来大志

作品数：13被引量：58H指数：4
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供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
发文主题：毕赤酵母CHO细胞基因表达分泌表达纯化更多>>
发文领域：生物学医药卫生更多>>
发文期刊：《免疫学杂志》《中华肝脏病杂志》《生物化学与生物物理进展》《中国生物工程杂志》更多>>
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人IFN-β启动子基因报告质粒的构建及SARS-CoV3a和7a蛋白对IFN-β诱生作用的初步研究被引量：1
《中国生物工程杂志》2006年第12期6-10,共5页徐春娥 付玲 侯丽华 翁少洁 来大志 李健民 于婷 于长明 陈薇 
中德科学基金资助项目(GZ239-202/12)
3a蛋白和7a蛋白是SARS-CoV的非结构蛋白,分别主要由SARS基因组中ORF3a和ORF7a所编码。在体内和体外感染病毒的细胞中均发现了有3a蛋白的表达。首先将pGL3-Control载体进行了改构,除去了SV40启动子基因,获得了pGL3-Enhancer载体,将获得的...
关键词：SARS-COV 3a蛋白7a蛋白 IFN-β启动子 荧光素酶报告系统 
适于无血清贴壁培养的抗凋亡宿主细胞系CHO-IVB2的构建被引量：4
《生物工程学报》2004年第5期745-749,共5页翁少洁 来大志 齐连权 于长明 付玲 陈薇 
应用无血清培养基培养CHO细胞时 ,由于没有血清提供各种贴壁因子 ,细胞以悬浮的方式生长。在实际的大规模细胞培养中 ,CHO细胞往往以贴壁方式培养 ,要么贴壁于悬浮的微载体中 ,要么贴壁于固定的聚酯盘状介质或中空纤维中 ,而很少直接悬...
关键词：CHO细胞 细胞工程 细胞凋亡 贴壁培养 无血清培养基 
复合干扰素在毕赤酵母中的分泌表达、纯化及活性分析被引量：3
《免疫学杂志》2004年第2期113-116,共4页于长明 齐连权 来大志 张晓鹏 孔毅荣 于婷 付玲 陈薇 
目的　在毕赤酵母中高效分泌表达复合干扰素。方法　根据毕赤酵母密码子偏性合成了复合干扰素基因 ,克隆至分泌型酵母表达载体pMEX9K ,线性化后转化毕赤酵母GS115 ,筛选高表达菌株。诱导后的培养上清经过离子交换 ,疏水层析 ,凝胶过滤...
关键词：复合干扰素 毕赤酵母 基因表达 
应用人延伸因子1α亚基启动子和人工转录激活因子提高外源基因在CHO细胞中的表达被引量：4
《生物化学与生物物理进展》2004年第2期118-126,共9页来大志 翁少洁 于长明 齐连权 付玲 于婷 陈薇 
表达载体的设计对于提高外源基因在哺乳动物细胞中的表达量十分重要 .而表达载体中最为重要的元件是启动子 .一些常用病毒来源的启动子 ,如巨细胞病毒即早期启动子 (PCMV IE)仅在S期激活 ,应用这类启动子表达外源蛋白需要宿主细胞不停增...
关键词：人工转录激活因子 人延伸因子1α亚基启动子 基因表达 cI蛋白 CHO细胞 
通过高表达Igf1/Bcl-2或Bcl-2/Cyclin E基因组合使CHO细胞适于在无蛋白培养基中抗凋亡培养被引量：4
《生物工程学报》2004年第1期66-72,共7页来大志 翁少洁 齐连权 于长明 付玲 于婷 陈薇 
哺乳动物细胞表达系统是生产重组蛋白药物最常用的表达系统。但在无蛋白培养基中 ,哺乳动物细胞生长活力差 ,且容易发生细胞凋亡 ,因而难以大规模培养。为解决此问题 ,应用双顺反子表达载体在CHO dhfr- 细胞中同时表达Igf 1 Bcl 2或Bcl ...
关键词：哺乳动物细胞表达系统 细胞培养 细胞凋亡 细胞周期 无蛋白培养基 
复合干扰素突变体在毕赤酵母中的表达、纯化及活性分析被引量：2
《中国生物化学与分子生物学报》2003年第3期317-320,共4页于长明 付玲 齐连权 张晓鹏 于婷 来大志 王海涛 陈薇 
根据毕赤酵母密码子偏性合成了复合干扰素突变体基因 ,克隆至分泌型酵母表达载体pMEX9K ,将重组载体pMEX CIFNm用SacⅠ线性化后 ,转化毕赤酵母GS115 .转化子经诱导后 ,培养上清有抗病毒活性的蛋白产生 .经过离子交换 ,疏水层析 ,凝胶过...
关键词：毕赤酵母 表达 纯化 活性 复合干扰素突变体基因 
用于生产重组蛋白药物的抗凋亡CHO宿主细胞株的建立被引量：6
《生物工程学报》2003年第3期322-326,共5页来大志 付玲 于长明 齐连权 翁少洁 于婷 王海涛 陈薇 
哺乳动物工程细胞在大规模培养生产重组蛋白时很容易发生细胞凋亡 ,从而导致生产过程提前终止 ,造成生产成本高昂。细胞代谢产物氨已被证明可以促进细胞凋亡 ,而线粒体膜整合蛋白Bcl 2可以通过促进线粒体膜完整性而抑制细胞凋亡。本实...
关键词：细胞凋亡 CHO细胞 谷氨酰胺合成酶 氨 重组蛋白药物 哺乳动物细胞 表达系统 
两个新型多拷贝毕赤酵母表达载体的构建被引量：4
《军事医学科学院院刊》2002年第4期264-266,共3页齐连权 陈薇 于长明 来大志 翁少洁 王海涛 
目的 :构建合适的载体用于外源基因在巴斯德毕赤酵母中的正确分泌表达。方法 :利用PCR技术 ,对已有载体pPIC9K进行改造 :在多克隆位点处增加一个NaeⅠ酶切位点 ;去除卡那霉素抗性基因中的一个XhoⅠ酶切位点。结果和结论 :成功地构建了pM...
关键词：巴斯德毕赤酵母 载体 基因表达 PCR 
毕赤酵母表达系统研究进展被引量：19
《中国生物工程杂志》2002年第6期45-47,共3页齐连权 陈薇 来大志 于长明 王海涛 
毕赤酵母表达系统是目前最为成功的外源蛋白表达系统之一。该表达系统不存在原核表达系统的内毒素难以除去的问题 ,也不存在哺乳动物细胞表达系统的病毒和支原体污染等问题 ;并能够对目的蛋白进行类似高等真核生物的信号肽剪切、二硫键...
关键词：毕赤酵母 表达系统 研究进展 
改造中国仓鼠卵巢细胞被引量：8
《生物工程学报》2002年第4期415-419,共5页来大志 齐连权 于长明 王海涛 陈薇 
与原核细胞、酵母细胞以及昆虫细胞相比 ,中国仓鼠卵巢细胞 (CHO)作为宿主细胞表达的外源蛋白最接近其天然构象 ,因而CHO细胞表达系统是生物工程制药最为理想的表达系统。但这种系统也存在诸多缺点。如在大规模培养中CHO细胞会面临着对...
关键词：改造 中国仓鼠卵巢细胞 CHO细胞 大规模培养 细胞凋亡 细胞黏附 细胞周期 
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