河南省科技攻关计划(0624410041)

作品数：14被引量：28H指数：4
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一种去除聚合酶链式反应引物二聚体的简便方法被引量：1
《新乡医学院学报》2012年第6期417-418,421,共3页林艳 李照熙 董卫华 王天云 
河南省科技厅科技攻关项目(编号:0624410041);河南省教育厅自然科学基金项目(编号:2008A310008)
目的提供一种去除聚合酶链式反应(PCR)引物二聚体的简便方法。方法根据聚乙二醇(PEG)能够选择性沉淀DNA片段的原理,确定分别去除100 bp、100～200 bp、100～300 bp条带的PEG 6000最终质量分数,因引物二聚体大小一般为200 bp,最终运用到...
关键词：聚乙二醇6000 引物二聚体 聚合酶链式反应 
一种PCR结合DNA回收克隆基因方法被引量：1
《重庆医学》2011年第14期1433-1434,共2页董卫华 王俐 张俊河 王芳 王天云 
河南省科技厅科技攻关项目(0624410041);河南省教育厅自然科学基金项目(2008A310008)
目的探讨一种结合DNA片段回收扩增目的片段的方法。方法以PCR扩增克隆β-珠蛋白MAR和survivin启动子为例,根据GenBank报道的序列设计引物,PCR扩增克隆β-珠蛋白MAR和survivin启动子。结果 PCR产物有非特异DNA片段、根据DNA片段大小采取...
关键词：聚合酶链反应 引物 凝胶回收 电泳 
DNA Ladder的制备被引量：3
《中国组织工程研究与临床康复》2011年第24期4493-4496,共4页王俐 董卫华 张俊河 王天云 
河南省科技厅科技攻关项目(0624410041);河南省教育厅自然科学基金项目(2008A310008)~~
背景:目前,制备DNA分子量标准的方法主要有2种,一种是用限制性内切酶消化某种DNA,另一种是利用PCR扩增,2种方法各有优缺点。在前期采用PCR技术在前期扩增100～500bp片段的基础上,实验室又成功扩增出600～1000bp片段,PCR产物经过纯化,混...
关键词：DNA分子量标准参照物 PCR 凝胶电泳 pUC-DNA PCR回收产物 
MAR介导的逆转录病毒包装细胞系的建立
《生物技术通报》2010年第12期182-185,共4页张靖 王天云 张俊河 杨保胜 张继红 
河南省科技厅科技攻关项目(0624410041)
根据GenBank登录的序列号,使用primer5.0进行引物设计,提取人的外周血基因组DNA为模板,PCR方法扩增出人β-珠蛋白MAR序列,将MAR序列插入到逆转录病毒表达载体pLXSN,构建MAR序列介导的逆转录病毒载体。酶切和测序鉴定后,阳离子聚合物转染...
关键词：核基质结合区 逆转录病毒载体 包装细胞系 
一种PCR酶切克隆目的DNA方法
《生物技术通报》2010年第12期186-188,共3页王俐 张俊河 董卫华 王芳 王天云 
河南省科技厅科技攻关项目(0624410041);河南省教育厅自然科学基金项目(2008A310008)
以PCR扩增克隆survivin启动子为例,根据GenBank报道的序列设计引物,PCR扩增克隆survivin启动子。通过软件在线分析扩增的survivin启动子酶切位点,将扩增与预期的片段大小一致的DNA片段进行酶切,再进行测序。结果表明,采取酶切鉴定PCR产...
关键词：PCR 引物 酶切 电泳 
基于多重PCR的DNA Marker制备方法被引量：2
《生物技术通报》2010年第12期189-190,200,共3页张俊河 王俐 董卫华 王芳 王天云 
河南省科技厅科技攻关资助项目(0624410041);河南省教育厅自然科学基金(2008A310008)
报道了一种简便的制备分子量大小为100-1000bp DNA marker的方法,其原理是以一段特异的DNA片段为模板,设计PCR引物,采用多重PCR的方法一次扩增100-1000bp系列条带,酚/氯仿抽提,乙醇沉淀,即可得到条带清晰的DNA marker。
关键词：DNA MARKER PCR 凝胶电泳 制备 
一种通用的基因组DNA提取方法被引量：3
《生物技术》2010年第5期34-36,共3页张俊河 王芳 房娟 曹冰睿 李云 郭彦梅 向梅 王天云 
河南省科技攻关项目(0624410041);河南省自然科学基金项目(2008A310008)资助
目的:探讨一种通用的基因组DNA提取方法。方法:采用改良的膜法分别从动植物组织、外周血、细菌、细胞等标本提取基因组DNA,DNA样品经紫外吸收、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增和酶切进行检测。结果:该方法提取的基因组DNA纯度较高,电泳条带清...
关键词：基因组DNA PCR 提取 
重叠延伸PCR合成血管内皮生长因子基因被引量：4
《生物技术》2010年第5期40-42,共3页张继红 张靖 王俐 杨保胜 王天云 
河南省科技攻关项目(0624410041)资助
目的:重叠延伸PCR(OE-PCR)方法合成人血管内皮生长因子(VEGF)基因。方法:根据Genbank中人VEGF基因的编码序列合成15个寡核苷酸片段,相邻引物间均有19个碱基互补,经过7轮PCR循环扩增出人VEGF基因,并将其克隆至pMD18-Tvector,挑取3个重组...
关键词：血管内皮生长因子 重叠延伸PCR 动态模板 基因合成 
构建人csp-B核基质结合区克隆及其介导的反转录载体
《中国组织工程研究与临床康复》2010年第11期1948-1950,共3页昝玉玺 王俐 张俊河 王天云 
国家自然科学基金(30470030);河南省自然科学基金(0511042300);河南省科技攻关项目(0624410041)~~
背景:核基质结合区是染色质被限制酶消化后仍附着在核基质上的DNA序列。大量实验表明,核基质结合区可以作为DNA复制的起始点或调控基因的转录,构建核基质结合区表达载体能提高外源基因表达水平,增强外源基因表达的稳定性及提高转化细胞...
关键词：核基质结合区 csp-B 基因克隆 反转录载体 载体构建 
核基质结合区的位置对转基因表达的影响被引量：3
《中国生物化学与分子生物学报》2009年第9期839-843,共5页张俊河 昝玉玺 王天云 
国家自然科学基金资助项目(No.30470030);河南省科技厅科技攻关项目(No.0624410041);河南省教育厅自然科学基金资助项目(No.2008A310008)~~
为研究核基质结合区(MAR)序列不同插入位置对转基因表达作用的影响,PCR扩增人β-珠蛋白MAR分别插入到含氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)报告基因真核表达载体pCATG表达盒两侧、5′端及3′端.酶切鉴定后,用阳...
关键词：核基质结合区 插入位置 转基因表达 报告基因 
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