徐大庆

作品数:31被引量:196H指数:7
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供职机构:河北农业大学生命科学学院更多>>
发文主题:谷氨酸棒杆菌小麦小麦抗叶锈基因ISSR分子标记抗叶锈基因更多>>
发文领域:生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
发文期刊:《中国科技成果》《中国农学通报》《华北农学报》《昆虫学报》更多>>
所获基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家现代农业产业技术体系建设项目河北省自然科学基金更多>>
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基于基因组重测序的高产尿苷大肠杆菌工程菌株的构建
《河北农业大学学报》2024年第5期93-100,共8页韩琳琳 武子淇 徐大庆 
河北省重点研发计划项目(22326610D);江苏香天化学有限公司资助项目(JSXT2021-10).
以大肠杆菌高产胞苷E.coli XD10为出发菌株,首先对其进行基因组重测序,分析其相较于野生型菌株的尿苷合成及降解相关基因变化情况。应用CRISPR/Cas9基因编辑技术,通过依次构建T7 RNA聚合酶基因T7 gene 1、使用异源T7启动子的催化胞苷向...
关键词:大肠杆菌 基因组重测序 CRISPR/Cas9基因编辑技术 尿苷生产 工程菌株 
基于T7转录系统的谷氨酸棒杆菌重组蛋白高效表达系统的创建
《河北农业大学学报》2023年第4期91-97,共7页任晓昕 韩琳琳 武子淇 谷敏 徐大庆 
河北省自然科学基金(C2020204085);河北省重点研发计划项目(22326610D).
本研究以前期构建的大肠杆菌-谷氨酸棒杆菌穿梭载体pAU2为基础,通过添加T7 RNA聚合酶编码基因及人工合成的克隆表达区,构建了1个新的谷氨酸棒杆菌分泌型基因高效表达载体pAU29KS。pAU29KS载体克隆/表达盒使用T7启动子作为目的基因的启动...
关键词:谷氨酸棒状杆菌 T7转录系统 重组蛋白表达和分泌 
CRISPR/Cas9和λ-Red基因敲除技术在大肠杆菌中的应用比较被引量:1
《微生物前沿》2022年第1期1-10,共10页吕言 任晓昕 徐大庆 
λ-Red和CRISPR/Cas9基因敲除技术已被广泛应用于染色体基因敲除。本研究分别采用λ-Red和CRISPR/Cas9技术对大肠杆菌BL21菌株染色体丙氨酸消旋酶基因alr进行了敲除,并比较了其敲除效率。对于Red敲除技术而言,首先构建由alr上下游同源...
关键词:大肠杆菌 CRISPR/Cas9 λ-Red 基因敲除 丙氨酸消旋酶基因 
谷氨酸棒杆菌信号肽探测载体的构建及强信号肽筛选被引量:2
《河北农业大学学报》2021年第4期69-75,共7页李川敏 张玮祎 张献 刘红星 徐大庆 
国家自然科学基金(31370141);河北省自然科学基金(C2020204085);河北省留学回国人员择优资助项目(Z2018065)。
强信号肽的使用是提高蛋白分泌效率的关键,筛选强信号肽具有重要的应用价值。本试验以大肠杆菌-谷氨酸棒杆菌基础穿梭载体pAU2为骨架,以枯草芽孢杆菌的碱性丝氨酸蛋白酶AprE为报告蛋白,分别使用强启动子tac-M和谷氨酸棒杆菌核糖体结合...
关键词:谷氨酸棒状杆菌 信号肽探测载体 信号肽筛选 
基于二维电泳高表达蛋白斑点的谷氨酸棒杆菌强启动子P1937的鉴定
《微生物前沿》2021年第1期21-29,共9页张玮祎 张献 李川敏 徐大庆 
为了构建高效谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)细胞工厂,需要开发出更多的高效基因表达元件。强启动子的使用是使基因高效表达的关键环节,然而关于谷氨酸棒杆菌强启动子鉴定的报道十分少见。本试验基于谷氨酸棒杆菌细胞全蛋白...
