国家科技重大专项(2002AA2Z3451)

作品数：17被引量：54H指数：5
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相关作者：储炬张嗣良庄英萍刘建宁丁满生更多>>
相关机构：华东理工大学南京大学上海凯曼生物科技有限公司天津药物研究院更多>>
相关期刊：《中国生物制品学杂志》《微生物学通报》《南京大学学报（自然科学版）》《工业微生物》更多>>
相关主题：大肠杆菌毕赤酵母纯化RETEPLASE必特螺旋霉素更多>>
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甘油相控制策略对重组毕赤酵母表达瑞替普酶(reteplase)的影响被引量：1
《工业微生物》2007年第5期33-37,共5页方曙光 储炬 黄立 庄英萍 张嗣良 
国家"十五"高新技术发展计划(863计划)项目(2002AA217021);国家重大科技专项项目(2002AA2Z3451)
研究了甘油补料策略对毕赤酵母表达reteplase(rPA)的发酵过程中细胞的生长和rPA表达的影响。通过将对甘油补料速率由10g/L.h-1增大到20g/L.h-1,细胞比生长速率,甘油的比消耗速率,甘油得率等都得到极大提高。而且,诱导期细胞生长,甲醇消...
关键词：毕赤酵母 RETEPLASE 甘油 
温度对巴斯德毕赤酵母表达瑞替普酶(reteplase)的影响被引量：6
《工业微生物》2007年第4期11-15,共5页方曙光 储炬 黄立 庄英萍 张嗣良 
国家"十五"高新技术发展计划(863计划)项目(2002AA217021);国家重大科技专项项目(2002AA2Z3451)
研究了温度对巴斯德毕赤酵母表达瑞替普酶(reteplase,rPA)的影响。结果发现,在BMMY摇瓶培养条件下,诱导温度在20℃、25℃,rPA表达量较高,分别是30℃诱导条件下(18.2mg/L)的1.4倍和1.34倍。在高密度发酵过程中,降低诱导温度(20℃、25℃),...
关键词：毕赤酵母 RETEPLASE 降解 温度 
流式细胞仪检测重组毕赤酵母发酵过程中的细胞活性被引量：1
《华东理工大学学报（自然科学版）》2006年第9期1046-1049,共4页方曙光 黄立 储炬 庄英萍 张嗣良 
国家"十五"高新技术发展计划(863计划)项目(2002AA217021);国家重大科技专项项目(2002AA2Z3451)
建立了流式细胞仪检测重组巴斯德毕赤酵母(P.p astoris)细胞活性的方法,并在高密度发酵过程中得到应用。使用碘化丙锭染色法测定细胞活性,发现甲醇诱导时酵母细胞活性开始下降,随着细胞密度的增加,由于细胞胁迫和甲醇的影响,细胞活性明...
关键词：流式细胞仪 毕赤酵母 活细胞率 高密度发酵 
重组毕赤酵母表达reteplase发酵过程中的降解现象被引量：2
《华东理工大学学报（自然科学版）》2006年第12期1413-1417,共5页方曙光 储炬 黄立 庄英萍 张嗣良 
国家"十五"高新技术发展计划(863计划)项目(2002AA217021);国家重大科技专项项目(2002AA2Z3451)
研究了pH和温度对重组毕赤酵母表达retep lase(rPA)发酵过程中的降解现象。在低pH(4.5)诱导条件下,由于蛋白酶活性高,rPA降解严重,表达量几乎为0,提高诱导pH至6.5,蛋白酶活性降低,rPA的表达量最高达到122 m g/L。通过将诱导温度从30°C...
关键词：毕赤酵母 RETEPLASE 降解 发酵 
铵离子对必特螺旋霉素组分生物合成的调控作用被引量：5
《微生物学报》2006年第6期928-933,共6页陆原 李桢林 王永红 储炬 庄英萍 张嗣良 
国家"863计划"(2002AA217021);国家重大科技专项(2002AA2Z3451)~~
通过考察铵离子浓度对必特螺旋霉素组分的影响,证实低浓度铵离子的培养条件可以有效提高必特螺旋霉素中异戊酰螺旋霉素Ⅲ的比例。在此基础上进一步测定了高铵(62·5mmol/L)和低铵(2·5mmol/L)培养条件下的糖、铵离子、相关有机酸、缬氨...
