施柯

作品数：14被引量：15H指数：2
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供职机构：第二军医大学更多>>
发文主题：GATA-3过敏性气道炎症哮喘钩端螺旋体基因克隆更多>>
发文领域：医药卫生更多>>
发文期刊：《中华微生物学和免疫学杂志》《中国呼吸与危重监护杂志》《上海医学》更多>>
所获基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
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卵清白蛋白特异性T辅助细胞1/T辅助细胞2细胞系的建立被引量：3
《上海医学》2005年第12期1000-1003,共4页修清玉 王桂芳 杨丹榕 施柯 黎怀星 孙树汉 
目的体外建立可长期培养的抗原特异性的T辅助细胞(Th)1/Th2克隆及细胞系,并分析其对抗原的反应情况及其产生细胞因子的情况。方法采用卵清白蛋白(OVA)免疫BALB/c小鼠,取淋巴结细胞在体外用同系脾细胞和OVA反复刺激,然后分别用白介素(IL...
关键词：Th1/Th2细胞系 克隆化培养 卵蛋白 
卡介苗基因组DNA对哮喘小鼠模型过敏性气道炎症的影响被引量：2
《中国呼吸与危重监护杂志》2005年第5期352-354,347,i0001,共5页商艳 李强 胡振林 施柯 周凤娟 刘忠令 孙树汉 
目的探讨腹腔注射卡介苗基因组DNA(BCGDNA)对哮喘小鼠模型的影响。方法BALB/c小鼠经鸡卵蛋白(OVA)免疫建立哮喘模型,分别于致敏前、激发时腹腔注射100μgBCGDNA,观察哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和嗜酸性粒细胞数(EOS),EL...
关键词：卡介苗 基因组DNA 哮喘 小鼠 动物模型 过敏性气道炎症 
表达ROG的重组腺相关病毒载体的构建及高滴度病毒的制备被引量：1
《第二军医大学学报》2005年第4期445-447,共3页王桂芳 施柯 杨丹榕 陈吉泉 修清玉 黎怀星 孙树汉 
国家自然科学基金(30170406).
目的:获得表达小鼠ROG(repressor of GATA 3)基因的重组腺相关病毒载体,制备表达ROG的重组腺相关病毒。方法:设计、合成引物,通过RT PCR法从CTLL 2细胞总RNA中扩增ROG基因,测序确认后,连接于pAAV MCS载体,双酶切、PCR鉴定重组病毒载体;...
关键词：REPRESSOR of GATA-3 重组腺相关病毒 哮喘 基因治疗 
高滴度表达抑制转录因子的重组腺相关病毒的制备
《上海医学》2004年第12期898-901,F005,共5页王桂芳 杨丹榕 修清玉 施柯 吴丹 黎怀星 孙树汉 
国家自然科学基金资助项目 (3 0 170 40 6)
目的　获得表达小鼠抑制转录因子ROG(repressorofGATA -3)基因 ;构建表达ROG的重组腺相关病毒载体 ,制备腺相关病毒。方法　设计、合成引物 ,通过逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)从CTLL- 2细胞总RNA中扩增ROG基因 ,测序成功后 ,最终连接于...
关键词：重组腺相关病毒 表达载体 小鼠 基因 转录因子 HELA细胞 高滴度 酶切 测序 总RNA 
BCG-DNA对哮喘患者外周血单个核细胞IFN-γ和IL-4产生的作用
《第二军医大学学报》2004年第7期718-720,共3页商艳 胡振林 李强 施柯 刘忠令 孙树汉 
国家高新技术发展规划 (" 863"计划 )课题( 2 0 0 1AA2 13 111)
目的 :研究免疫活性物质卡介苗基因组 DNA(BCG- DNA)对哮喘患者外周血单个核细胞 (PBMC) IFN- γ和 IL- 4产生的影响。 方法 :分离哮喘患者 PBMC,分别加入 BCG- DNA、地塞米松刺激培养 ,EL ISA检测培养上清中 IFN- γ及 IL- 4含量 ,RT- ...
