国家重点基础研究发展计划(2007CB116308)

作品数：19被引量：102H指数：7
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相关作者：何孔旺温立斌杨汉春郭容利潘群兴更多>>
相关机构：江苏省农业科学院中国农业大学中华人民共和国农业部国家兽用生物制品工程技术研究中心更多>>
相关期刊：《畜牧兽医学报》《中国农业科学》《江苏农业学报》《南京农业大学学报》更多>>
相关主题：P1猪圆环病毒2型猪圆环病毒分子克隆广西巴马小型猪更多>>
相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
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应用高分辨熔点曲线分析区分类猪圆环病毒因子P1和猪圆环病毒2型被引量：4
《江苏农业学报》2010年第2期315-319,共5页温立斌 何孔旺 杨汉春 郭容利 钟书霖 周俊明 李成仁 陈梦海 
国家自然科学基金项目(30972184);国家“973”计划前期研究专项项目(2007CB116308);江苏省自然科学基金项目(BK2008351)
为评价高分辨熔点曲线分析在快速鉴别类猪圆环病毒因子P1和猪圆环病毒2型中的应用。在Cor-bett Rotor-Gene 6000定量PCR仪上,利用EvaGreen荧光染料对靶核苷酸序列进行扩增,建立HRM分析P1和PCV2的工作流程。在优化各种条件基础上,利用HR...
关键词：高分辨熔点曲线 类猪圆环病毒因子P1 猪圆环病毒2型 鉴别 
一株类猪圆环病毒2型因子P1的全基因组序列测定与分析被引量：18
《中国农业科学》2010年第2期411-416,共6页温立斌 何孔旺 杨汉春 
国家自然科学基金资助项目(30972184);国家"973"计划前期研究专项资助课题(2007CB116308)
【目的】确定猪体内存在与猪圆环病毒2型核苷酸序列高度同源的因子。【方法】首先利用PCR方法对来自临床表现为猪断奶后多系统衰竭综合征的猪血清所抽提的DNA进行扩增,根据获得的序列再设计引物进行反向PCR,拼接得到类猪圆环病毒2型因...
关键词：猪圆环病毒2型 P1 全基因组 序列测定与分析 
两株猪圆环病毒2型病毒的分离鉴定及其序列分析被引量：1
《江苏农业学报》2009年第5期1063-1067,共5页郭容利 何孔旺 钟书霖 温立斌 潘群兴 
国家“973”计划前期专项(2007CB116308);江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(07)608];江苏省农业科学院基金项目(6110736)
利用PK15细胞从猪断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）临床发病与死亡猪中分离到2株病毒；分别命名为Haian（登录号为FJ712216）和Xuancheng（登录号为FJ712215）。利用间接免疫荧光（IFA）和聚合酶链式反应（PCR）对其进行鉴定，并对其全...
关键词：猪圆环病毒2型 分离 鉴定 序列分析 
类猪圆环病毒因子P1 VP2蛋白二级结构与B细胞表位预测被引量：8
《华北农学报》2009年第5期45-49,共5页温立斌 何孔旺 杨汉春 王玉然 
国家“973”计划前期研究专项(2007CB116308);江苏省自然科学基金(BK2008351)
旨为预测类猪圆环病毒因子P1 VP2蛋白的B细胞表位。采用生物信息软件和互联网服务器,预测VP2的二级结构,分析VP2表面特性(亲水性、可塑性、可及性和抗原性),综合预测VP2的B细胞抗原表位。结果表明,P1VP2蛋白肽链的6-18和80-92区段为预测...
关键词：P1 二级结构 B细胞表位 生物信息学 预测 
SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测类猪圆环病毒因子P1被引量：13
《华北农学报》2009年第4期31-35,共5页温立斌 何孔旺 杨汉春 郭容利 周俊明 钟书霖 
国家“973”计划前期研究专项(2007CB116308);江苏省自然科学基金(BK2008351)
该研究旨在建立快速、敏感和特异的检测类猪圆环病毒因子P1的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR法,用于P1的早期诊断。以感染P1的猪血清DNA提取物为模板,采用PCR扩增P1 101 bp的基因片段,将其克隆至pMD18-T载体,重组质粒测序并进行同源性分析;...