关键词:谷氨酸棒杆菌 二维电泳 内源强启动子 启动子活性检测 
谷氨酸棒杆菌Cgl0864基因强启动子的鉴定被引量:2
《河北农业大学学报》2020年第2期69-75,共7页张献 张玮祎 李川敏 牛树启 臧卫平 徐大庆 
国家自然科学基金(31370141);河北省留学回国人员择优资助项目(Z2018065).
鉴定强启动子可为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)代谢工程育种及重组蛋白生产提供高效的基因表达调控元件,但谷氨酸棒杆菌内源性强启动子的鉴定鲜有报道。本试验进行谷氨酸棒杆菌ATCC13032菌株细胞全蛋白二维电泳并对高表达...
关键词:谷氨酸棒杆菌 二维电泳 强启动子 实时荧光定量PCR 
谷氨酸棒杆菌乳酰谷胱甘肽裂合酶基因克隆、表达及活性分析
《河北农业大学学报》2019年第2期54-59,共6页郝成伟 李贺丹 张献 徐大庆 
国家自然科学基金(31370141)
乳酰谷胱甘肽裂合酶是生物体内降解丙酮醛的重要酶之一。食品级微生物谷氨酸棒杆菌ATCC13032基因组上的NCgl0106预测为乳酰谷胱甘肽裂合酶基因,但尚缺乏实验验证。本试验首先通过pCR技术扩增出预测的谷氨酸棒状杆菌ATCC13032乳酰谷胱甘...
关键词:谷氨酸棒状杆菌 乳酰谷胱甘肽裂合酶 基因表达 酶活分析 
杀虫微生物新功能基因的发掘及其作用靶标的研究
《中国科技成果》2018年第2期41-44,共4页郭巍 赵丹 徐大庆 
国家973计划项目(2003CB114201);国家自然科学基金项目(30771447&30971910).获2016年河北省科学技术奖励自然科学奖三等奖.
苏云金杆菌是目前世界上使用最广泛的生物杀虫剂,挖掘生防微生物资源,以及靶标蛋白的分离鉴定,对Bt茵杀虫活性的分子机制,明确昆虫围食膜的组成成分及其形成机制奠定了基础,具有重要的科学意义,从而为新型高效生物杀虫剂和转基因...
关键词:苏云金杆茵 靶标蛋白 新型高效生物杀虫剂 
益生菌发酵对大黄抑制大肠杆菌的影响被引量:7
《饲料工业》2015年第15期38-41,共4页韩佳慧 郭云霞 李晔 徐大庆 吴国江 郝庆红 魏萌 
河北省教育厅项目[Z2013166];河北省教育厅项目[Z2013140];河北农业大学青年科学基金;河北农业大学大学生科技创新专项[sk2014]
试验研究大黄发酵后对大肠杆菌的抑菌活性,为发酵中草药饲料添加剂的研制提供参考。试验对益生菌发酵大黄的盐浓度、pH值、接种量、温度和时间等发酵条件进行优化。最终确定大黄的发酵条件为MgSO4添加量为6g、pH值7、接种量2%、温度37...
关键词:大肠杆菌 益生菌 大黄 抑菌 发酵 
甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶1(SeCDA1)在毕赤酵母中的表达与活性测定被引量:2
《中国生物防治学报》2015年第4期586-591,共6页孙晓彤 赵丹 闫晓平 郭巍 徐大庆 李少雅 李景 
国家自然科学基金(31471775);现代农业产业技术体系(CARS-14)
利用RACE-PCR方法,扩增得到编码甜菜夜蛾几丁质脱乙酰基酶基因secda1。将secda1基因插入到载体p PIC9K多克隆位点,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,得到重组质粒p PIC9K-secda1。重组质粒经线性化后,电击转化缺陷性毕赤酵母GS115感受态细胞...
关键词:甜菜夜蛾 几丁质脱乙酰酶 毕赤酵母 
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