郑桂兰

作品数:16被引量:86H指数:6
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供职机构:清华大学生命科学学院更多>>
发文主题:脱氧核糖转移酶发酵微生物转化N-更多>>
发文领域:生物学医药卫生化学工程理学更多>>
发文期刊:《现代生物医学进展》《中国中药杂志》《生物技术》《中国海洋药物》更多>>
所获基金:国家自然科学基金国家基础科学人才培养基金云南省省院省校合作项目国家教育部博士点基金更多>>
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N-脱氧核糖转移酶Ⅱ催化合成克拉屈滨及其定向进化被引量:1
《现代生物医学进展》2019年第3期401-405,共5页李京美 李骥璇 余磊 郑桂兰 王洪钟 
国家自然科学基金项目(21476124)
目的:使用表达N-脱氧核糖转移酶Ⅱ (Nucleoside deoxyribose transferase, NDT)的大肠杆菌重组工程菌E.coli BL21/pET-NDT,作为催化剂,合成克拉屈滨(Cladribine)。同时构建高通量的酶活筛选体系,利用其改造NDT,以期提高克拉屈滨的合成...
关键词:N-脱氧核糖转移酶 克拉屈滨 高通量筛选 
S-亚胺还原酶和葡萄糖脱氢酶共表达系统的构建及手性胺的合成被引量:1
《生物技术通报》2019年第1期105-111,共7页李骥璇 余磊 李京美 郑桂兰 王洪钟 
国家自然科学基金项目(21476124)
旨在构建S-亚胺还原酶(S-IRED)和葡萄糖脱氢酶(GDH)在大肠杆菌中的一菌双酶共表达系统,实现辅酶NADPH的再生,高效合成手性仲胺。利用无缝克隆的手段设计构建一种单质粒双启动子共表达系统,以全细胞为催化剂催化手性仲胺S-2-甲基吡咯烷(S...
关键词:亚胺还原酶 葡萄糖脱氢酶 共表达 手性胺 
3β-羟基类固醇脱氢酶基因的克隆表达及其性质研究
《现代生物医学进展》2018年第2期201-204,225,共5页赵晓雅 李婕 余磊 郑桂兰 王洪钟 
国家自然科学基金项目(21476124)
目的:构建3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)异源表达系统,进一步探究其酶学性质。方法:通过分子生物学方法克隆来源于Mycobacterium neoaurum菌株的3β-羟基类固醇基因,构建重组质粒,运用HPLC方法检测酶反应体系的产物。结果:本实验构建...
关键词:3β-羟基类固醇脱氢酶 类固醇 酶活性 
简单节杆菌3-甾酮-△~1-脱氢酶基因的克隆表达及定点突变研究被引量:3
《现代生物医学进展》2017年第25期4801-4806,共6页李婕 余磊 赵晓雅 郑桂兰 王洪钟 
国家自然科学基金项目(21476124)
目的:将来源于简单节杆菌的3-甾酮-△~1-脱氢酶(3-ketosteroid-Delta(1)-dehydrogenase,KSDD)在大肠杆菌中进行表达,获得具有活性的脱氢酶;利用计算机预测KSDD的三级结构,并通过定点突变确定酶的关键位点以期优化脱氢酶的活性及性质。方...
关键词:3-甾酮-△^1-脱氢酶 简单节杆菌 同源建模 定点突变 
蔗糖磷酸化酶全细胞催化AA-2G的条件优化被引量:6
《现代生物医学进展》2017年第14期2601-2605,共5页余磊 李骥璇 王忆茗 郑桂兰 王洪钟 
国家自然科学基金项目(21476124)
目的:使用表达蔗糖磷酸化酶(EC 2.4.1.7,Sucrose phosphorylase,SPase)的大肠杆菌重组工程菌E.coli BL21/pET-spase,作为全细胞催化剂,合成2-O-D-吡喃葡糖基-L-抗坏血酸(Ascorbic acid 2-glucoside,AA-2G)。通过反应条件的优化研究,提高...
