易错PCR

作品数：113被引量：249H指数：8
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枯草芽孢杆菌脂肪酶基因lipaseA突变文库构建及其生物柴油转酯研究被引量：2
《浙江农业学报》2016年第5期864-869,共6页李璟 童晋 罗明银 黎宸位 鲜洁 
四川省教育厅科研项目(SZS013)
采用易错PCR方法对枯草芽孢杆菌脂肪酶基因lipase A进行定向进化,并首次采用对硝基苯棕榈酸酯(p NPP)法进行96孔板高通量筛选。结果表明:第一轮易错PCR没有产生随机突变,第二轮易错PCR反应在Mn^(2+)浓度为0.2 mmol·L^(-1)时,产生了突...
关键词：枯草芽孢杆菌 脂肪酶 易错PCR 对硝基苯棕榈酸酯 转酯效率 
易错PCR技术提高耐碱木聚糖酶基因xylBYG耐热性的研究被引量：2
《黑龙江畜牧兽医》2013年第2期1-4,166,共5页张雯 石丽娜 付宁 杨明明 龚月生 
国家自然科学基金项目(30871813)
为了研究耐碱木聚糖酶基因xylBYG耐热性,试验采用易错PCR技术对耐碱木聚糖酶基因xylBYG进行定向进化,经过2轮易错PCR产生突变基因产物,重组于表达载体pET-32a(+)中,并导入大肠杆菌BL21构建突变体文库。结果表明:经筛选获得了最佳突变菌...
关键词：木聚糖酶 易错PCR 最适作用温度 酶活 热稳定性 
大豆过氧化物酶基因随机突变文库的构建被引量：2
《大豆科学》2011年第5期731-737,共7页曾家豫 郑群 廖世奇 王黎 袁红霞 杨海棠 张丽琼 张宁 
甘肃省教育厅资助项目(0601-28,0501B-16);甘肃省自然科学基金资助项目(096RJZA035);甘肃省高分子材料重点实验室开放课题资助项目(KF-06-01)
为提高大豆过氧化物酶(soybean peroxidase,SBP)的活性及研究该酶一级结构与酶活性间的关系,采用连续易错PCR方法对大豆过氧化物酶基因(sbp)进行了2轮随机突变,将第二轮易错PCR产物与质粒载体pPICZα-A分别进行双酶切,经T4DNA连接酶催...
关键词：大豆过氧化物酶 易错PCR 基因文库 随机突变 酶定向进化 
基于易错PCR技术的中性内切葡聚糖酶基因的定向进化被引量：7
《农业生物技术学报》2011年第6期1136-1143,共8页姚友旭 李雨霏 侯晟琦 李春梅 陈惠 廖燕 
四川省科技支撑计划(No.2008GZ0150)资助
纤维素酶的工业应用一直受酶活性低,成本高的限制,为了提高中性内切葡聚糖酶的活性,本研究利用易错PCR技术对来自枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)C-36的内切葡聚糖酶基因进行定向进化研究,在酶分子水平上改造内切葡聚糖酶分子。实验获...
关键词：枯草芽胞杆菌 内切葡聚糖酶 定向进化 产酶条件 
基于易错PCR技术的黏质沙雷氏菌脂肪酶基因LipA的定向进化被引量：2
《生物技术通报》2011年第4期181-185,共5页陈英 朱绮霞 张搏 陈东 黄日波 
生产生物柴油共性关键技术的研发--生物柴油生产用共性脂肪酶的技术和工艺研究(桂科攻0895003-4-1)
利用易错PCR技术对黏质沙雷氏菌脂肪酶基因LipA进行定向进化,经过筛选最终获得一个比活力比野生酶提高了425 U/mg的突变体ep1,测序分析ep1有5个氨基酸发生了突变,与野生酶相比ep1的最适pH值由原来的8.5降低为7.5,Tm值提高3℃,Km值由原来...
关键词：黏质沙雷氏菌 脂肪酶 易错PCR 定向进化 
易错PCR对扩展青霉脂肪酶基因PEL的定向进化被引量：1
《安徽农学通报》2011年第5期22-24,共3页陈彦 司圣乾 刘燕雅 冯蔚宗 林琳 
国家自然科学基金资助项目(No.30270033);福建自然科学基金重点资助项目(No.BOI20001);福建自然科学基金资助项目(No.C0410009);福建省科技平台建设计划项目(No.2006H0085)
以带有野生型扩展青霉碱性脂肪酶cDNA全长的载体psk-lip07为模板,利用易错PCR技术以及高通量筛选,最终获得了一株最佳突变体GS-pPIC3.5K-lip07-ER04,其最适作用温度比野生型提高10℃,酶活提高了约22%,热稳定性Tm值也提高了3.28℃。基因...
关键词：扩展青霉脂肪酶 易错PCR 最适作用温度 酶活 热稳定性 
基于易错PCR技术的α-淀粉酶基因的定向进化研究被引量：2
《中国酿造》2010年第2期94-97,共4页张建云 谷立坤 陈红歌 
河南省科技厅科技攻关项目(092102210212)
采用基因体外定向进化策略中易错PCR技术,用碱基类似物5-溴脱氧尿苷三磷酸(5-BrdUTP)部分取代脱氧胸苷三磷酸(dTTP),对野油菜黄单胞菌的α-淀粉酶基因进行了体外诱变。通过鉴别培养基进行筛选,得到5个具有高酶活的诱变基因,利用生物学软...
关键词：定向进化 碱基类似物 诱变 Α-淀粉酶基因 
短小芽孢杆菌碱性蛋白酶基因的随机突变被引量：2
《应用与环境生物学报》2010年第1期96-99,共4页杨锦 冯红 万民远 焦惠科 张晓露 张义正 
国家高技术研究发展计划(No.2006AA02Z221)资助~~
碱性蛋白酶(DHAP)属于丝氨酸蛋白酶家族(S8A),是由275个氨基酸残基组成的单链多肽,没有二硫键,以Asp32、His64、Ser221作为活性中心.采用易错PCR方法,对短小芽孢杆菌碱性蛋白酶基因(GenBank登录号:AY458140)进行随机突变.在大肠杆菌中...
关键词：碱性蛋白酶 短小芽孢杆菌 定向进化 易错PCR 序列分析 基因表达 
基于易错PCR技术的短小芽孢杆菌YZ02脂肪酶基因BpL的定向进化被引量：21
《生物工程学报》2008年第3期445-451,共7页黄瑛 蔡勇 杨江科 闫云君 
国家十一五“863”计划(No.2006AA020203,No.2007AA05Z417);武汉市攻关计划(No.200720422138)~~
利用易错PCR技术对短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)YZ02脂肪酶基因BpL进行两轮定向进化研究,分别获得最佳突变株BpL1-7和BpL2-1369,其脂肪酶活力比出发酶分别提高了2倍和6倍。序列分析表明,突变体BpL2-1369有4个碱基发生了突变:T61C/C14...
关键词：短小芽胞杆菌 脂肪酶 定向进化 易错PCR 
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