国家自然科学基金(30300222)

作品数：11被引量：44H指数：4
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相关机构：西北农林科技大学陕西省农业分子生物学重点实验室郑州大学河南科技大学更多>>
相关期刊：《西北植物学报》《畜牧兽医学报》《中国农业科学》《农业生物技术学报》更多>>
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共转化大肠杆菌hemA和hemL基因增强小麦过氧化物酶WP1在原核系统中的功能性表达
《生物工程学报》2012年第7期865-876,共12页张超 单丽伟 苏帅坤 南艳妮 郭忠玉 范三红 
国家自然科学基金(No.30300222);西北农林科技大学创新性实验计划重点项目资助~~
小麦种子过氧化物酶WP1属于含血红素的植物Ⅲ型过氧化物酶,该酶不仅具有抗真菌活性,而且影响面粉加工品质。为提高WP1在大肠杆菌中的功能性表达,构建了用于提高大肠杆菌内源血红素合成,包含hemA和hemL基因的重组质粒pACYC-A-L,将其分别...
关键词：小麦过氧化物酶1 原核表达 谷氨酰tRNA还原酶 谷氨酸半醛变位酶 血红素 二硫键 
小麦Antiquitin cDNA克隆、空间结构预测及表达谱分析被引量：1
《中国农业科学》2011年第5期859-866,共8页范三红 刘三阳 李莉 齐亚飞 
国家自然科学基金(30300222);国家转基因专项(2008ZX08002-003);中央高校基本科研业务费专项(QN2009070)
【目的】从普通小麦中克隆Antiquitin(TaATQ)cDNA,分析其编码序列及空间结构特征,研究其在不同组织、种子发育过程及干旱和盐胁迫下的表达谱。【方法】基于EST拼接,通过RT-PCR方法克隆小麦TaATQ cDNA;通过同源建模分析TaATQ的结构特征,...
关键词：小麦 ANTIQUITIN 结构特征 表达模式 
小麦种子过氧化物酶WP1基因的原核表达、纯化及多克隆抗体制备被引量：18
《生物工程学报》2011年第1期26-30,共5页单丽伟 唐如春 刘三阳 范三红 郭蔼光 
国家自然科学基金(No.30300222)资助~~
WP1是小麦种子中最主要的阳离子过氧化物酶,该酶不仅参与种子的发育过程,而且影响面粉的加工品质。首先构建了WP1基因原核表达载体pET28a-WP1,并将其转化到T7 Expression大肠杆菌菌株中诱导表达。His-tag融合的WP1主要以包涵体形式存在...
关键词：小麦 种子过氧化物酶 WP1 表达纯化 抗体制备 
拟南芥Alpha-dioxygenase 2(AtDOX2)在毕赤酵母中的表达、纯化及活性鉴定被引量：3
《农业生物技术学报》2011年第1期51-56,共6页魏少华 杨宇衡 安瑞 单丽伟 范三红 
国家自然科学基金(No.30300222);西北农林科技大学青年科学基金(No.QN2009070)资助
为了获得具有生物活性的拟南芥(Arabidopsis thaliana)alpha-dioxygenase2(AtDOX2),将其对应基因AtDOX2编码区克隆到酵母表达载体pPIC9k中,获得重组表达载体pPIC9k-AtDOX2,将线性化的重组载体电击转化入毕赤酵母(Pichia pastoris)表达菌...
关键词：拟南芥 AtDOX2 毕赤酵母 过氧化物酶 α-双加氧酶 
拟南芥Antiquitin基因的原核表达和生物信息学分析被引量：1
《西北植物学报》2009年第12期2378-2384,共7页安瑞 魏少华 范三红 单丽伟 
国家自然科学基金(30300222);西北农林科技大学优秀人才基金(042R009)
将拟南芥Antiquitin基因重组到原核表达载体pMAL-c4x和pET41中,在T7 Express菌株中诱导表达,经Amylose和Ni-NTA亲和层析柱纯化获得重组蛋白。SDS-PAGE结果表明:MBP和His-tag融合的拟南芥An-tiquitin主要以可溶性形式存在,表达量分别占...
