叶志华

作品数:13被引量:32H指数:3
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供职机构:广东省微生物研究所更多>>
发文主题:大肠杆菌RNA阴沟肠杆菌基因工程表达质粒更多>>
发文领域:生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
发文期刊:《微生物学杂志》《中国医学生物技术应用》《微生物学通报》《水产科学》更多>>
所获基金:广东省自然科学基金广东省科技攻关计划更多>>
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重组人ZP3蛋白在大肠杆菌中的高效表达
《生物技术》2006年第6期3-7,共5页叶志华 梁建庆 
广东省科技攻关项目资助("重组人卵透明带-3蛋白的高效表达及其分离制备的研究";2004B10401004)
目的:用基因工程方法制备重组人ZP3蛋白。方法:以全长人ZP3 cDNA片段为模板,通过PCR扩增出编码人ZP3蛋白不同肽段的cDNA片段,然后将这些cDNA片段分别插入到表达载体pET-I9b的Nco I-BamH I或Nde I-BamH I位点内,共构建成6种人ZP3蛋...
关键词:人ZP3蛋白 表达 大肠杆菌 
人ZP3基因的RT-PCRcDNA克隆被引量:1
《生物技术》2005年第4期1-4,共4页叶志华 梁建庆 
广东省科技攻关项目("重组人卵透明带-3蛋白的高效表达及其分离制备的研究";编号:2004B10401004)
目的:研究人ZP3基因的结构及构建人ZP3基因原核表达系统。方法:从人卵巢组织中分离出mRNA并以此作为模版,通过RT-PCR扩增出人ZP3基因cDNA片段,然后将其克隆在pUC18质粒上,并对克隆片段进行序列分析。结果:共克隆到ZP3-A(1300bp)、ZP3-B(...
关键词:人ZP3基因 CDNA克隆 序列 
转化条件对质粒DNA转化大肠杆菌的影响被引量:10
《微生物学杂志》2004年第4期15-17,共3页梁建庆 叶志华 江秀梅 彭李岚 张海滨 
研究了质粒DNA大小、质粒DNA浓度、CaCl2 浓度、热休克时间及感受态细胞保藏时间等因素对大肠杆菌HB1 0 1和JM1 0 5转化频率的影响 ,并对转化子中质粒DNA进行了分离、酶切、琼脂糖凝胶电泳检测。结果表明 ,CaCl2 浓度、质粒大小和浓度 ...
关键词:质粒 转化 转化条件 大肠杆菌 
一种从RNA Blot杂交膜上脱除探针的改进方法被引量:2
《生物技术》2004年第4期28-30,共3页姚志海 叶志华 梁建庆 张向阳 柳海林 杜纲国 高冬梅 
广东省科技攻关项目 (2KM0 2 50 4G0 )
目的 :探讨脱除RNABlot膜上的杂交探针的方法 ,解决杂交中RNABlot膜重复使用的问题。方法 :经NBT BCIP化学显色的RNABlot杂交膜先用二甲基甲酰胺在 6 0℃处理 90min ,然后用脱探针溶液 (5 0 %去离子甲酰胺、5 0mmol LTris -HClpH7 5、5 ...
关键词:RNA Blot膜 杂交 脱除 二甲基甲酰胺 地高辛标记 CDNA探针 
海藻糖的开发和应用研究
《中国医学生物技术应用》2002年第4期20-23,共4页曾国驱 梁建庆 叶志华 
海藻糖是一种非还原性双糖,具有低甜味,其化学性质稳定,有稳定细胞膜和蛋白质结构的特性,对干燥、脱水的生命物质具有保护作用。文章介绍了海藻糖的各种生产方法及其在生物制品、医学、生命科学研究、食品工业上的应用。
关键词:海藻糖 特性 生产方法 应用 
海藻糖产生菌的筛选及其发酵条件研究被引量:7
《生物技术》2002年第3期22-23,共2页曾国驱 黄晓兰 蔡小伟 李雄 梁建庆 叶志华 
中国科学院广州分院;广东省科学青年科学基金项目(1997-17)
通过液体发酵筛选,从土壤中分离的241株菌株及保藏的95株菌株中得到15株海藻糖生产菌,对这些菌株进一步筛选得到产海藻糖最多的一株菌Bacillussp.。其发酵最适合条件为:以麦芽糖为碳源,发酵初始pH值7 0,接种量为6%,30℃条件下培养48h。...
关键词:海藻糖产生菌 筛选 发酵条件 
chiA基因在稻根联合固氮菌E26和NG13中的表达被引量:2
《微生物学报》2001年第6期686-692,共7页叶志华 梁建庆 
广东省自然科学基金资助项目 (970 688)~~
将带有粘质沙雷氏菌几丁质酶基因 (chiA)的 1 8kbHinfⅠ片段分别克隆到表达载体pKK2 2 3 3和质粒pMC71A上 ,构建成几丁质酶表达质粒pKChiA和pMChiA。将这 2种质粒转化稻根联合固氮菌阴沟肠杆菌E2 6 (EnterobactercloacaeE2 6 )和催娩...
关键词:chiA基因 质粒pKChiA 质粒pMChiA 阴沟肠杆菌E26 催娩克氏菌NG13 稻根联合固氮菌 
几丁质酶表达质粒pKChiA和pMChiA的构建及表达被引量:8
《微生物学通报》2001年第6期35-39,共5页叶志华 梁建庆 
广东省自然科学基金资助项目 (No . 970 6 88)
从质粒pLCHIA中切出含粘质沙雷氏菌 (Serratiamarcescens)几丁质酶基因 (chiA)的 1 8kbHinfI片段 ,将其插入到表达载体pKK2 2 3 3强启动子Ptac下游的SmaI位点内 ,构建成几丁质酶表达质粒pKChiA。再用内切酶BamHI从pKChiA质粒中切出 2 ...
关键词:几丁质酶基因 pKChiA质粒 pMChiA质粒 粘质沙雷氏菌 表达 
质粒pMC71A-LEU转化阴沟肠杆菌E26-1的研究被引量:1
《微生物学杂志》2000年第2期14-15,共2页叶志华 梁建庆 
广东省自然科学基金!940183
质粒pMC71A-LEU在对阴沟肠杆菌E26-1(EnterobactercloacaeE26-1)的转化中研究了感受态细胞、CaCl2浓度、热激温度和质粒DNA量对转化频率的影响。结果表明,在阴沟肠杆菌F26-1生长到OD600=0.45时,用50mmol/LCaCl2处理细胞,加...
关键词:阴沟肠杆菌 质粒pMC71A-LEU 转化频率 基因工程 
不带抗药性基因的nifA质粒的构建被引量:1
《农业生物技术学报》1998年第4期393-397,共5页叶志华 梁建庆 陶家法 丘元盛 
广东省自然科学基金
本研究克隆了萤光假单胞菌AS1.55(PseudomonasfluorescensAS1.55)的亮氨酸基因(leu+)EcoRI片段(~6.6kb),并获得含有该片段的重组质粒pBR322-LEU。从pBR322-...
关键词:nifA质粒 基因克隆 pMC71A 质粒构建 阴沟肠杆菌 
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