RED重组

作品数:124被引量:318H指数:10
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λ-Red重组技术结合复合诱变提高大肠杆菌L-异亮氨酸合成能力
《食品工业科技》2025年第2期167-174,共8页汪吉鹏 朱滕滕 刘璐 马铖 魏晓博 刘慧燕 方海田 
宁夏自然科学基金项目(2020AAC03100);银川市科技计划项目(2023NYHZC01,2024NYHZC002)。
本研究旨在通过λ-Red重组技术结合复合诱变方法提高大肠杆菌L-异亮氨酸合成能力。以E. coli NXA为出发菌株,首先采用λ-Red同源重组敲除编码支链氨基酸转运蛋白基因brnQ,获得突变菌株E. coli NXA1。然后将E. coli NXA1经常温常压等离子...
关键词:大肠杆菌 λ-Red重组技术 brnQ基因 复合诱变 发酵 L-异亮氨酸 
一种利用λRed重组技术在杀鱼爱德华氏菌基因组添加标签的方法
《水生生物学报》2023年第6期895-902,共8页张淑雅 李端友 刘莹莉 贺甜甜 聂品 谢海侠 
国家自然科学基金(32073018和32202992);淡水生态与生物技术国家重点实验室项目(2022FBZ03)资助。
在杀鱼爱德华氏菌病原学研究中,在动物中制备杀鱼爱德华氏菌蛋白抗体耗时长,且获得的多克隆或多肽抗体在宿主细胞中特异性差,背景信号强。为解决这一问题,对在大肠杆菌(Escherichia coli)和沙门氏菌(Salmonella)中建立起来的λRed基因...
关键词:λRed重组 基因组基因标签序列添加 pKD46-flp 杀鱼爱德华氏菌 
肠炎沙门菌greB基因缺失株构建及其生物学特性初步研究被引量:3
《中国人兽共患病学报》2023年第4期325-332,共8页蔡梦雷 姜婷婷 吴村 刘东海 焦晓丽 张凯迪 荣丽娟 王俊 崔国林 
河北省自然科学基金项目(No.C2019402120);河北省高等学校科学技术研究项目(No.QN2019015);嘉兴职业技术学院人才启动基金专项(No.20407030086)。
目的研究旨在探究转录延长因子GreB对肠炎沙门菌致病力相关生物表型的影响。方法以肠炎沙门菌ATCC13076为亲本株,利用λ-Red重组系统构建ΔgreB基因缺失株及其回补株,测定肠炎沙门菌及其衍生菌在多种抑菌环境中生存能力、对细胞感染能...
关键词:肠炎沙门菌 greB基因 λ-Red重组系统 生物学特性 RNA-seq 
大肠杆菌诺氟沙星超敏感多基因敲除株KYAH06构建与功能验证
《东北农业大学学报》2023年第2期49-55,86,共8页姜巨全 宋阳 Heba Abdel-Motaal 邹俏 
国家自然科学基金项目(32070031,31770051)。
以E.coli DH5α为出发菌株采用pKD46质粒提供λRed重组系统完成以下三步基因敲除:大肠杆菌中RND超家族多药物抗性蛋白acrAB基因并借助其与pKD3质粒的氯霉素抗性片段同源重组被敲除;大肠杆菌中MATE家族多药物抗性蛋白ydhE基因通过卡那霉...
关键词:诺氟沙星 λRed重组系统 多药物逆向转运蛋白 AcrAB YdhE MdtH 
大肠杆菌Zn2+敏感突变株构建及其功能验证
《微生物学通报》2022年第7期2538-2549,共12页王玉婷 徐桐 华贝杰 姜巨全 
国家自然科学基金(32070031,31770051)。
【背景】Zn^(2+)在细胞解毒及许多生理过程中发挥着关键作用,Zn^(2+)转运蛋白已逐渐引起人们的重视。在大肠杆菌中,zntA和zitB是2个外排Zn^(2+)的关键基因。【目的】构建大肠杆菌Zn^(2+)敏感突变株,并对其功能进行验证。【方法】以Esche...