关键词：BCG-DNA 哮喘 外周血 单个核细胞 IFN-R IL-4 
CpG-ODN气道内应用抑制哮喘小鼠过敏性气道炎症及GATA-3的表达被引量：6
《中华微生物学和免疫学杂志》2004年第7期540-544,共5页商艳 李强 胡振林 施柯 周凤娟 刘忠令 孙树汉 
目的　研究气道内应用CpG寡脱氧核苷酸 (CpG ODN)对小鼠哮喘模型气道过敏性炎症的治疗作用及对肺内GATA 3表达的影响。方法　鸡卵蛋白 (OVA)免疫BALB c小鼠建立哮喘模型 ,激发后 1h气道内滴入 10 0 μgCpG ODN ,处死动物后观察支气管...
关键词：CpG-ODN气道 哮喘 小鼠 过敏性气道炎症 GATA-3 基因表达 细胞因子 
钩端螺旋体鞭毛蛋白B(FlaB)基因flaB在大肠杆菌内的表达被引量：1
《中国人兽共患病杂志》2004年第3期180-182,共3页寇志华 张毅 郭瀛军 陈祖欢 施柯 孙树汉 
国家"8 63"计划资助项目 ( 2 0 0 1AA2 13 111)
目的　在大肠杆菌中高效表达钩端螺旋体内鞭毛蛋白 (FlaB)用于钩体病的诊断和预防。方法　将目的基因flaB定向克隆至原核表达载体 pGEX - 5T ,构建重组融合表达质粒 pGF ;Western -blot鉴定其特异性 ,ELISA法判定其用于钩体病诊断的可...
关键词：钩端螺旋体 鞭毛蛋白B 基因 flaB 大肠杆菌 表达 
phP53-luc质粒的构建及其用于检测化学物质遗传毒性的初步分析
《第二军医大学学报》2004年第3期277-279,共3页施柯 黎怀星 吴丹 李雅慧 孙树汉 
国家自然科学基金 (30 370 80 2 )
目的 :构建 2个分别由 p5 3基因启动子和核心启动子驱动的荧光素酶报告基因表达质粒 ,并探讨其用于检测遗传毒性化学物质的可行性。方法 :通过 PCR扩增人 p5 3基因启动子片段 ,然后采用重组 DNA技术克隆入 p GL3- BASIC的荧光素酶报告...
关键词：phP53—luc质粒 检测 化学物质遗传毒性 P53基因 5—氟尿嘧啶 
小鼠Retn基因siRNAs的设计及其稳定表达载体的构建被引量：1
《第二军医大学学报》2004年第2期136-139,共4页李雅慧 黎怀星 吴丹 施柯 蔡东联 孙树汉 
国家自然科学基金 ( 3 0 3 70 80 2 )
目的 :设计小鼠 Retn基因特异性的 si RNAs,并构建一系列能在哺乳动物细胞内稳定表达这些 si RNAs的表达质粒 ,以便为在体外研究 Retn基因的功能打下基础。 方法 :(1 )设计并合成小鼠 Retn基因特异性的一组寡核苷酸片段 ,并克隆到 p Sil...
关键词：小鼠 Retn基因 SIRNAS 设计 载体 基因表达 脂肪细胞 
乙肝DNA疫苗pVAX-PS对树鼩的免疫保护作用
《第二军医大学学报》2003年第10期1102-1104,共3页周凤娟 胡振林 戴建新 施柯 陈蕊雯 林懿 孙树汉 
国家"863"计划资助(2001AA213111).
目的:以树(鼠句)为实验对象研究乙肝DNA疫苗接种后所产生的免疫应答及对乙肝病毒攻击的保护作用。方法:以PCR法从adr亚型乙肝患者血清的病毒基因组中扩增含乙肝病毒的PreS2+S基因,插入pVAX1载体构建乙肝DNA疫苗pVAX-PS,并以此为候选疫苗...
关键词：乙型肝炎 DNA疫苗 pVAX—PS 树鼩 免疫保护作用 免疫应答 
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