关键词：必特螺旋霉素 铵离子 亮氨酸 组分 缬氨酸脱氢酶 
温度诱导模式对重组大肠杆菌质粒拷贝数的影响被引量：6
《华东理工大学学报（自然科学版）》2006年第1期33-37,共5页丁满生 马文峰 郭美锦 储炬 张嗣良 龚邦强 
国家高技术研究发展计划(863计划)资助(2002AA217021);国家重大科技专项基金资助(2002AA2Z3451)
对于大肠杆菌温度表达系统,温度的选择和变化对外源基因的表达至关重要,最直接的因素表现在对质粒拷贝数的影响上。本文通过重组大肠杆菌DH 5α表达载脂蛋白A I-M ilano来分析不同温度诱导模式对质粒拷贝数的影响,确立了二次升温诱导(30...
关键词：温度 诱导 质粒 拷贝数 大肠杆菌 
重组人载脂蛋白AI_(米兰变体)在大肠杆菌中的高效表达
《微生物学通报》2005年第4期107-111,共5页丁满生 马文峰 张梅芳 刘大涛 郭美锦 庄英萍 储炬 龚邦强 
国家高技术研究发展计划项目("863"项目)(No.2002AA217021);国家重大科技专项(No.2002AA2Z3451)
通过大肠杆菌表达系统来生产重组人载脂蛋白AIM(proapolipoprote in AIM,proapoAIM)。整个proapo AIM基因被分成两个片断,通过RT-PCR的方法合成。在对该基因的上游部分进行改造后,插入到表达载体pBV220中进行表达。蛋白的表达量达到45%...
关键词：载脂蛋白AI MILANO 包涵体 疏水柱 复性 
两次诱导实现重组大肠杆菌高密度、高表达研究被引量：2
《微生物学通报》2005年第2期54-59,共6页马文峰 庄英萍 郭美锦 丁满生 储炬 张嗣良 
国家高技术研究发展计划("863"计划)(No.2002AA217021);国家重大科技专项资助(No.2002AA2Z3451)
通过不同温度诱导模式对大肠杆菌高密度,高表达的研究,确定两次升温诱导模式实现大肠杆菌高密度、高表达重组人载脂蛋白的目的。实验证实两次诱导成功的避免了乙酸对高密度、高表达的影响,最终发酵的细胞密度OD600达150,蛋白表达量4.8g...
关键词：重组大肠杆菌 ApoA—IMilano 高密度 高表达 两次诱导 
Mn^(2+)对必特螺旋霉素产生菌代谢和必特螺旋霉素合成的影响被引量：11
《微生物学报》2005年第1期81-85,共5页康源 王永红 庄英萍 储炬 张嗣良 
国家"8 63计划"( 2 0 0 2AA2 170 2 1);国家重大科技专项 ( 2 0 0 2AA2Z3 45 1)~~
通过在必特螺旋霉素产生菌WSJ 1 195发酵过程中添加金属离子Mn2 + 发现 :发酵前期 (2 4h左右 )添加Mn2 + 可以明显提高生物效价 ,加入的Mn2 + 浓度以 5mmol L为最佳。实验显示添加Mn2 + 后发酵液pH逐渐下降 ,整个产素期间pH一直低于对...
关键词：锰离子 必特螺旋霉素 有机酸 代谢 WSJ-1-195菌株 发酵 生物合成 大环内酯类抗生素 
重组人载脂蛋白ApoA-I表达条件的优化被引量：2
《微生物学通报》2004年第6期27-32,共6页马文峰 丁满生 郭美锦 庄英萍 储炬 张嗣良 
国家高技术研究发展计划 ( 863计划 ) (No 2 0 0 2AA2 1 70 2 1 );国家重大科技专项资助 (No 2 0 0 2AA2Z3 45 1 )
对大肠杆菌DH5α发酵培养表达人载脂蛋白ApoA I的发酵条件进行了优化研究。结果表明 :将重组质粒pBV2 2 0 ApoA I转化不同的大肠杆菌宿主菌 ,筛选得高表达水平的E coliDH5α pBV2 2 0 ApoA I表达系统 ,摇瓶发酵表达率为 2 2 2 % ,BL2...
关键词：重组人载脂蛋白ApoA-I 大肠杆菌 优化 碳氮源比 
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