余磊

作品数:7被引量:13H指数:2
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供职机构:清华大学生命科学学院更多>>
发文主题:全细胞催化催化合成简单节杆菌脱氢酶定点突变更多>>
发文领域:生物学医药卫生理学化学工程更多>>
发文期刊:《生物技术通报》《现代生物医学进展》更多>>
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两种耐热磷酸化酶的构建及高效催化合成红景天苷被引量:1
《现代生物医学进展》2019年第10期1801-1806,共6页何聪芬 黄爱清 王巧娥 张贵友 余磊 王洪钟 
北京工商大学北京市植物资源研究开发重点实验室开放课题基金资助项目;国家自然科学基金项目(21476124)
目的:使用表达耐热蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌重组工程菌E. coli BL21/pET-Spase和耐热纤维二糖磷酸化酶的大肠杆菌重组工程菌E. coli BL21/pET-Cpase,发酵培养后粗酶液作为催化剂,以价格低廉的蔗糖为原料合成红景天苷。方法:分别构建耐热...
关键词:耐热蔗糖磷酸化酶 耐热纤维二糖磷酸化酶 红景天苷 
N-脱氧核糖转移酶Ⅱ催化合成克拉屈滨及其定向进化被引量:1
《现代生物医学进展》2019年第3期401-405,共5页李京美 李骥璇 余磊 郑桂兰 王洪钟 
国家自然科学基金项目(21476124)
目的:使用表达N-脱氧核糖转移酶Ⅱ (Nucleoside deoxyribose transferase, NDT)的大肠杆菌重组工程菌E.coli BL21/pET-NDT,作为催化剂,合成克拉屈滨(Cladribine)。同时构建高通量的酶活筛选体系,利用其改造NDT,以期提高克拉屈滨的合成...
关键词:N-脱氧核糖转移酶 克拉屈滨 高通量筛选 
S-亚胺还原酶和葡萄糖脱氢酶共表达系统的构建及手性胺的合成被引量:1
《生物技术通报》2019年第1期105-111,共7页李骥璇 余磊 李京美 郑桂兰 王洪钟 
国家自然科学基金项目(21476124)
旨在构建S-亚胺还原酶(S-IRED)和葡萄糖脱氢酶(GDH)在大肠杆菌中的一菌双酶共表达系统,实现辅酶NADPH的再生,高效合成手性仲胺。利用无缝克隆的手段设计构建一种单质粒双启动子共表达系统,以全细胞为催化剂催化手性仲胺S-2-甲基吡咯烷(S...
关键词:亚胺还原酶 葡萄糖脱氢酶 共表达 手性胺 
3β-羟基类固醇脱氢酶基因的克隆表达及其性质研究
《现代生物医学进展》2018年第2期201-204,225,共5页赵晓雅 李婕 余磊 郑桂兰 王洪钟 
国家自然科学基金项目(21476124)
目的:构建3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)异源表达系统,进一步探究其酶学性质。方法:通过分子生物学方法克隆来源于Mycobacterium neoaurum菌株的3β-羟基类固醇基因,构建重组质粒,运用HPLC方法检测酶反应体系的产物。结果:本实验构建...
关键词:3β-羟基类固醇脱氢酶 类固醇 酶活性 
简单节杆菌3-甾酮-△~1-脱氢酶基因的克隆表达及定点突变研究被引量:3
《现代生物医学进展》2017年第25期4801-4806,共6页李婕 余磊 赵晓雅 郑桂兰 王洪钟 
国家自然科学基金项目(21476124)
目的:将来源于简单节杆菌的3-甾酮-△~1-脱氢酶(3-ketosteroid-Delta(1)-dehydrogenase,KSDD)在大肠杆菌中进行表达,获得具有活性的脱氢酶;利用计算机预测KSDD的三级结构,并通过定点突变确定酶的关键位点以期优化脱氢酶的活性及性质。方...
关键词:3-甾酮-△^1-脱氢酶 简单节杆菌 同源建模 定点突变 
蔗糖磷酸化酶全细胞催化AA-2G的条件优化被引量:6
《现代生物医学进展》2017年第14期2601-2605,共5页余磊 李骥璇 王忆茗 郑桂兰 王洪钟 
国家自然科学基金项目(21476124)
目的:使用表达蔗糖磷酸化酶(EC 2.4.1.7,Sucrose phosphorylase,SPase)的大肠杆菌重组工程菌E.coli BL21/pET-spase,作为全细胞催化剂,合成2-O-D-吡喃葡糖基-L-抗坏血酸(Ascorbic acid 2-glucoside,AA-2G)。通过反应条件的优化研究,提高...
关键词:蔗糖磷酸化酶 AA-2G 全细胞催化 
基于酵母表面展示技术的胸苷磷酸化酶全细胞催化剂的构建被引量:2
《生物技术通报》2016年第1期201-206,共6页王洁 余磊 杨东 李婕 王洪钟 
国家自然科学基金项目(21176138;21476124)
胸苷磷酸化酶(TP)在核苷类代谢通路中发挥重要作用,可催化生成多种核苷类似物。构建了TP的酵母表面展示系统作为全细胞催化剂。从大肠杆菌K12菌株中克隆编码TP的deo A基因,利用酵母表达质粒p KFS构建重组质粒,电击转化毕赤酵母GS115菌...
关键词:胸苷磷酸化酶 全细胞催化 毕赤酵母 表面展示 
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