国家高技术研究发展计划(2007AA100504)

作品数:29被引量:69H指数:5
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相关作者:李碧春沈兴家张耀洲田智泉唐顺明更多>>
相关机构:扬州大学中国农业科学院蚕业研究所江苏科技大学浙江理工大学更多>>
相关期刊:《安徽农业科学》《畜牧兽医学报》《中国农业科学》《生物技术》更多>>
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相关领域:农业科学生物学化学工程更多>>
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RNA聚合酶Ⅱ启动子驱动的长双链RNA干扰载体的构建与验证被引量:1
《黑龙江畜牧兽医》2013年第8期1-5,190,共6页曹柯 孙朕 黄培华 樊宝良 
国家自然科学基金项目(30972081);国家重大专(2011ZX08006-004);"863"国家高技术研究发展计划项目(2007AA100504)
为了探索构建由RNA聚合酶Ⅱ型启动子驱动、能有效避免干扰素反应的表达长双链RNA的RNA干扰载体,试验在转录单元两端各添加了一个自剪切核酶序列,在转录后切成RNA出核所必要的5'帽子和3'polyA尾,以绿色荧光蛋白(EGFP)基因为报告基因插入...
关键词:RNA干扰 RNA聚合酶Ⅱ启动子 长双链RNA 核酶 
野蚕孵化酶基因的克隆与生物信息学分析被引量:5
《江西农业学报》2011年第10期1-5,共5页唐顺明 赵新慧 吴俊 裘智勇 沈兴家 
国家高技术研究发展计划863重点项目(2007AA100504);江苏省自然基金项目(SBK200930217);江苏省高校自然科学基金项目(08KJB230001)
采用RT-PCR法从野蚕胚胎中克隆了一个885 bp孵化酶基因,命名为BmandHE(GenBank登录号:JN620366)。BmandHE ORF编码294个氨基酸残基,蛋白分子质量为33.57 kD,等电点为5.55。在BmandHE N-端存在16个氨基酸的信号肽,BmandHE序列含有锌指结...
关键词:野蚕 孵化酶基因 ORF 克隆 生物信息学分析 
鸡ES细胞体外定向诱导分化特性的研究被引量:1
《畜牧兽医学报》2011年第7期905-912,共8页李碧春 陈香凝 裴敬帅 施青青 傅德智 阴彦辉 张振韬 窦套存 王克华 
国家自然科学基金(30871791);江苏省高校自然科学重大基础研究项目(08KJA230001);国家高新技术863项目(2007AA100504);江苏省六大人才高峰资助项目
旨在探索鸡胚胎干细胞(ES细胞)体外定向诱导的多向分化潜能。分离鸡X期胚盘细胞,体外培养传代,经鉴定后,采用地塞米松(DEX)、β-甘油磷酸钠(β-GP)和维生素C(VitC)诱导ES细胞向成骨细胞分化;采用维甲酸(RA)、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX...
关键词: 胚胎干细胞 体外培养 诱导分化 
利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在家蚕中表达人生长素被引量:2
《蚕业科学》2011年第2期320-324,共5页付凡 陈蔚 唐顺明 汪生鹏 黄金山 赵巧玲 沈兴家 
国家自然科学基金项目(No.31072083);国家高技术研究发展计划“863”项目(No.2007AA100504)
人生长素是由腺垂体分泌的一种在人体生长、发育及代谢中发挥重要作用的激素,具有广泛的生理作用。利用家蚕核型多角体病毒(BmNPV)Bac-to-Bac表达系统,将人生长素基因(hgh)克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,通过细菌转座子原理,转化Bm...
关键词:Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 家蚕核型多角体病毒 家蚕 人生长素基因 
人IL-3、GM-CSF和Hly基因的cDNA克隆及测序
《中国畜牧兽医》2011年第4期91-94,共4页孙英民 孙朕 樊宝良 
农业部转基因重大专项项目"高品质转基因奶牛新品种培育"(2008ZX08007-001);农业部转基因重大专项项目"环境友好的转基因猪新品系培育"(2008ZX08006004);国家863计划重点项目"家禽与昆虫蛹生物反应器研究"(2007AA100504)
试验利用PCR技术扩增并获得了人IL-3、GM-CSF和人溶菌酶(human lysozyme,Hly)基因组基因编码区序列,人IL-3和GM-CSF基因PCR产物与pMD19-T连接,Hly基因PCR产物同pEASY-Blunt载体连接,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,蓝白斑筛选后经PCR及酶...
