哈尔滨市科技攻关计划项目(2006AA3AS040)

作品数：13被引量：17H指数：2
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相关作者：周建华姜成刚赵立平相文华林跃智更多>>
相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所东北农业大学内蒙古农业大学中国疾病预防控制中心更多>>
相关期刊：《中国预防兽医学报》《病毒学报》《动物医学进展》《东北农业大学学报》更多>>
相关主题：马传染性贫血病毒EIAV马传染性贫血S2基因感染性克隆更多>>
相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
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应用毛发PCR法检测猕猴TRIM5基因序列CypA转座子插入的TRIMCyp嵌合基因型被引量：1
《中国预防兽医学报》2010年第11期908-910,共3页汤艳东 于长青 刘晓明 崔多英 那雷 饶军华 季芳 吕晓玲 郑永辉 周建华 
兽医生物技术国家重点实验室开放基金(SKLVBF200904);"十一五"重大传染病专项(2008ZX1001-1010);黑龙江省科技厅项目(GC06C50);哈尔滨市科技攻关计划项目(2006AA3AS040)
为检测猕猴TRIM5基因序列CypA转座子插入TRIMCyp突变基因型个体,本研究建立了应用毛发PCR方法,在基因组水平初步检测猕猴属中TRIMCyp基因型方法,并从猕猴属食蟹猴中初步筛选出TRIMCyp突变基因杂合和纯合子个体。实验以平顶猴为阳性对照,...
关键词：毛发PCR 猕猴 TRIM5α 基因突变 HIV-1 
马传染性贫血病毒疫苗株S2基因不同变异位点逆向突变感染性克隆的体外复制特性分析
《中国预防兽医学报》2009年第12期919-924,共6页高旭 姜成刚 高华 林跃智 赵立平 相文华 周建华 
国家自然科学基金(30771994);十一五重大传染病专项(2008ZX1001-1010);哈尔滨市科技攻关计划项目(2006AA3AS040)
为研究EIAV弱毒疫苗株(EIAVFDDV15)S2基因发生的稳定性突变对疫苗株特性的作用以及S2基因的功能,以EIAVFDDV15感染性克隆质粒pFDDV3-8为模板,根据疫苗研制过程中S2基因发生的4个主要稳定性变异位点,构建及拯救出S2基因不同差异位点逆向...
关键词：马传染性贫血病毒 S2基因 逆向突变 感染性克隆 复制特性 
中国株EIAV S2基因逆向突变感染性克隆的构建及体外感染性评价被引量：2
《病毒学报》2009年第4期309-315,共7页高旭 姜成刚 韩秀娥 赵立平 沈荣显 相文华 周建华 
国家自然科学基金(30771994);黑龙江省发展高新技术产业专项资金(FW05B007);哈尔滨市科技攻关计划项目(2006AA3AS040)
以中国株EIAV的驴强毒株EIAVDV115与疫苗株EIAVFDDV15的S2基因变化规律为依据,利用反向遗传技术对EIAV弱毒疫苗株全基因组感染性克隆pFDDV3-8的S2基因区进行逆向突变,构建了含有强毒株EIAVDV115S2基因区内4个稳定点突变的克隆质粒pFDDVS...
关键词：马传染性贫血病毒 S2基因 逆向突变 感染性克隆 
马传染性贫血病毒受体插入型基因的原核表达
《动物医学进展》2009年第3期36-39,共4页杨旭艳 张淑琴 王雪峰 曹贵方 周建华 
黑龙江省发展高新技术产业专项资金项目(FW05B007);哈尔滨市科技攻关计划项目(2006AA3AS040);中国农业科学院一级岗位人才基金项目
采用PCR方法扩增出马传染性贫血病毒受体(EIAVR1)插入型(INR)的基因,将INR基因分别亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1和pET-30a中,经PCR和双酶切鉴定以及序列测定,构建其并将其转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中进行表达。结果显示,在pET-30a-IN...
关键词：马传染性贫血病毒 受体插入型基因 原核表达 
马传染性贫血病毒白细胞弱毒疫苗株及其亲本毒驴强毒株前病毒基因组比较分析被引量：5
《病毒学报》2008年第6期443-450,共8页王雪峰 姜成刚 郭巍 项伟 吕晓玲 赵立平 王凤龙 孔宪刚 张晓燕 邵一鸣 周建华 
国家自然基金(30771994);哈尔滨市科技攻关计划项目(2006AA3AS040)
为阐明马传染性贫血白细胞弱毒疫苗株(EIAVDLV)的致弱和免疫保护机理,对EIAVDLV121及其亲本驴强毒株(EIAVDV117)前病毒全基因组序列进行了测定,并结合准种理论,分析了EIAV疫苗致弱过程中基因组进化特点。利用LA-PCR技术对EIAVDV117和EIA...
