牛肠激酶

作品数：7被引量：13H指数：3
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理性设计改造牛肠激酶的热稳定性被引量：3
《中国生物工程杂志》2016年第8期46-54,共9页郭超 王志彦 甘一如 李丹 邓勇 于浩然 黄鹤 
国家自然科学基金(31470967);国家科技重大专项(2011ZX09201-301-05;2014ZX09508006-002-002)
以牛肠激酶作为研究对象,利用理性设计的方法提高其热稳定性。首先通过分子动力学模拟软件Gromacs v 4.5.5,Flex Service以及B-FITTER软件预测出了肠激酶的柔性区Fragment 64~69,Fragment 85~90;然后结合β-转角序列统计学信息以及引入...
关键词：肠激酶 热稳定性 理性设计 脯氨酸 β-转角 
牛肠激酶轻链基因的构建与原核表达被引量：1
《辽宁大学学报（自然科学版）》2012年第1期12-14,共3页吕永通 李文燕 杨帆 赵小慧 胡风庆 回晶 
肠激酶作为一种丝氨酸蛋白酶,能够识别顺序-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,水解赖氨酸C端的肽键.根据NCBI中牛肠激酶基因序列(L19663)设计18条引物,通过重叠延伸拼接PCR技术(SOE-PCR)扩增两端带有酶切位点的牛肠激酶轻链基因.构建表达载体pET32a-...
关键词：肠激酶 表达 纯化 
利用油体蛋白体外重组技术实现牛肠激酶固定化应用
《湖北农业科学》2011年第4期849-853,共5页董立强 李梅 张燕燕 孙文丽 陈红漫 刘昱辉 
国家"863"计划项目(2007AA100503)
为研究利用油体蛋白体外重组技术实现肠激酶固定化应用的可行性,利用油体蛋白Oleosin、自剪切蛋白Intein和人工合成的牛肠激酶轻链(Enterokinase,EK)cDNA,分别构建表达盒Intein-oleosin-EK和Intein-EK,插入毕赤酵母表达载体pPIC9K,转化...
关键词：油体蛋白 人工油体 肠激酶 固定化酶 
效应物对牛肠激酶活性的影响被引量：2
《厦门大学学报（自然科学版）》2009年第5期725-728,共4页郑丽钦 杨美花 潘志针 王秋红 孙黎 陈清西 
福建省重点科技项目(2007N0051);细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室开发课题(2009103)资助
肠激酶(EK,EC3.4.21.9)是一种在基因工程产品中广泛应用的工具酶.以小分子荧光物质甘氨酰-天冬氨酰-天冬氨酰-天冬氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-β-萘胺(Gly-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-β-naphthylamide,GD4K-β-naphthylamide)为底物,采用荧光跟踪...
关键词：L-赖氨酸 牛肠激酶 动力学 抑制作用 
牛肠激酶基因工程菌的构建、高密度发酵、纯化及活性鉴定被引量：5
《应用与环境生物学报》2006年第6期819-823,共5页李德华 苟兴华 胡海洋 徐琦 刘忠荣 吴洽庆 余晓东 
国家"863"计划项目(2001AA215401)~~
肠激酶(enterokinase,EK)是一种专一识别DDDDK氨基酸序列、并水解K后肽键的丝氨酸蛋白水解酶.根据GenBank序列进行人工合成牛肠激酶轻链基因cDNA,测序正确后将其插入甲醇酵母分泌型载体pPICZαA,得到重组质粒pPICZαA/EKL,重组载体经线...
关键词：肠激酶(enterokinase EK) 甲醇酵母(Pichia pastoris) 高密度发酵 
利用his-tag纯化和复性基因工程产物肠激酶被引量：2
《食品与生物技术学报》2006年第6期18-22,共5页顾玮彦 黄磊 徐志南 岑沛霖 
国家自然科学基金项目(30370039)
构建了融合表达肠激酶轻链（EKLC）的基因工程大肠杆菌，将该菌于37℃在含30mg／L卡那霉素的LB培养基中培养，当细胞密度（OD600）达到0．5～0．6时加入最终浓度为0．4mmol／L的IPTG并降温至26℃进行诱导表达，4h后目的蛋白质的表达量...
关键词：牛肠激酶 纯化 复性 
牛肠激酶次特异性识别序列分析被引量：3
《安徽农业科学》2003年第5期708-709,712,共3页查向东 孔小卫 周立志 
在酶切融合蛋白时 ,除正常切割和非特异性切割以外 ,发现了牛肠激酶的一个可能的次特异性识别序列。分析了其产生的原因以及在基因工程研究中的意义。
关键词：牛肠激酶 非特异性切割 次特异性切割 
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