关键词:IL-3基因 GM-CSF基因 Hly基因 CDNA 克隆 测序 
人ob基因克隆及其亚细胞定位的研究
《生物技术》2011年第2期7-10,共4页陈香凝 阴彦辉 施青青 孙敏 傅德智 高波 李碧春 
国家"863"高技术研究发展计划项目(2007AA100504);江苏省高校自然科学重大基础研究项目(08KJA230001)资助
目的:旨在克隆人肥胖(obese,ob)基因的全长cDNA序列,与EGFP重组构建融合蛋白表达载体,并分析其亚细胞水平的定位。方法:提取人脂肪细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增出人ob基因cDNA,并克隆至真核表达载体pEGFP-C1,重组质粒转染NIH-3T3细胞,...
关键词: 肥胖基因 EGFP蛋白 亚细胞定位 
蛋鸡骨骼肌卫星细胞分离培养及鉴定被引量:7
《中国畜牧兽医》2011年第2期80-83,共4页郑素月 樊宝良 张庆桥 
河北省自然科学基金(C2008000713);国家863计划项目(2007AA100504)
采用组织块分离法从蛋鸡鸡胚腿部肌肉组织中体外培养获取鸡骨骼肌卫星细胞,对培养的细胞进行了传代、冻存和复苏研究,同时从分子表达水平对分离培养的卫星细胞进行了鉴定,建立了一套鸡骨骼肌卫星细胞分离、传代、冻存和复苏的方法。特...
关键词:蛋鸡 骨骼肌 卫星细胞 培养 鉴定 
鸡X期胚盘细胞电转染外源基因条件的探索被引量:4
《中国畜牧杂志》2010年第23期15-20,共6页杨海燕 孙敏 田智泉 任丽伟 秦玉蓉 许峰 李碧春 
国家自然科学基金(30671509;30871791);江苏省高校自然科学重大基础研究项目(08KJA230001);国家高新技术"863"项目(2007AA100504)
以EGFP为报告基因体外电穿孔转染鸡X期胚盘细胞,探讨适宜电转染条件以及影响鸡ES细胞存活率和转染率因素。分离鸡X期胚盘细胞进行培养、传代及鉴定,二代细胞设定不同的电压、脉冲时间、质粒浓度、细胞密度及孵育温度等条件转染。电击后1...
关键词:胚胎干(ES)细胞 电穿孔 PEGFP-N1  
鸡瘦素蛋白输卵管特异性表达载体的构建及其表达的研究被引量:1
《中国家禽》2010年第21期27-30,共4页阴彦辉 张振韬 高波 孙敏 许峰 秦玉蓉 李碧春 
国家高科技863项目(2007AA100504)
研究旨在利用生物反应器原理获得大量的、供实验研究的人瘦素蛋白。根据GenBank公布的人瘦素蛋白基因序列(登录号为NM000230)设计一对特异性引物,构建鸡输卵管瘦素特异性表达载体pOV3-OB,将重组质粒采用PEI包裹后翅静脉注射试验用鸡,收...
关键词:瘦素 克隆 暂态表达 生物反应器 
家蚕一个DDRGK超家族成员的克隆及分析
《浙江理工大学学报(自然科学版)》2010年第4期620-624,640,共6页宗志鹏 步翠玉 张耀洲 
国家863计划基金(2007AA100504);国家自然科学基金(30770279);国家863计划基金(2007AA021703)
DDRGK类蛋白是在动物及植物中发现的约有300个氨基酸残基的蛋白家族,含有一个高度保守的DDRGK基序,但功能还未知。在对家蚕幼虫cDNA文库的测序中发现了含有该保守结构域的EST序列,经过电子克隆、RT-PCR,获得该基因完整的cDNA序列,将其命...
关键词:家蚕 BmDDRGK基因 克隆 序列分析 实时定量PCR 
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