关键词：马传染性贫血病毒 弱毒疫苗株 前病毒 基因组进化分析 准种 
免疫抑制对EIAV弱毒疫苗免疫马体内疫苗弱毒株载量的影响被引量：4
《生物化学与生物物理进展》2008年第11期1276-1281,共6页马建 姜成刚 林跃智 郭亮 郭巍 孔宪刚 沈荣显 邵一鸣 张哓燕 周建华 
国家自然科学基金(30771994);黑龙江省发展高新技术产业专项资金(FW05B007);哈尔滨市科技攻关项目(2006AA3AS040)资助项目~~
为了研究马传染性贫血弱毒疫苗EIAVFDDV在体内的生物学特性,特别是在免疫马血浆中低拷贝存在状态的形成原因,使用连续给予地塞米松的方法,对EIAVFDDV免疫马匹进行了免疫功能抑制.连续给药10天后,以植物血凝素(PHA)作为刺激原的淋巴细胞...
关键词：EIAVFDDV 减毒疫苗 免疫抑制 淋巴细胞增殖实验 病毒载量 
中国马传染性贫血病毒DLV株前病毒gp90基因在马体内的变异分析
《动物医学进展》2008年第11期20-24,共5页杨彬 王雪峰 周建华 王凤龙 
国家自然基金项目(30771994);哈尔滨市科技攻关计划项目(2006AA3AS040)
分别以EIAV辽宁马强毒株(EIAVliao)前病毒DNA和马传染性贫血驴白细胞弱毒疫苗株(EIAVDLV)前病毒DNA为模板,从免疫接种后不同时期马血清中利用nested-PCR技术,扩增了约1.4kb的gp90基因。将其克隆后进行了测序,测序结果表明,免疫EIAVDLV...
关键词：马传染性贫血弱毒疫苗株 GP90基因 N-连接糖基化 序列分析 突变 
猴免疫缺陷病毒p27蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
《中国预防兽医学报》2008年第11期901-905,共5页华秋东 吴志军 姜成刚 沈楠 陈维多 相文华 周建华 
哈尔滨市科技攻关项目(2006AA3AS040)
利用PCR技术从质粒pSHIV89.6P中扩增猴免疫缺陷病毒(SIV)衣壳蛋白p27基因,并将其插入表达载体pET32a(+)构建重组质粒pET32a-p27,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,对其产物进行SDS-PAGE和Western blot分析,并将纯化定量后的表达产物免疫小鼠...
关键词：猴免疫缺陷病毒 P27蛋白 单克隆抗体 
CFSE检测马传染性贫血病毒疫苗免疫马T细胞增殖方法的建立
《细胞与分子免疫学杂志》2008年第11期1044-1047,共4页林跃智 邓喜林 沈楠 吕晓玲 赵立平 孔宪刚 邵一鸣 周建华 
国家自然科学基金资助项目(30771994);黑龙江省发展高新技术产业专项资助项目(FW05B007);哈尔滨市科技攻关计划项目(2006AA3AS040)
目的:以流式细胞术(FCM)检测马传染性贫血病毒(EIAV)抗原特异性的T淋巴细胞增殖。方法:将新鲜分离的马外周血单个核细胞(PBMC)进行CFSE染色,经纯化病毒体外刺激并培养5d后,进行T淋巴细胞亚型标记,检测特异性增殖的CD4+和CD8+细胞比例。...
关键词：T细胞增殖 CFSE 马传染性贫血病毒 
人/猴免疫缺陷病毒SHIV衣壳蛋白p27的表达纯化及活性鉴定被引量：2
《东北农业大学学报》2008年第11期51-55,共5页华秋东 姜成刚 王海 相文华 周建华 陈维多 
黑龙江省科技攻关项目(GC06C502);哈尔滨市科技攻关项目(2006AA3AS040)
利用PCR技术从质粒SHIV89.6P中扩增p27gag基因,并克隆入pMD18-T载体,测序鉴定;将p27gag基因插入表达载体pET32aT7启动子下游,构成重组质粒pET32a-p27并使其在大肠杆菌BL21中高效表达,最后利用固定化金属离子(Ni2+)配体亲和层析技术从表...
关键词：SHIV P27 原核表达 大肠杆菌 
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