刘方娜

作品数：20被引量：32H指数：3
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供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
发文主题：克隆与序列分析猪胸膜肺炎放线杆菌鸡传染性支气管炎胸膜肺炎放线杆菌鸡传染性支气管炎病毒更多>>
发文领域：农业科学生物学轻工技术与工程经济管理更多>>
发文期刊：《动物医学进展》《黑龙江畜牧兽医》《中国兽医学报》《中国兽医杂志》更多>>
所获基金：济南市科技攻关项目山东省科技攻关计划重大科技专项山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
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猪胸膜肺炎放线杆菌蛋白酶的分离纯化及特性分析
《中国兽医学报》2008年第9期1023-1027,共5页张瑞平 刁有祥 张伟 杜爱庆 刘方娜 臧大鹏 
山东农业大学科技创新基金资助项目(23414)
将血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)山东分离株接种含0.2%NAD的LB液体培养基,37℃培养48 h后,经硫酸铵盐析、DEAE-纤维素离子交换层析、葡聚糖凝胶分子筛层析,从其培养上清液中分离纯化了1种蛋白酶。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,APP蛋白...
关键词：胸膜肺炎放线杆菌 蛋白酶 分离纯化 特性分析 
鹅副黏病毒核酸探针检测方法的建立与应用被引量：1
《中国兽医学报》2008年第8期879-882,896,共5页张伟 刁有祥 杜爱庆 高晓伟 张瑞平 刘方娜 臧大鹏 刘霞 
山东省重大科技攻关资助项目(011020102)
根据GenBank中已发表的鹅副黏病毒F基因序列,设计合成1对引物,利用RT-PCR扩增出1条与目的片段大小一致,约856bp的基因片段,回收并纯化此PCR产物。用随机引物法合成cDNA,地高辛标记,建立了地高辛标记探针检测鹅副黏病毒的方法。该探针能...
关键词：鹅副黏病毒 地高辛标记探针 RT-PCR 
猪圆环病毒2型地高辛标记探针检测方法的建立与应用被引量：5
《中国兽医学报》2008年第7期771-774,共4页刘方娜 刁有祥 王妮 孟凡磊 王辉 张伟 
山东省重大畜禽疫病综合防治技术资助项目(011020102)
根据GenBank中已发表的猪圆环病毒2型(PCV-2)基因序列,在ORF2内设计1对特异性引物,利用PCR反应扩增出371 bp的核酸片段,回收并纯化PCR产物,用地高辛标记,建立了地高辛标记核酸探针诊断PCV-2的方法。该探针与8个PCV-2重组菌的核酸抽提物...
关键词：地高辛标记核酸探针 PCV-2 ORF2 
鸡传染性支气管炎的多重RT-PCR检测及793／B血清型的鉴定被引量：2
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》2008年第6期45-48,共4页孟凡磊 刁有祥 张伟 王辉 刘方娜 王妮 马雪杰 
济南市科技攻关项目(41054)
【目的】建立鸡传染性支气管炎病毒(IBV)快速、准确的检测方法。【方法】根据GenBank中已经发表的793/B型和多株IBV的N基因和S1基因,对比分析后以N基因的保守序列设计合成了1对引物,跨度为582bp;以793/B的S1基因设计合成了1对特异型引物...
关键词：多重RT-PCR 传染性支气管炎 793/B血清型 检测方法 
猪圆环病毒2型山东株全基因组的克隆与序列分析被引量：3
《中国兽医学报》2008年第5期501-505,共5页刘方娜 刁有祥 高晓伟 孟凡磊 王妮 王辉 
山东省重大科技攻关资助项目(011020102)
根据GenBank已发表的猪圆环病毒2型（PCV-2）全基因组序列,设计2对特异性引物,对山东省不同地区规模化猪场采集的疑似断奶仔猪多系统消耗综合征（PMWS）组织病料进行了PCV-2全基因组克隆和序列分析。结果表明,PCV-2核苷酸序列较稳定,不...
关键词：猪圆环病毒 全基因组 序列分析 
猪胸膜肺炎放线杆菌尿素酶的提取及特性研究
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》2008年第2期34-38,共5页王妮 刁有祥 刘方娜 孟凡磊 王辉 
山东农业大学科技创新基金项目(23414)
【目的】从猪血清7型胸膜肺炎放线杆菌中提取纯化尿素酶,并对其生物特性和理化特性进行研究。【方法】超声破碎放线杆菌粗提尿素酶,再采用硫酸铵盐析和Sephadex G-200凝胶过滤层析对该酶进行纯化,分析其活性及理化特性。【结果】最适于...
关键词：猪传染性胸膜肺炎 胸膜肺炎放线杆菌 尿素酶 超声破壁 酶活性 理化特性 
猪传染性胸膜肺炎放线杆菌溶血素的研究进展
《福建农业学报》2008年第1期111-115,共5页马艳芳 张鑫 张瑞平 刘方娜 刁有祥 
山东省中青年科学家科研奖励基金(2007BS06004)
猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种呼吸道疾病。根据荚膜多糖和脂多糖抗原表位不同,将胸膜肺炎放线杆菌分为15个血清型,不同血清型的菌株毒力大小不同,致病性也有强弱之别。该菌的致病性与多种毒力因子密切相关,而溶血素...
关键词：传染性胸膜肺炎 放线杆菌 溶血素 
鸡传染性支气管炎病毒地高辛标记探针检测方法的的建立和应用被引量：5
《福建农业学报》2007年第1期39-42,共4页孟凡磊 刁有祥 王辉 王妮 刘方娜 刘霞 
济南市科技攻关项目(41054)
根据GenBank中已经发表的IBV N基因的保守序列,设计合成一对引物,利用RT-PCR技术扩增IBVN基因的582 bp的核酸片段,并制备出地高辛标记的IBV核酸探针。特异性检测结果表明,该探针能与不同毒株的IBV核酸发生特异性杂交,而与对照的NDV、鹅...
关键词：鸡传染性支气管炎病毒 地高辛标记核酸探针 检测 
鸡传染性支气管炎病毒变异株(793/B)核蛋白基因的克隆与序列分析被引量：4
《中国病毒学》2006年第5期468-471,共4页孟凡磊 刁有祥 王辉 刘方娜 王妮 
济南市科技攻关项目(项目编号41054)
根据GenBank已经发表的传染性支气管炎病毒(IBV)N全基因组序列设计引物,对IBV793/B分离毒株N基因进行克隆与序列分析。结果表明,IBV793/B的N基因由1229bp组成,与GenBank已发表的11株IBV的N基因相比较,IBV793/B的N基因共有88处点突变,在...
关键词：传染性支气管炎病毒793/B N基因 序列分析 
当前新城疫的流行情况及防控措施
《山东畜牧兽医》2006年第5期38-39,共2页刘金明 杨玉华 张伟 刘方娜 杜爱庆 李体峰 
关键词：新城疫 鸡病 流行情况 防控措施 
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