关键词：类猪圆环病毒因子 P1 荧光定量PCR 熔解曲线 检测 
类圆环病毒因子P1感染对猪外周血T淋巴细胞含量和增殖活性的影响被引量：4
《华北农学报》2009年第B08期1-4,共4页温立斌 何孔旺 杨汉春 郭容利 钟书霖 周俊明 陈梦海 
国家“973”计划前期研究专项基金(2007CB116308);江苏省自然科学基金(BK2008351)
探讨类猪圆环病毒因子P1感染对猪细胞免疫功能的影响。将12头30日龄广西巴马小型猪随机分成试验组和对照组,每组6头。在猪感染P1后第3,8,17,24,31和40天,采用血常规和单色流式细胞术分析猪外周血T淋巴细胞的含量,通过WST法对其增殖活性...
关键词：类猪圆环病毒因子 广西巴马小型猪 T淋巴细胞计数 T淋巴细胞增殖活性 
猪Th1/Th2型细胞因子重组质粒实时荧光定量PCR标准曲线的建立被引量：8
《华北农学报》2009年第B08期5-8,共4页温立斌 何孔旺 杨汉春 郭容利 李成仁 卢维彩 贾付从 
国家"973"计划前期研究专项基金(2007CB116308);江苏省自然科学基金(BK2008351)
依据GenBank登录的猪Th1型细胞因子(IL-2、IL-12、IFN-γ)、Th2型细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)的核苷酸序列设计特异性引物,经RT-PCR技术从猪外周血单个核细胞中扩增和克隆了上述因子的101 bp核苷酸片段。测序鉴定后,将重组质粒10倍系...
关键词：TH1/TH2型细胞因子 外周血单个核细胞 重组质粒 实时荧光定量PCR 
猪感染类猪圆环病毒因子P1后血小板的变化被引量：2
《内蒙古农业科技》2009年第3期54-56,共3页温立斌 何孔旺 杨汉春 吕立新 郭容利 周俊明 钟书霖 
国家"973"计划前期研究专项(2007CB116308);江苏省自然科学基金(BK2008351)
探讨类猪圆环病毒因子P1感染对广西巴马小型猪血小板参数的影响。将12头30日龄的广西巴马小型猪随机、平均分成两组,实验组经腹股沟淋巴结途径接种类猪圆环病毒因子P1的分子克隆。采用自动血液分析仪检测接种后3d、8d、17d、24d、31d及...
关键词：类猪圆环病毒因子 广西巴马小型猪 血小板参敷 
类猪圆环病毒因子P1感染对猪红细胞的影响被引量：15
《内蒙古农业科技》2009年第2期46-48,共3页温立斌 何孔旺 杨汉春 倪艳秀 张雪寒 俞正玉 茅爱华 
国家"973"计划前期研究专项(2007CB116308);江苏省自然科学基金资助项目(BK2008351)
探讨类猪圆环病毒因子P1感染后,广西巴马小型猪发生贫血的类型,推断贫血发生的原因。12头30日龄的猪随机分成两组,每组6头,试验组经腹股沟淋巴结途径接种P1分子克隆。采用自动血液分析仪对接种后3d、8d、17d、24d、31d及40d猪的外周血...
关键词：类猪圆环病毒因子 广西巴马小型猪 贫血 红细胞参数 
白介素2基因与猪圆环病毒2型ORF2基因真核双表达质粒的构建被引量：3
《南京农业大学学报》2009年第1期100-104,共5页潘群兴 何孔旺 温立斌 郭容利 黄克和 
国家973计划前期研究专项课题(2007CB116308)
应用基因重组技术,构建猪圆环病毒2型ORF2基因与白介素2基因(IL-2)的真核双表达载体并将其转染CHO细胞,通过RT-PCR、间接ELISA、Western-blot、间接免疫荧光检测(IFA)等方法验证基因的表达情况。结果表明:成功构建了猪圆环病毒2型ORF2...
关键词：猪圆环病毒2型 ORF2基因 IL-2基因 DNA疫苗 
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