云南省应用基础研究基金(KKSA201126005)

作品数:18被引量:50H指数:4
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两个苹果酸酶的表达和酶学性质分析
《云南大学学报(自然科学版)》2019年第3期599-608,共10页李珊 杨晓霞 季秀玲 林连兵 魏云林 张琦 
国家自然科学基金(31660454,31160016);云南省应用基础研究基金(KKSA201126005);教育部回国人员科研启动基金(KKQA201226003)
为了探讨深黄被孢霉M6-22中不同苹果酸酶的性质,研究从深黄被孢霉M6-22中克隆得到苹果酸酶MIME1基因并在大肠杆菌BL21中诱导表达,经镍柱纯化和酶活分析表明所纯化蛋白能催化苹果酸脱羧生成丙酮酸和NADPH,具有苹果酸酶的特性.同时与前期...
关键词:深黄被孢霉 苹果酸酶 基因克隆 表达 酶学性质分析 
一个硫化叶菌病毒启动子的分离与鉴定
《应用与环境生物学报》2019年第2期399-404,共6页何强 杨昭杰 季秀玲 魏云林 林连兵 张琦 
国家自然科学基金项目(31260034;31660454);云南省应用基础研究基金资助项目(K KSA201126005);教育部回国人员科研启动基金(KKQA201226003)资助~~
几乎所有古菌病毒基因组中无RNA聚合酶(RNA polymerase,RNAP)等组成基本转录装置的同源蛋白编码序列,而且启动子活性对病毒感染过程中病毒基因的转录上可能具有重要的影响.为进一步揭示古菌病毒基因启动子的序列结构特点和活性之间的关...
关键词:STSV2病毒 启动子筛选质粒 启动子P37 启动子活性 核心启动序列元件子序列 
红冬孢酵母苹果酸酶基因RKME1的克隆与表达
《生命科学研究》2017年第6期482-487,共6页肖虎 熊向峰 崔锦锦 季秀玲 林连兵 魏云林 张琦 
国家自然科学基金资助项目(31160016;31660454);云南省应用基础研究基金资助项目(KKSA201126005);教育部回国人员科研启动基金(KKQA201226003)
苹果酸酶(malic enzyme,ME)普遍存在于各种生物体中,在二价阳离子(Mg^(2+)或者Mn^(2+))的存在下,它可以催化L-苹果酸进行氧化脱羧反应,产生丙酮酸、CO_2和NADPH。前期分析结果预测红冬孢酵母YM25235菌株具有2个苹果酸酶同功酶基因RKME1...
关键词:红冬孢酵母 苹果酸酶 基因克隆 生物信息学 重组表达 酶活 
深黄被孢霉苹果酸脱氢酶基因的克隆和表达被引量:3
《中国微生态学杂志》2017年第9期993-997,1004,共6页王俊 杨晓霞 魏云林 林连兵 季秀玲 张琦 
国家自然科学基金(31160016;31660454);云南省应用基础研究基金(KKSA201126005);教育部回国人员科研启动基金(KKQA201226003)
目的通过对深黄被孢霉(Mortierella isabellina)M6-22中MDH基因的分离鉴定,为深入了解苹果酸脱氢酶(MDH)的生理特性、结构和功能奠定基础,并进一步探讨生物体中MDH的代谢作用。方法通过基因克隆的方法以深黄被孢霉的cDNA为模板,PCR扩增...
关键词:苹果酸脱氢酶 深黄被孢霉 克隆 基因表达 
一个深黄被孢霉苹果酸脱氢酶基因的克隆与表达被引量:2
《生命科学研究》2017年第3期208-212,256,共6页崔锦锦 季秀玲 林连兵 魏云林 张琦 
国家自然科学基金资助项目(31160016;31660454);云南省应用基础研究基金资助项目(KKSA201126005);教育部回国人员科研启动基金(KKQA201226003)
根据转录组测序结果设计特异性引物,以深黄被孢霉(Mortierella isabellina)M6-22的c DNA为模板,PCR扩增苹果酸脱氢酶基因MIMDH2,测序结果显示该序列长1 017 bp,编码338个氨基酸。序列分析表明该序列与已报道的烟曲霉(Aspergillus fumiga...
