宋伟

作品数:24被引量:50H指数:3
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供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
发文主题:基因克隆基因表达Α毒素A型产气荚膜梭菌轮状病毒更多>>
发文领域:生物学医药卫生化学工程更多>>
发文期刊:《中华微生物学和免疫学杂志》《牙体牙髓牙周病学杂志》《中国生物工程杂志》《生物工程学报》更多>>
所获基金:国家自然科学基金军队医药卫生科研基金国家新药研究基金更多>>
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重组A型产气荚膜梭菌α毒素C端片段的分离纯化
《生物技术通讯》2004年第1期26-28,共3页林明辉 荫俊 邢洪光 王慧 侯晓军 宋伟 
押在构建出高表达、高活性的A型产气荚膜梭菌α毒素保护性抗原工程菌株pBV/cpa408的基础上,对表达产物进行了分离纯化研究。诱导表达菌液离心后,超声破碎沉淀细菌,上清用80%饱和硫酸铵沉淀,沉淀蛋白经透析,上凝胶过滤层析柱分离纯化,得...
关键词:C端片段 纯化 Α毒素 分离 A型产气荚膜梭菌 
重组A型产气荚膜梭菌α毒素保护性抗原的制备及初步免疫保护作用研究被引量:8
《生物工程学报》2004年第1期63-65,共3页林明辉 荫俊 邢洪光 侯晓军 王慧 宋伟 
全军医药卫生科研基金资助项目 (No .0 1MB0 5 9)~~
诱导表达重组工程菌pBV cpa4 0 8后 ,将表达菌体超声破碎 ,上清经 80 %饱和硫酸铵一次沉淀 ,经透析 ,上凝胶过滤层析柱进行分离纯化 ,薄层凝胶扫描结果显示 ,纯化的蛋白纯度达 95 %以上 ;用纯化蛋白免疫昆明小鼠 ,以 1 0MLD1 0 0 腹腔...
关键词:a毒素 保护性抗原 免疫保护作用 产气荚膜梭菌 重组表达 
重组A型产气荚膜梭菌α毒素C端基因在大肠杆菌中的高效表达被引量:1
《中国生物工程杂志》2003年第12期91-94,共4页林明辉 荫俊 王慧 侯晓军 宋伟 邢洪光 
全军医药卫生科研基金资助项目 ( 0 1MB0 5 9)
在成功克隆A型产气荚膜梭菌α毒素C端基因 (cpa40 8基因 )后 ,发现基因N端ATG后密码子在大肠杆菌中的使用频率普遍偏低 ,在不改变氨基酸的前提下 ,对N端基因进行修饰 ,构建重组表达质粒pBV2 2 0 cpa40 8,导入大肠杆菌DH5α中 ,经温度诱...
关键词:A型产气荚膜梭菌 a毒素 C端基因 修饰 基因表达 
志贺毒素保护性抗原的基因克隆与序列分析
《生物技术通讯》2003年第4期285-287,共3页邢洪光 荫俊 王慧 侯晓军 宋伟 
根据GenBank报道的志贺毒素A、B亚单位基因序列设计合成两对引物,以Ⅰ型痢疾志贺菌的基因组为模板经PCR扩增获得3条DNA序列,将其分别插入pMD18-T载体,测序证明所获得的3条序列为志贺毒素A、B亚单位基因及其串联片段,与GenBank中相应序...
关键词:志贺毒素 保护性抗原 基因克隆 序列分析 表达 A亚单位 B亚单位 
A型产气荚膜梭菌α毒素全基因的分子克隆与核苷酸序列分析被引量:2
《生物技术通讯》2003年第3期180-181,共2页林明辉 荫俊 王慧 宋伟 邢洪光 侯晓军 
应用PCR技术,从A型产气荚膜梭菌菌株NCTC64609中扩增出A型产气荚膜梭菌α毒素全基因(cpa1229基因)并将其克隆至pMD18-T载体中。经转化、IPTG/X-gal选择培养,提取质粒,PCR和EcoRI/PstI双酶切鉴定,筛选阳性重组克隆。经核苷酸序列分析证实...
