易错PCR

作品数：113被引量：249H指数：8
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通过易错PCR提高鼠伤寒沙门氏菌丙氨酸消旋酶催化活性被引量：2
《微生物学报》2020年第11期2475-2486,共12页郑豆豆 罗素亚 杜穆花 何广正 徐书景 鞠建松 
国家自然科学基金(31971204);河北师范大学科研基金(L2017K07,L2019B30);河北师范大学研究生创新资助项目。
【目的】通过易错PCR技术提高鼠伤寒沙门氏菌中丙氨酸消旋酶的催化活性。【方法】利用易错PCR技术构建丙氨酸消旋酶基因alrSt的突变体文库,采用缺陷菌株UT5028筛选突变体基因,以D-氨基酸氧化酶偶联法检测各突变蛋白的活性,通过凝胶过滤...
关键词：鼠伤寒沙门氏菌 丙氨酸消旋酶 易错PCR 低聚化 催化活性 
四环素与3,4-苯并芘复合污染对抗性基因tetA(C)产生高抗性突变的影响
《微生物学报》2020年第8期1605-1615,共11页俞珊珊 李根 黄萌 程思 武俊 
国家自然科学基金(31470551,41571244)。
【目的】探究环境中同时存在低浓度四环素(tetracycline,TC)和3,4-苯并芘(benzo[a]pyrene,Bap)对抗性基因tetA(C)产生高抗性突变的影响。【方法】以大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)为宿主菌株,pACYC184质粒作为载体,四环素抗性基因te...
关键词：四环素 3 4-苯并芘 抗性基因 基因突变 易错PCR 
一个新的L-半胱亚磺酸脱羧酶基因的分析和突变
《微生物学报》2017年第8期1283-1292,共10页邓洁 吴巧芬 高华 徐悦 欧倩 武波 蒋承建 
国家自然科学基金(21262003);2017年度广西高等教育创优计划教学相关项目-优势特色专业项目(优质本科专业)~~
【目的】完成一个来源于碱性污染土壤宏基因组文库的新的L-半胱亚磺酸脱羧酶基因undec1A的鉴定,研究其酶学性质并利用非理性设计技术对其进行分子改造。【方法】以p ETBlue-2为表达载体构建包含undec1A基因的重组表达质粒,转化至宿主细...
关键词：牛磺酸 L-半胱亚磺酸脱羧酶 宏基因组文库 连续易错PCR技术 突变酶 
应用易错PCR技术提高环糊精葡萄糖基转移酶的可溶性表达被引量：2
《微生物学报》2016年第10期1551-1560,共10页郭永华 陈济琛 贾宪波 陈龙军 蔡海松 林新坚 
国家公益性农业科研专项(201303094-05);福建省自然科学基金项目(2014J01105);福建省属公益类科研院所基本科研专项(2014R1022-3);福建财政社会公益研究(2060302)~~
【目的】对嗜热脂肪芽孢杆菌CHB1的环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)基因进行定向进化,筛选得到胞外酶活性和可溶性表达定量提高的突变酶。【方法】采用易错PCR技术向环糊精葡萄糖基转移酶基因中随机引入突变,建立酶基因突变文库,筛选获得...
关键词：嗜热环糊精葡萄糖基转移酶 可溶性表达 定向进化 易错PCR 
枯草芽孢杆菌β-糖苷酶的克隆表达、体外定向进化及结构模拟被引量：1
《微生物学报》2015年第10期1273-1283,共11页刘震 陈倩 陈荫楠 王祖鑫 朱秋享 石贤爱 
国家海洋公益性行业科研专项子课题(201205022-3);福建省科技重大专项(2013NZ0003)~~
【目的】从枯草芽孢杆菌基因组DNA中扩增出bgl C基因并在大肠杆菌中表达,分析表达产物的酶学性质并进行结构模拟,为进一步研究其生理功能及结构解析奠定基础。【方法】将bgl C基因克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,通...
关键词：异源表达 易错PCR 底物特异性 CD光谱 寡聚体 结构建模 
易错PCR法提高土芽孢杆菌ZH1羧酸酯酶的热稳定性被引量：3
《微生物学报》2015年第8期1060-1067,共8页刘韩 吴丽云 高贺 倪辉 蔡慧农 朱艳冰 
国家自然科学基金项目(31401632);集美大学科研创新团队基金项目(2010A006)~~
【目的】对土芽孢杆菌(Geobacillus sp.)ZH1的羧酸酯酶基因进行定向进化,筛选得到酶热稳定性提高的突变酶。【方法】利用易错PCR技术向羧酸酯酶基因中随机引入突变,建立酶基因突变文库,筛选获得热稳定性提高的突变体,并对突变酶进行诱...
关键词：定向进化 易错PCR 羧酸酯酶 热稳定性 
一种降低dATP用量的简单易错PCR方法
《微生物学报》2014年第1期97-103,共7页高义平 赵和 吕孟雨 孙果忠 杨学举 王海波 
国家自然科学基金项目(30270855)~~
易错PCR是基因体外诱变的主要方法之一,是通过在PCR体系中添加Mn2+、提高Mg2+浓度和dCTP/dTTP浓度等措施达到基因诱变的目的。【目的和方法】本研究在不添加Mn2+、不调整其它任何PCR成分的情况下,通过降低dATP浓度的底物不平衡作用,对...
关键词：易错PCR 体外诱变 碱基突变 序列变异 洋葱抗菌蛋白基因 BT基因 
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