关键词：拟南芥 ANTIQUITIN 重组表达 亲和纯化 NADH 
小麦种子过氧化物酶基因wp1的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：4
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》2009年第3期213-218,共6页单丽伟 罗海霞 范三红 郭蔼光 
国家自然科学基金项目(30300222)
【目的】克隆小麦种子过氧化物酶基因wp1,并利用原核系统表达纯化。【方法】通过RT-PCR从小麦未成熟种子中扩增wp1基因cDNA,构建His-tag和MBP融合表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。使用直链淀粉亲和层析获得MBP-WP1融合蛋白,并以ABTS...
关键词：小麦 种子过氧化物酶 高GC含量 基因克隆 基因表达 
拟南芥Alpha-dioxygenase1的原核表达、纯化及活性的检测被引量：3
《华北农学报》2008年第3期9-12,共4页张小梅 韩念法 张美祥 李广录 范三红 郭蔼光 
国家自然科学基金(30300222);西北农林科技大学优秀人才基金(042R009)
从经水杨酸处理的拟南芥开花期植株中获得cDNA,扩增得到Alpha-dioxygenase 1(DOX1)基因,进行原核表达、纯化和生物活性检测。利用原核表达载体pMAL-c4x在T7 Express CompetentE.coli和BL21(DE3)-RIPL codon+菌株中表达DOX1,经Amylose Re...
关键词：Alpha—dioxygenase 1 重组表达 2 4-DNP 亲和纯化 活性 
小麦种子过氧化物酶的纯化及其部分酶学性质被引量：6
《农业生物技术学报》2008年第1期181-182,共2页罗龙海 范三红 张美祥 郭蔼光 
国家自然科学基金项目(No.30300222)资助
过氧化物酶（peroxidase.POD.EC1.11.1.7）广泛存在于各种动物、植物和微生物体内,是含有血红素辅基的一类氧化酶,其作用底物主要有酚类、胺类、抗坏血酸、吲哚、某些无机物和有机物和有机过氧化（Van Huystee,1987）。过氧化物酶在植...
关键词：小麦种子 过氧化物酶 酶学性质 
兔病毒性出血症病毒YL株衣壳蛋白(VP60)基因的克隆和生物信息学分析被引量：5
《畜牧兽医学报》2007年第7期700-707,共8页李传山 杨颖 张守涛 杨增岐 郭蔼光 
国家转基因植物研究与产业化开发专项(JY2032A211201);国家自然科学基金项目(30300222)
应用RT-PCR方法从兔出血症病毒(RHDV)西北分离株YL株中克隆出衣壳蛋白VP60基因并测序,YL株是中国西北地区首株被测序的RHDV,测序结果显示VP60基因全长1 740 bp,编码579个氨基酸,测序结果在GenBank中注册(登录号为DQ530363)。从GenBank...
关键词：兔出血症病毒 衣壳蛋白(VP60)基因 RT-PCR 生物信息 序列分析 
拟南芥Alpha-dioxygenase 2原核表达、纯化及亚细胞定位预测被引量：2
《农业生物技术学报》2007年第5期816-820,共5页张美祥 张小梅 范三红 罗龙海 闫晓华 郭蔼光 
国家自然科学基金(No.30300222);西北农林科技大学优秀人才基金(No.042R009)资助
将拟南芥α-dioxygenase2(DOX2)基因编码区克隆到原核表达载体pGEX-5X-1获得重组表达载体pGEX-DOX2,转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)pLysS和BL21(DE3)-RIPL codon+菌株中进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blot结果表明,融合...
关键词：α-DOX2 表达 稀有密码子 亲和纯化 亚细胞定位 
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