关键词:深黄被孢霉 苹果酸脱氢酶(MDH) 基因克隆 序列分析 原核表达 
深黄被孢霉苹果酸酶基因的克隆和表达被引量:1
《应用与环境生物学报》2017年第1期129-133,共5页崔锦锦 李凌彦 季秀玲 林连兵 魏云林 张琦 
国家自然科学基金项目(31160016;31660454);云南省应用基础研究基金资助项目(KKSA201126005);教育部回国人员科研启动基金项目(KKQA201226003)资助~~
为了克隆与表达深黄被孢霉(Mortierella isabellina)M6-22苹果酸酶基因,根据深黄被孢霉M6-22转录组测序结果,以其c DNA为模板PCR扩增苹果酸酶基因编码序列,经测序验证分析后将扩增片段连接到表达载体pET-32a(+)中构建重组表达质粒pET32a...
关键词:深黄被孢霉 苹果酸酶 基因克隆与表达 NADPH 
红冬孢酵母Δ^(12)-脂肪酸脱氢酶基因的克隆和表达被引量:1
《云南大学学报(自然科学版)》2016年第4期669-675,共7页罗敏周 杨晓霞 季秀玲 林连兵 魏云林 张琦 
国家自然科学基金(31160016;31260034);云南省应用基础研究基金(KKSA201126005);教育部回国人员科研启动基金(KKQA201226003)
Δ^(12)-脂肪酸脱氢酶是多不饱和脂肪酸合成的关键酶.参考已知的Δ^(12)-脂肪酸脱氢酶基因序列设计特异性引物,通过PCR扩增从红冬孢酵母YM25235中获得了全长为1 341 bp的一个cDNA序列.序列分析表明,该序列具有一个编码446个氨基酸、相...
关键词:红冬孢酵母 Δ^12-脂肪酸脱氢酶 亚油酸 克隆和表达 
促进微生物生产多不饱和脂肪酸的研究被引量:3
《食品与生物技术学报》2015年第8期785-789,共5页张琦 李凌彦 赵汝丽 魏云林 林连兵 季秀玲 
国家自然科学基金项目(31160016;31260034);云南省应用基础研究基金项目(KKSA201126005);教育部回国人员科研启动基金项目(KKQA201226003)
多不饱和脂肪酸(PUFAs)作为功能性油脂已被广泛应用于食品工业领域。随着对纯PUFAs脂质的需求量越来越多,来自于动植物和深海洋鱼的PUFAs远远不能满足市场需求,且动植物含油量及不饱和脂肪酸类型、比例均受到一定的限制。一系列的研究表...
关键词:微生物 多不饱和脂肪酸 生物合成 
粘红酵母△^(12)-脂肪酸脱氢酶基因的克隆和表达被引量:1
《应用与环境生物学报》2015年第3期421-426,共6页杨晓霞 何仕武 魏云林 林连兵 季秀玲 张琦 
国家自然科学基金项目(31160016;31260034);云南省应用基础研究基金资助项目(KKSA201126005);教育部回国人员科研启动基金(KKQA201226003)资助~~
Δ12-脂肪酸脱氢酶一般特异性催化在油酸的Δ12位引入双键转变成亚油酸.为了从粘红酵母YM25079中克隆全长Δ12-脂肪酸脱氢酶基因序列,参考已知的Δ12-脂肪酸脱氢酶基因序列设计基因特异性引物,通过PCR扩增获得到全长为1 353 bp的cDNA序...
关键词:粘红酵母 Δ12-脂肪酸脱氢酶 亚油酸 克隆和表达 
mRNA差异显示技术研究低温条件下深黄被孢霉基因的表达差异被引量:2
《云南大学学报(自然科学版)》2015年第2期317-322,共6页杨晓霞 何仕武 赵汝丽 魏云林 林连兵 季秀玲 张琦 
国家自然科学基金(31160016;31260034);云南省应用基础研究基金(KKSA201126005);教育部回国人员科研启动基金(KKQA201226003)
mRNA差异显示技术已经广泛应用于研究植物、动物和微生物在各种环境条件下基因的差异表达研究.研究以15℃和30℃培养的深黄被孢霉M6-22菌体为材料,利用mRNA差异显示技术研究两种培养条件下基因的表达差异.经实时荧光定量PCR验证,共获得...
关键词:深黄被孢霉 MRNA差异显示技术 荧光定量PCR 基因表达差异 低温适应性 
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