李民

作品数:17被引量:170H指数:7
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供职机构:中国科学院上海生命科学研究院更多>>
发文主题:高密度发酵脯氨酰内肽酶重组大肠杆菌工程菌大肠杆菌更多>>
发文领域:生物学化学工程轻工技术与工程农业科学更多>>
发文期刊:《中国医药工业杂志》《生物工程学报》《西安体育学院学报》《生物化学与生物物理进展》更多>>
所获基金:国家自然科学基金更多>>
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重组大肠杆菌YK537/pSB┐TK高密度培养过程中有机酸的RP┐HPLC快速分析
《西安体育学院学报》2001年第3期-,共3页杨如燕 李民 陈常庆 
采用高压液相色谱法(HPLC),利用C18反相柱快速检测重组大肠杆菌YK537/pSB-TK高密度发酵过程中细菌代谢产生的各种有机酸。分析表明,经乙醚和水两次萃取处理后能去除样品中大部分的干扰峰,可获得理想的分离效果...
关键词:RP-HPLC 乙酸 高密度发酵 肿瘤坏死因子 
新型重组人肿瘤坏死因子工程菌的发酵工艺研究被引量:2
《中国生化药物杂志》2001年第2期64-67,共4页颜真 张英起 李民 陈常庆 
目的研究并建立新型重组人肿瘤坏死因子 (nrhTNF)的发酵工艺。方法通过探讨nrhTNF工程菌在试管和锥形摇瓶中的生长和表达规律 ,筛选并确定其最适宿主菌、最佳培养基及最佳诱导表达条件 ,然后在 5L自控发酵罐中进行分批补料培养。结果nrh...
关键词:肿瘤坏死因子 基因工程 大肠杆菌 发酵 
重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNFα)工程菌高密度发酵研究被引量:4
《中国医药工业杂志》2000年第10期443-446,454,共5页李民 徐皓 周逸明 杨如燕 陈常庆 
报道了 rh TNFα重组菌发酵条件及高密度、高表达发酵的研究。首先研究了营养成份对其生长和表达的影响 ,确定了半合成发酵培养基 ;筛选出了 rh TNFα生长和表达的最适宿主菌 E.coli YK5 37;研究了影响高表达的几个关键因素 ,建立了该...
关键词:肿瘤坏死因子 高密度发酵 RHTNFΑ 工程菌 
重组人胸腺肽α1工程菌的高密度发酵被引量:4
《药物生物技术》2000年第4期209-212,共4页颜真 张英起 李民 陈常庆 
为实现重组人胸腺肽α1工程菌E .coliTop10 /pThioHis Tα的高密度高表达发酵 ,首先进行了培养条件的摸索 ,确定了该工程菌的最佳培养条件、诱导剂IPTG的浓度、诱导起始和结束时间 ,然后用 5L自控发酵罐进行分批补料培养 ,发酵中采用分...
关键词:高密度发酵 工程菌 重组人胸腺肽 生产工艺 
重组大肠杆菌高密度发酵研究进展被引量:61
《生物工程进展》2000年第2期26-31,共6页李民 陈常庆 
重组大肠杆菌的高密度发酵是提高基因工程产品产量的一个非常有效的手段 ,是现代发酵工程研究的一个热点。本文就高密度发酵中影响重组大肠杆菌发酵产率的几个因素 ,包括宿主菌、培养基、培养条件、补料方法以及高密度发酵过程中存在的...
关键词:重组大肠杆菌 高密度发酵 比生产率 乙酸 
高密度培养大肠杆菌TG1/pGEX-hCT和高表达重组人降钙素被引量:9
《第二军医大学学报》2000年第3期213-215,共3页窦鸿 李民 毛积芳 陈常庆 
国家自然科学基金!( 3 9870 170 )
目的 :高密度、高表达培养重组大肠杆菌 TG1/p GEX- h CT,生产重组人降钙素 (rh CT)。 方法和结果 :应用 NBSBio Flo30 0 0型 5 L 自控发酵罐 ,采用分批培养和补料分批培养相结合的培养技术 ,控制碳源和氮源的补加 ,控制溶解氧 ,使重组...
关键词:降钙素 多肽激素 大肠杆菌 TG1/pGEX-hCT 
重组点状产气单胞菌脯氨酰内肽酶的纯化和鉴定
《生物工程学报》2000年第3期345-348,共4页李民 陈常庆 王德宝 
中国科学院上海分院择优项目!(沪院 98 0 2 0 6)
报道重组点状产气单胞菌脯氨酰内肽酶 (简称apPEP)的基因工程下游工艺研究。工程菌株E .coliBL2 1/ pKKH PEP表达产物apPEP为可溶性蛋白 ,在NBSBioFlo 30 0 0型 5L自控发酵罐中经 14h培养每升发酵液可达到 2 2 5 g干重菌体 ,含apPEP 3...
关键词:脯氨酰内肽酶 高密度发酵 纯化 比活力 鉴定 
点状产气单胞菌脯氨酰内肽酶在大肠杆菌中的高效表达被引量:2
《生物化学与生物物理学报》2000年第2期183-186,共4页李民 徐皓 陈常庆 
中国科学院上海分院择优项目!沪院 98 0 2 0 6&&
采用PCR分段克隆法将点状产气单胞菌点状亚种 (Aeromonaspuctatasubsp .puctata)脯氨酰内肽酶 ( pro lylendopeptidase ,apPEP)的编码区基因分成 3段扩增并拼接成编码 690个氨基酸的完整基因apPEP ,将其克隆在表达载体 pBL和 pKKH上 ,...
关键词:脯氨酰内肽酶 大肠杆菌 表达 点状产气单胞菌 
脯氨酰内肽酶培养条件的优化及高密度发酵被引量:9
《生物工程学报》2000年第2期183-187,共5页李民 修朝阳 陈常庆 
基因工程菌E.coliBL21/pGEMPEP可以组成型表达重组的点状产气单胞菌脯氨酰内肽酶(PEP),但培养条件极大地影响着酶的产量,为了获得高效表达,首先测定了工程菌表达PEP的稳定性并考察了培养温度、pH、发酵时间、碳源、氮源、无机盐等对产...
关键词:脯氮酰内肽酶 高密度发酵 正交实验 条件优化 
脯氨酰内肽酶研究进展被引量:5
《生物化学与生物物理进展》2000年第2期171-174,共4页李民 陈常庆 
脯氨酰内肽酶 (prolylendopeptidase ,PEP) [EC3 4 2 1 2 6 ]是一种能特异性水解多肽链中脯氨酸残基羧基端肽键的丝氨酸蛋白酶 ,能降解许多多肽类神经递质和激素 ,其活性的异常会引起精神、认知过程的障碍 .一些PEP的专一性抑制剂 (如JT...
关键词:脯氨酰内肽酶 丝氨酸蛋白酶 晶体结构 作用机理 
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