关键词:A型产气荚膜梭菌 Α毒素 基因 分子克隆 核苷酸序列 
从噬菌体展示肽库中筛选脂质A的结合肽
《生物技术通讯》2003年第3期185-187,共3页姜明 王慧 荫俊 张浩杰 宋伟 史俊南 
以脂质A为靶标,筛选噬菌体展示十二肽库,三轮后随机挑取14个噬菌体克隆进行结合活性鉴定,并对5个克隆进行序列分析。结果表明,14个克隆全部是阳性克隆,测序结果显示4个阳性克隆的序列完全一样。说明筛选到了一个脂质A的结合多肽。
关键词:噬菌体 脂质A 结合肽 脂多糖 肽库 感染性休克 
产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆及结构分析
《生命科学研究》2003年第2期144-146,共3页林明辉 荫俊 王慧 邢洪光 宋伟 侯晓军 
全军医药卫生科研基金资助项目(01MB059)
应用PCR技术,从产气荚膜梭菌菌株NCTC64609中,扩增出A型产气荚膜梭菌α毒素基因C端片段(cpa408),并将其克隆至pMD18 T载体中.经转化,α互补蓝白菌落选择培养,提取质粒,进行PCR和EcoRI、PstI双酶切鉴定,筛选出阳性重组克隆.经核苷酸序列...
关键词:产气荚膜梭菌 Α毒素 基因 克隆 结构分析 
人成骨蛋白成熟肽基因在毕赤酵母中的克隆及其序列分析
《生物技术通讯》2002年第5期344-345,共2页王忠泽 王慧 荫俊 宋伟 侯晓军 张松乐 
采用PCR方法,根据文献报道的人成骨蛋白-1(OP-1)成熟肽基因序列,设计并合成一对引物,从含人成骨蛋白基因的质粒中扩增获得大小为420bp的DNA片段,连接到pGEM-T载体进行测序,证明获得人成骨蛋白成熟肽基因片段,继之以pPIC3.5K为表达载体...
关键词:人成骨蛋白成熟肽基因 毕赤酵母 序列分析 基因克隆 
可溶性CD14基因在COS-7细胞的表达被引量:2
《牙体牙髓牙周病学杂志》2002年第9期463-465,共3页王胜朝 荫俊 史俊南 白洁 王威 宋伟 
国家自然科学基金项目 (3 9870 3 16)
目的 :构建重组可溶性CD14真核表达载体 ,用瞬时系统表达目的基因。方法 :将可溶性CD14基因定向克隆入真核表达质粒载体 pcDNA3.1+;DEAE -葡聚糖法转染COS - 7细胞 ,72h收集培养上清 ,Westernblot鉴定表达产物 ,ELISA检测表达水平。结...
关键词:CD14 C0S-7 真核表达 Gˉ菌感染 Gˉ菌内毒素脂多糖 血清 髓细胞 
CD14在牙髓和牙龈组织中的免疫组化定位
《牙体牙髓牙周病学杂志》2002年第7期352-354,I001,共4页王胜朝 荫俊 史俊南 范继红 宋伟 
军事医学科学院微生物流行病研究所承担国家自然科学基金资助项目 (3 9870 3 16)
目的 :检测CD14在牙髓和牙龈组织的分布 ,探讨CD14在牙髓和牙龈炎症过程中的可能作用。方法 :组织切片技术制备人牙髓和牙龈组织标本 ,用免疫组织化学方法检测CD14在健康和炎症牙髓、牙龈组织的分布。结果 :健康牙髓没有发现CD14免疫阳...
关键词:牙髓 牙龈 牙髓炎 牙龈炎 免疫组织化学 白细胞分化抗原-14 
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