陈坚

作品数：9被引量：24H指数：4
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供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
发文主题：繁殖与呼吸综合征病毒猪细小病毒PCR检测方法猪流感高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒更多>>
发文领域：农业科学生物学更多>>
发文期刊：《中国兽医杂志》《中国预防兽医学报》《西北农林科技大学学报（自然科学版）》《西北农业学报》更多>>
所获基金：国家科技支撑计划“十一五”国家科技支撑计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立
《中国兽药杂志》2012年第5期6-10,共5页刘灿 孙丰廷 宁宜宝 张文利 王海光 英聪 陈坚 毕丁仁 
国家科技支撑计划课题资助项目(2007BAD86B01)
根据GenBank公布的24株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株和5株PRRSV经典毒株的保守区基因序列,使用PrimerExpress 3.0软件设计并合成实时荧光定量PCR(Real-timeFluorescent Quantitative PCR,Real-time FQ-PCR)用引物和探针,建立了Re...
关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征 实时荧光定量PCR TAQMAN探针 
SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法检测猪细小病毒被引量：6
《中国兽医杂志》2011年第8期6-8,共3页陈坚 刘业兵 张志刚 姜晓晨 张晓杰 
2010年公益性行业(农业)科研专项(201003010-3);"十一五"国家科技支撑计划(2007BAD86B04-4)
为建立特异敏感的猪细小病毒(PPV)的SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测方法,本研究根据GenBank上PPV NS1保守序列设计合成了1对引物,利用本实验室构建的重组质粒(pMD18-T-PPV NS1)为标准模板,对反应条件进行优化,绘制标准曲线,并进行熔解曲...
关键词：猪细小病毒 SYBR GreenⅠ实时定量PCR 检测 
感染强、弱PRRSV毒株的Marc-145细胞差异基因文库的构建
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》2011年第7期1-7,共7页张磊 韩明远 王建华 宁宜宝 陈坚 
国家"十一五"科技支撑计划项目(2007BAD86B01)
【目的】用强、弱PRRSV GD株传代毒株感染Marc-145细胞,构建Marc-145细胞的差异基因cDNA文库。【方法】以感染PRRSV GD株第100代弱毒株的Marc-145 cDNA为测试组(Tester),以感染PRRSV GD株第5代强毒株的Marc-145 cDNA为对照组(Driver),...
关键词：PRRSV MARC-145 差异基因文库 细胞培养 
基因芯片技术及其在动物微生物研究中的应用被引量：3
《中国兽药杂志》2010年第12期46-49,共4页陈坚 刘业兵 宁宜宝 
介绍了基因芯片技术及其在动物微生物研究中病原体检测和分型、致病机理、宿主与病原体的相互影响以及耐药性检测等方面的应用情况,分析了限制该技术应用和发展的主要问题,并对其应用前景作了展望。
关键词：基因芯片 动物微生物 检测 
双重RT-PCR方法检测猪流感病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒被引量：4
《中国预防兽医学报》2010年第9期687-690,共4页罗俊 刘业兵 陈坚 宁宜宝 
2010年公益性行业(农业)科研专项(201003010-3);"十一五"国家科技支撑计划(2007BAD86B04-4)
为建立特异、敏感的猪流感病毒(SIV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的双重RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank登录的SIVM基因保守序列和PRRSV美洲型毒株的N基因保守序列,设计合成了2对特异引物,通过对扩增条件的优化,建立检测SIV和PRRS...
关键词：猪流感病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 双重RT-PCR 
脉冲场凝胶电泳在沙门氏菌流行病学中的应用被引量：4
《中国兽药杂志》2010年第7期37-39,43,共4页陈瑞 熊惠军 宋立 陈坚 
国家"十一五"科技支撑子课题(2006BAK02A03-1)
脉冲场凝胶电泳是20世纪80年代发展起来的一种可用于分离10 kb至10 Mb分子质量DNA的新型凝胶电泳技术,已广泛应用于细菌分子分型、种群特异性鉴定及遗传分析等方面。文章介绍了脉冲场凝胶电泳的技术、应用状况及目前沙门氏菌的分型现状...
关键词：脉冲场凝胶电泳 沙门氏菌 分子分型 流行病学 
猪繁殖与呼吸综合征病毒BJ株、GD株全基因组序列测定与分析
《西北农业学报》2010年第1期17-21,共5页罗俊 刘业兵 宁宜宝 陈坚 
"十一五"国家科技支撑计划(2007BAD86B01;2007BAD86B04-4)
利用RT-PCR方法分别扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北京分离株(BJ株)、广东分离株(GD株)各9条基因片段,并将这9个片段分别克隆于PGEM-T-easy质粒载体上进行测序,按顺序将这些序列进行拼接得到PRRSVBJ株和GD株的全基因组cDNA(GenBa...
关键词：PRRSV 基因组 序列测定和分析 
猪流感RT-PCR诊断方法的建立被引量：2
《中国兽药杂志》2009年第11期17-20,共4页陈坚 刘业兵 张磊 罗俊 宁宜宝 
十一五国家科技支撑计划(2007BAD86B04-4)
根据GenBank上发表的多株猪流感病毒(SIV)序列,在保守区域设计1对引物,并对RT-PCR反应条件进行优化,建立了可检测出多种亚型猪源流感病毒的RT-PCR方法。通过对反应产物测序分析,与预期结果相符,证明该方法具有很强的特异性;该方法可以...
关键词：猪流感 RT-PCR 诊断 
猪细小病毒PCR检测方法的建立及应用被引量：5
《中国动物检疫》2008年第8期20-22,共3页刘业兵 陈坚 郑杰 宁宜宝 杨汉春 
根据已报道猪细小病毒基因组序列,设计合成了一对特异引物,通过对影响PCR扩增因素的筛选,确定PCR检测的最佳条件,成功扩增出预期的1980bp片断。特异性和敏感性试验结果发现:该方法特异、敏感,可以检测到0.9TCID50、0.001个HA的病毒。用...
关键词：猪细小病毒 PCR 检测 
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