T载体

作品数:124被引量:237H指数:7
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T载体表达蛋白的分子生物学综合实验设计
《生物学杂志》2022年第1期123-126,共4页戴谷 陶年娇 朱丹 石力 
江苏第二师范学院教学改革研究课题项目(JSSNUJXGG2017YB09)。
为弥补传统分子生物学实验中α-互补法筛选重组子以及蛋白质的原核诱导表达两项实验相对独立、缺乏连续的不足,探索通过设计基因克隆和蛋白表达一体化的综合性实验,以强化学生对阅读框的认识。分子生物学实验中的综合性实验设计拓展了...
关键词:分子生物学 实验教学 T载体 载体构建 蛋白表达 
酵母高效克隆表达T载体pYES2-T的构建及应用
《基因组学与应用生物学》2020年第6期2607-2613,共7页曹雪松 曹高燚 武俊杰 詹瑶 丁博 李明 谢晓东 
国家自然科学基金(31671611和31801446);天津市高校创新团队和天津市农委项目(TJNWY2017008)共同资助。
为了在酵母中高通量、高效率地对外源基因进行克隆和表达,本研究以酵母表达载体pYES2为基础,构建高效克隆表达T载体。pYES2是酿酒酵母的一种高效表达载体,在其多克隆位点处设计插入XcmⅠ-Intron-XcmⅠ片段,同时将其载体中URA3基因中原有...
关键词:酿酒酵母 表达T载体 载体构建 
基于Eam1105Ⅰ酶切的p18K-T载体的构建
《分子植物育种》2019年第11期3579-3584,共6页周天顺 余东 董皓 孙志忠 孙学武 谭炎宁 盛夏冰 段美娟 袁定阳 
国家重点研发计划(2016YFD0101100);国家高技术研究发展计划(863计划)(2014AA10A604);湖南省农业科学院科技创新项目(2017ZD02);国家自然科学基金面上项目(3167166)共同资助
TA克隆是PCR产物克隆最简单的方法,而T载体的改良对提高TA克隆效率、简化克隆片段后续的酶切、连接等实验步骤有着十分重要的意义。本研究以pMD18-T载体为基础,将原有的氨苄青霉素抗性筛选标记基因替换成卡那霉素抗性筛选标记基因,克服...
关键词:TA克隆 pMD18-T载体 p18K-T载体 Eam1105Ⅰ限制性核酸内切酶 
巨噬细胞特异性表达载体的构建及鉴定
《医学研究杂志》2018年第11期29-32,共4页李晓缘 尹洪超 
国家自然科学基金资助项目(81670430)
目的构建巨噬细胞特异性白喉毒素受体过表达载体并检测其在巨噬细胞中的表达情况。方法将白喉毒素受体基因Hbegf克隆入pc DNA3. 1载体中扩增Hbegf与BGHpoly A尾片段,与克隆入p UCm-T载体中的巨噬细胞特异性启动子相连接,分别转染巨噬细...
关键词:pUCm—T载体 pcDNA3.1载体 人白喉毒素受体 细胞凋亡 动脉粥样硬化 
T载体介导的基于attL核心区LR反应的简化快速Gateway克隆系统(英文)被引量:1
《中国生物化学与分子生物学报》2018年第3期341-350,共10页朱晓博 张贵粉 王友梅 Staffan Persson 谢国生 王令强 
Supported by Fundamental Research Funds for the Central Universities of China(No.2662015PY009); National Natural Science Foundation of China(No.31171775,No.31171524 and No.31371550)
Gateway克隆技术已得到广泛的应用。该技术先通过BP反应将目标片段连到带有完整attL特异识别位点的入门载体,然后与终载体通过LR反应得到表达载体。Gateway克隆方法与传统的酶切连接方法相比有快速简单等优点。但是,BP和LR酶都非常昂贵...
关键词:Gateway克隆技术 直接LR反应 序列比对 特异位点 
一种lacZ报告基因T载体的构建及其在沙门氏菌鞭毛主调控基因flhDC表达活性测定中的应用被引量:4
《中国预防兽医学报》2017年第9期711-716,共6页刘蕾 李永霞 刘金泽 王明晓 余旭平 
国家自然科学基金(31272582;30571380)
为研究5'-非翻译区(UTR)对沙门氏菌鞭毛主调控基因flhDC表达的影响,本研究以鼠伤寒沙门氏菌542(STM542)基因组DNA为模板,扩增含不同长度5'-UTR的flhDC全长基因(共5种),并将其克隆至含阿拉伯糖启动子的质粒PBAD33中。通过测定含阿拉伯糖...
关键词:flhDC基因 鞭毛 lacZ报告基因 T载体 
一种PCR产物克隆零背景T载体的构建
《福建农业学报》2017年第3期312-316,共5页吕新 陈丽华 方志鹏 李晓琳 李玥仁 
福建省科技计划项目--省属公益类科研院所基本科研专项(2015R1025-1);福建省农业科学院科技创新团队PI项目(2016PI-18)
为解决平末端加T法构建的T载体,在PCR产物克隆时连接效率低、阳性克隆筛选困难的问题,本研究在利用Taq DNA聚合酶末端转移酶活性对线性化平末端pBluescript SK(+)载体3′-端进行加T反应后,使用T4DNA连接酶处理加T后pBS载体,使3′-端未加...
关键词:PCR产物克隆 零背景 T载体 
基于XcmⅠ的T载体及其在合成生物学中的应用
《生物工程学报》2016年第7期956-965,共10页段仰凯 梁飞燕 谈晓明 吕雪峰 
山东省自然科学基金(No.ZR2013CQ045)资助~~
为了节约成本和提高实验效率,以商用p MD18-T载体为基础,构建获得了p FL-XS-T载体,其具有符合Biobrick标准的串联XbaⅠ-XcmⅠ-XcmⅠ-SpeⅠ克隆序列,通过对XcmⅠ的酶切处理即可以通过TA克隆方便地克隆PCR片段。克隆验证实验结果表明,经Xc...
关键词:Biobrick标准 TA克隆 合成生物学 
PI3K-AKT通路对脑缺血损伤神经干细胞的增殖作用被引量:17
《中国康复医学杂志》2016年第2期154-159,共6页崔晓萍 陈建梅 穆军山 叶建新 林敏 赵文龙 翁婧 林航 
南京军区医药卫生科研基金(12MA100)
目的:利用低氧干预分离的小鼠神经干细胞,通过构建腺病毒载体将腺病毒5-丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶3(Ad5-AKT3)基因和丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶3小干扰RNA(AKT3 si RNA)干扰转染至缺血神经干细胞,探索磷酸肌醇三磷酸激酶-丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶...
关键词:PI3K-AKT信号通路 神经干细胞 腺病毒AKT载体 AKT干扰 
基于XcmI识别序列的T载体的构建及连接PCR片段的优化被引量:3
《中国应用生理学杂志》2016年第1期46-50,共5页张峄桥 张雁芳 龙超良 李春悦 龙学辉 崔文玉 张浩 汪海 
国家重点基础研究发展计划资助(973计划)(2012CB518200)
目的:构建基于Xcm I识别序列的T载体并对与其连接的PCR片段进行优化。方法:首先将5’和3’端含有Xcm I识别序列的人组蛋白H4 c DNA定向克隆至p CDNA3.0表达载体中,再用Xcm I酶切得到基于p CDNA3.0载体骨架的T载体,为提高T载体与DNA片段...
关键词:XcmI T载体 磷酸化 d ATP 
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