李福胜

作品数：11被引量：45H指数：3
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供职机构：中国预防医学科学院更多>>
发文主题：克隆GM-CSF快速纯化大肠杆菌高效表达载体更多>>
发文领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
发文期刊：《中国生物制品学杂志》《中国生物化学与分子生物学报》《病毒学报》《中国现代医学杂志》更多>>
所获基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
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四环素抗性表型筛选外源基因高效表达克隆
《河南医科大学学报》2001年第3期267-271,共5页李玉富 孙声桃 李继昌 李福胜 张智清 
国家"8 63"高科技计划资助项目! 83 10 2 11 0 9
目的 :应用四环素抗性表型从外源基因的cDNA文库中筛选高效表达克隆。方法 :将四环素抗性基因(TetR)克隆到载体pBV2 2 0 中构建筛选载体pBV2 2 3 ;根据氨基酸密码子的简并性 ,在保持原有氨基酸序列不变的情况下 ,人工合成外源基因的cDN...
关键词：四环素抗性GM-CSF 克隆 筛选 CDNA文库 外源基因 
人肝癌特异性EB病毒载体-p^(EBAF)介导hGM-CSF基因的转移及表达被引量：3
《中国现代医学杂志》2001年第3期17-19,共3页李玉富 张俊萍 孙声桃 李继昌 李福胜 张智清 
"863"高科技计划资助项目! (863 -10 2 -11-0 9)
目的 :探索人粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (hGM -CSF)基因在肝癌细胞中特异性表达的新途径。方法 :构建 pEBAF/hGM -CSF基因克隆 ,用脂质体转染法将它分别导入分泌甲胎蛋白 (AFP)的肝癌细胞株HepG2和不分泌APF的细胞株SMMC772 1,构建...
关键词：EB病毒表达载体 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 基因治疗 肝癌 
中国分离的甲属病毒YN87448毒株非结构区基因的核苷酸序列测定及分析被引量：20
《中华实验和临床病毒学杂志》1999年第4期314-320,共7页周国林 梁国栋 李蕾 付士红 李福胜 金奇 张海林 黄文丽 侯云德 
国家自然科学基金!项目编号 :3 982 3 0 0 2
目的　研究我国首例从发热病人血清中分离的YN87448病毒的分子致病基础。方法　甲属病毒基因序列保守区设计引物,用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法扩增,再将扩增片段克隆到pGEMT载体。测定YN87448毒株非结构基因序列。结果　YN87448病...
关键词：甲病毒属 分子克隆 聚合酶链反应 碱基序列 
我国分离的甲病毒YN87448毒株全部结构区基因核苷酸的序列测定及分析被引量：18
《病毒学报》1999年第3期205-211,共7页周国林 梁国栋 李蕾 付士红 李福胜 金奇 张海林 黄文丽 侯云德 
国家自然科学基金
Ｙ Ｎ８７４４８ 毒株１９８６ 年分离自云南傣族５２ 岁女发热病人的血液标本，曾用血清学方法鉴定为披膜病毒科甲病毒属。用我们创立的单引物差异 Ｒ Ｔ－ Ｐ Ｃ Ｒ 方法及简并引物 Ｒ Ｔ－ Ｐ Ｃ Ｒ 法均已证明：该病毒为甲病毒属...
关键词：辛德毕斯样病毒 克隆 RT-PCR 核苷酸 序列 
粒细胞集落刺激因子(G-CSF)在大肠杆菌中的高效表达及快速纯化工艺的建立被引量：2
《中国生物化学与分子生物学报》1998年第5期479-484,共6页李福胜 贡惠宇 赵炳文 余彩玲 侯斌 陈爱君 张智清 侯云德 
基因工程重组人粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）主要用于癌症患者化疗后的粒细胞减少症．在正确克隆人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ的基础上，重点对Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ的５′端进行了较为彻底的修饰，修饰后的基因插入ｐＢＶ２２０载体组...
关键词：G-CSF 原核表达 纯化 PBV220 基因修饰 
一种筛选原核高效表达克隆的方法
《中华实验和临床病毒学杂志》1997年第4期311-314,共4页李福胜 李玉富 邵华 张智清 侯云德 
外源基因在大肠杆菌中的低表达往往与基因５’端核苷酸序列不利于翻译起始有关。未经修饰的ＧＭ－ＣＳＦ在大肠杆菌中表达量很低，我们选用ＧＭ－ＣＳＦ作为报道基因，在不改变氨基酸序列的前提下，通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增，构...
关键词：原核表达 GM-CSF 四环素抗性基因 质粒 
表达产物可用IMAC快速纯化的原核表达载体的组建与应用被引量：2
《生物工程学报》1997年第1期42-46,共5页李福胜 贡惠宇 李玉富 张智清 侯云德 
国家"863"高科技计划资助
以原核高效表达载体ｐＢＶ２２０为骨架载体，采用互补寡核苷酸插入法在ｐＢＶ２２０多克隆位点的上游插入了起始密码子和６组氨酸编码序列，将此新质粒命名为ｐＢＶ２２２，以此载体表达的目的蛋白在Ｎ段带有Ｈｉｓ６尾以利于ＩＭＡ...
关键词：基因表达载体 表达产物 固定化金属 亲和层析 
粒细胞巨噬细胞集落刺激因子受体α链（GMCSFRα）的克隆与表达
《生物工程学报》1996年第S1期84-91,共8页李福胜 王智峰 贡慧宇 张智清 侯云德 
ＧＭＣＳＦ高亲和力受体至少由两条链组成，低亲和力的α链及无结合力活性的β链。本文采用ＲＴＰＣＲ的方法，从ＧＭＣＳＦ依赖细胞株ＴＦ１中克隆了全长的ＧＭＣＳＦＲα链ｃＤＮＡ（包括信号肽部分），经酶切及全基因测序...
关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 可溶性受体 GST融合蛋白 COS7细胞 
GM-CSF(12-127)突变体生物学活性的研究被引量：1
《中国生物制品学杂志》1996年第3期97-101,共5页李福胜 张智清 邵华 刘红兵 侯云德 
GM－CSF的结构与功能研究表明，N-端的1～13位氨基酸并非生物学活性所必需，且干扰与受体的结合。作者采用PCR突变的方法删除1～11位的氨基酸，保留12位的脯氨酸。突变后的基因经全序列测定证实，之后插入原核高效表达载体pBV220中表达...
关键词：GM-CSF 重组 粒细胞巨噬细胞 集落刺激因子 
大肠杆菌表达的rhGM—CSF发酵纯化工艺研究被引量：6
《中国生物制品学杂志》1996年第3期124-128,共5页段淑敏 李福胜 杨新科 陈文涛 
重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM－CSF）基因表达产物在大肠杆菌的胞浆中以不溶性包涵体的形式存在、包涵体用超声破菌分离后，经变性、复性，用流水层析、离子交换层析、凝胶过滤层析等进行纯化。SDS—PAGE表明终产物纯度达97...
关键词：粒细胞巨噬细胞 集落刺激因子 RHGM-CSF 发酵 
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