汕府科〔2017〕166号-38)
本文根据霍乱弧菌的ompW基因的保守序列,设计重组酶聚合酶扩增(RPA)特异性引物,构建添加β-action基因为扩增内标的霍乱弧菌RPA-IAC检测方法。从扩增中可得到280 bp的目标基因片段和337 bp的扩增内标片段,该方法特异性良好,检测限与普通...
关键词：霍乱弧菌 重组酶聚合酶扩增 扩增内标 
马铃薯斑纹片病菌IAC-PCR检测方法被引量：2
《植物检疫》2019年第5期22-27,共6页丁钿 魏霜 李新浩 章柱 余辛 胡学难 赵文军 
中国检科院基本科研业务基项目(2019JK019);广州市科技计划项目(201604046002);原广东出入境检验检疫局科技计划项目(2018GDK26)
马铃薯斑纹片病菌(Candidatus Liberibacter solanacearum)是危害茄科、伞形花科植物的一种重要病原细菌,目前尚不能人工培养,PCR是常用检测方法。为了克服PCR检测中的假阴性,通过复合引物法人工构建扩增内标(internal amplification co...
关键词：扩增内标 检测 马铃薯斑纹片病菌 PCR 
添加扩增内标的重组酶聚合酶扩增技术(RPA-IAC)检测创伤弧菌被引量：7
《检验检疫学刊》2019年第3期5-8,共4页李伟 庄濠宇 温尔英 张峥嵘 黄琦容 周广彪 
汕头市科技计划项目(汕府科[2017]166号-38);广东出入境检验检验局科技计划项目(2017GDK48)
根据编码创伤弧菌的基因保守序列,设计重组酶聚合酶扩增(RPA)特异性引物,以β-actin基因为内标基因,创伤弧菌gryB基因为目标基因的RPA-IAC的检测方法。37℃,恒温40min,扩增得到234bp的特异性条带及334bp的扩增内标片段,检测限可达到0.1...
关键词：创伤弧菌 重组酶聚合酶扩增技术 扩增内标 
添加扩增内标的PCR方法快速检测食品中的阪崎克罗诺杆菌被引量：7
《食品工业科技》2017年第2期49-52,58,共5页张德福 赵禹宗 张明 仪淑敏 赵文竹 汤轶伟 李春 励建荣 
辽宁省教育厅项目(LY2016001);辽宁省重点实验室开放课题(LNSAKF2013018);辽宁省高等学校创新团队项目(LT2014024)
为了解决常规PCR方法检测阪崎克罗诺杆菌时因检测过程中环境和食品理化因素的影响而导致的假阴性结果的产生,本研究以细菌16S rRNA基因为扩增内标对照,以阪崎克罗诺杆菌特异性基因grx B为靶基因设计了一对特异性引物,并通过优化PCR反应...
关键词：阪崎克罗诺杆菌 扩增内标 假阴性 PCR检测 
多重富集定量PCR(ME-qPCR)同时检测4种食源性病原弧菌被引量：8
《中国农业科学》2016年第23期4619-4627,共9页魏霜 汪天杰 龙阳 周广彪 林春贵 黄帅 吴希阳 
广东省科技计划项目-国际科技合作领域(2015A050502030);湛江市科技计划项目(2014C01007);广东出入境检验检疫局科技计划项目(2015GDK27)
【目的】溶藻弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌是4种重要的食源性病原弧菌,能够造成人类多种疾病,建立同时检测这4种食源性病原弧菌的检测方法是保障食品安全的基础。本研究旨在建立同时检测溶藻弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、霍乱...
关键词：霍乱弧菌 创伤弧菌 副溶血弧菌 溶藻弧菌 扩增内标 多重富集定量PCR 
含扩增内标的犬巴贝斯虫PCR检测方法的建立被引量：2
《中国兽医科学》2016年第11期1376-1382,共7页贺卫华 杨伦 姜敏 谈明霞 姚大伟 
江苏高校品牌专业建设工程资助项目(TAPP);南京农业大学SRT计划基金项目(1417A04)
为了提高犬巴贝斯虫的PCR检测方法准确性,采用复合引物重组方法构建两端含有检测巴贝斯虫18S r RN A基因的PCR检测引物的扩增内标质粒(含鸡特异性基因片段),通过优化扩增内标质粒的添加量,建立了一种新的检测犬巴贝斯虫PCR方法。结果显...
关键词：巴贝斯虫 犬 PCR 扩增内标 假阴性 
添加扩增内标的单增李斯特菌PCR检测方法的建立与应用被引量：4
《食品与发酵工业》2016年第9期192-196,共5页张德福 赵禹宗 付绪磊 张明 仪淑敏 徐永霞 殷喆 李春 励建荣 
"十二五"国家科技支撑计划项目(2012BAD29B06);博士后科学基金(2015M582803);病原微生物生物安全国家重点实验室开放课题(SKLPBS1520);辽宁省重点实验室开放课题(LNSAKF2013018);辽宁省高等学校创新团队项目(LT2014024)
以单增李斯特菌inl A基因为靶基因,设计一对特异性引物,以16S rRNA为扩增内标对照,建立了一种含有扩增内标的单增李斯特菌PCR检测方法。优化了PCR反应体系,并对PCR检测方法的特异性、灵敏度、人工污染样品及食品样品检测效果进行了测试...
关键词：单增李斯特菌 聚合酶链式反应 检测方法 扩增内标 内化素基因 
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