关键词:基因敲除 λRed重组 Zn2+转运蛋白 zntA zitB 
鼠伤寒沙门菌spvBC基因编辑株的构建被引量:1
《生物技术通报》2021年第2期253-260,共8页左玲莉 周丽婷 吴兴旗 吴超逸 吴淑燕 
国家自然科学基金面上项目(81671976,31970132)。
利用λRed重组系统和pBAD原核表达载体构建鼠伤寒沙门菌spvBC质粒毒力基因修饰菌株,为深入探究沙门菌毒力基因spv的功能和致病机制及宿主抗感染免疫提供工具菌。以pKD4为模板,PCR扩增含spvBC同源臂的卡那霉素抗性基因以构建同源打靶片段...
关键词:鼠伤寒沙门菌 spvBC基因 λRed重组系统 基因编辑 
禽致病性大肠杆菌luxS和rbsC双基因缺失株的构建及其生物特性分析被引量:1
《中国动物传染病学报》2021年第1期9-15,共7页涂春田 左佳坤 蒋蔚 陈兆国 米荣升 黄燕 韩先干 汪洋 
上海市科学技术委员会科研计划项目(17140900400,18140900700);中央级公益性科研院所基本科研业务费(2019JB01);国家自然科学基金项目(31872843,31572546,31772707)。
禽致病性大肠杆菌(APEC)能引起家禽严重的呼吸系统和全身性疾病,由于APEC耐药菌株的不断出现迫使新型抗菌方式的研发迫在眉睫。本研究旨在评价APEC的luxS和rbsC双缺失的突变株作为减毒疫苗候选株的潜力,通过在APEC分离株DE17的单基因缺...
关键词:禽致病性大肠杆菌 rbsC基因 RED重组 半数致死量 
肠出血型大肠埃希菌O157:H7 espG基因缺失株的构建及其生物学特性分析被引量:1
《中国病原生物学杂志》2020年第10期1144-1150,共7页延凯娜 王湘雨 万成松 
广东省自然科学基金-重点项目(No.2018B030311063)。
目的利用λRed重组系统构建肠出血型大肠埃希菌O157:H7 espG基因缺失株,并研究其生物特性,对EspG蛋白进行初步生物信息学分析。方法设计并合成一对同源臂引物,每条引物5’端与espG基因同源,3’端与卡那霉素抗性基因同源,扩增卡那霉素抗...
关键词:肠出血型大肠埃希菌O157:H7 espG基因 λRed重组系统 B细胞表位 生物信息学 
肠炎沙门氏菌yjeA基因缺失株的构建及其生物学功能测定被引量:2
《北京农学院学报》2020年第2期16-20,共5页曹莉 孙路 孔梓安 吴竹青 别鹏飞 王真 
北京市优秀人才培养资助项目(胞内寄生病原菌抗菌肽耐受与持续性感染相关性研究,2017000026833ZK18);2019年北京市属高校高水平教师队伍建设支持计划——青年拔尖人才培育计划项目(CIT&TCD201904052);北京农学院学位与研究生教育改革与发展项目。
【目的】为了研究yjeA基因的缺失肠炎沙门氏菌的生物学特性和毒力的影响。【方法】以肠炎沙门氏菌为亲本菌株,构建沙门氏菌yjeA基因缺失株,并对其生物学特性进行研究。【结果】利用Red重组系统成功构建沙门氏菌yjeA基因缺失株,进一步生...
关键词:肠炎沙门氏菌 yjeA RED重组系统 毒力 免疫原性 
一种检测生活饮用水和污水中生物有效性铜离子的微生物报告菌株的构建被引量:1
《温州医科大学学报》2020年第5期345-355,共11页周怀彬 王娟娟 赵建国 洪旭芬 庞一林 李江辉 谭国强 
国家自然科学基金资助项目(81500440);国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2014AA06A514)。
目的:构建一种能够检测生活饮用水和污水中生物有效性铜离子的微生物报告菌株。方法:首先采用交叉PCR将增强型绿色荧光蛋白与铜离子“外排泵”基因copA的启动子融合构建响应铜离子的CopAp::gfpmut2-pET28a感应元件。然后利用Red重组系...
关键词:大肠杆菌全细胞报告菌株 铜离子检测 增强型绿色荧光蛋白 RED重组系统 
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