苯丙酮尿症突变基因的快速检测及产前诊断  

DetectionoftheMutationalGeneinPhenylketonuriaandPrenatalDiagnosesbyUsingSingleStrandConformationPolymorphismMethods

作　　者：杨涛[1,2] 袁丽芳[1,2] 黄尚志[1,2] 方炳良[1,2] 王玫[1,2] 孙念怙[1,2] 赵时敏[1,2] 罗会元[1,2] 

机构地区：[1]中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所遗传室 [2]北京协和医院

出　　处：《中华妇产科杂志》1996年第7期401-403,共3页Chinese Journal of Obstetrics and Gynecology

基　　金：国家八五攻关课题;中国医学科学院基金

摘　　要：目的：建立苯丙酮尿症突变基因快速检测及产前基因诊断的方法，以提高产前诊断率。方法：应用聚合酶链反应合并单链构象多态性方法及银染技术筛查苯丙氨酸羟化酶基因的四个外显子（ｅｘｏｎ，Ｅ）：７、１２、１１和１０区域，并用已知阳性和阴性样品为对照。结果：确立了３种已知位点突变：Ｒ２４３Ｑ（Ｅ７）［ＣＧＡ（Ａｒｇ２４３）→ＣＡＡ（Ｇｌｎ）］，Ｒ４１３Ｐ（Ｅ１２）［ＣＧＣ（Ａｒｇ４１３）→ＣＣＣ（Ｐｒｏ）］，Ｙ３５６Ｘ（Ｅ１１）［ＴＡＣ（Ｔｙｒ３５６）→ＴＡＡ（Ｔｅｒ）］，以及Ｅ１０区域的３种ＤＮＡ带型改变的检测条件。检测出１３个苯丙酮尿症家系的突变位点并对５例进行了产前基因诊断。结论：单链构象多态性方法可用于苯丙酮尿症家系的突变基因检测和产前诊断。Objective:Toestablishrapidmethodsforthedetectionofgenemutationsandprena-taldiagnosisofphenylketonuria(PKU).Methods:Thesinglestrandconformationpolymorphism(SSCP)combinedwithsilverstainingtechniquewereusedtoscreenthemutationsinthefourexonsofphenylalaninehydroxylase(PAH)gene.Afterthepolymerasechainreaction,theDNAfragmentswereseparatedbyelectrophoresisonpolyacrylamidegelcontainingglycerolandvisualizedbysilverstaining.Results:ThreeknownmisensemutationswhichareR243Q(E7)[CGA(Arg243)→CAA(Gln)],R413P(E12)[CGC(Arg413)→CCC(Pro)]andY356X(E11)[TAC(Tyr356)→TAA(Ter)]weredetectedat21℃,28℃and7℃.ThreekindsofunknownabnormalDNAbandsinexon10weredetectedin21℃.Themutationsof13PKUfamilieshavebendetected.Prenatalgenediagnosesweresuccessfulyperformedin5pregnanciesatriskwithPKU.Conclusion:Themethodisveryuse-fulfordetectingthemutationsandprenataldiagnosesofPKUfamilies.

关 键 词：苯丙酮尿症 突变基因 单链构象 产前诊断 

分 类 号：R714.55[医药卫生—妇产科学]