关键词:蔗糖磷酸化酶 AA-2G 全细胞催化 
自诱导系统在酶促合成2’-脱氧胞苷中的应用被引量:7
《生物技术通报》2014年第11期225-232,共8页王玺 段胜林 熊舒莉 郑桂兰 张贵友 王洪钟 
国家自然科学基金项目(21176138);国家自然科学基金国家基础科学人才培养基金项目(J1103506;J1030622;J1310020)
旨在高效合成2’-脱氧胞苷(d Cyd)。DCyd作为一类重要的药物中间体,能够用于合成吉西他滨(d Fd C)、扎西他滨(dd C)等多种抗病毒或抗肿瘤的药物。采用ZYM-Fe-5052自诱导培养基对含有N-脱氧核糖转移酶II(NDT)的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导...
关键词:生物催化 N-脱氧核糖转移酶 2’-脱氧胞苷 自诱导系统 核苷类似物 
无定形碳酸钙结合蛋白对鼠前成骨细胞MC3T3-E1碱性磷酸酶活性的影响被引量:1
《广东海洋大学学报》2012年第3期13-18,共6页万翔 孙娟 苏境坦 梁晓 张文权 郑桂兰 谢莉萍 王洪钟 张贵友 杜晓东 张荣庆 
国家自然科学基金(40876068);教育部博士学科点专项科研基金(20090002110055)
以MC3T3-E1细胞系为实验材料,探讨了真核表达的重组蛋白rACCBP对成骨细胞的作用。结果表明:rACCBP对MC3T3-E1的分化具有抑制作用,用含有0.001 g/mL rACCBP的DMEM培养液,培养8 d后细胞的ALP活性仅为7.187 U/mg,远低于参照的11.917 U/mg;r...
关键词:生物矿化 rACCBP MC3T3-E1 碱性磷酸酶 抗坏血酸 地塞米松 
生物转化法合成16α-羟基泼尼松龙的发酵工艺研究被引量:6
《生物技术》2012年第3期81-86,共6页张文权 崔励 郑桂兰 熊舒莉 王玺 王洪钟 
国家自然科学基金项目(No.20876088;No.21176138)资助
目的:研究1株玫瑰产色链霉菌(Streptomyces roseochromogenes)的发酵培养基和底物转化条件,以提高16α-羟基泼尼松龙的转化率。方法:采用紫外与氯化锂复合诱变获得目的菌株TS-58,利用正交实验等方法考查摇瓶发酵条件,研究不同浓度的碳...
关键词:玫瑰产色链霉菌 泼尼松龙 生物转化 羟化反应 
乙酰微小杆菌生物合成5-甲基尿苷的研究被引量:2
《广东海洋大学学报》2011年第4期30-36,共7页上官俊龙 苏境坦 郑桂兰 张文权 张贵友 谢莉萍 王洪钟 
国家自然科学基金(40876068;21176138);国家基础科学人才培养基金(J1030622)
用乙酰微小杆菌(Exiguobacterium acetylicum)完整细胞作为酶源,催化鸟苷和胸腺嘧啶合成抗艾滋病药物关键中间体5-甲基尿苷,并对影响菌体生长和5-甲基尿苷转化率的因素进行了考察。采用紫外诱变方法获得高表达核苷磷酸化酶菌种,使5-甲...
关键词:乙酰微小杆菌 5-甲基尿苷 紫外诱变 培养基优化 生物合成 响应曲面法 
一个有关双壳贝类贝壳年轮纹可能的形成机理被引量:1
《中国科学:生命科学》2011年第1期46-52,共7页刘晓军 闫振广 郑桂兰 张贵友 王洪钟 谢莉萍 张荣庆 
国家自然科学基金(批准号:U0831001,40876068);国家高技术研究发展计划(批准号:2010CB126405,2010AA09Z405)资助项目
在合浦珠母贝中,发现了一个边缘部分正在生长中的贝壳.该贝壳边缘部分具有独特的超微结构,在棱柱层中存在中空的尚未被碳酸钙填充的有机鞘,更为独特的是在该边缘部位发现珍珠层的存在.与正常贝壳比较,这一独特贝壳的边缘处于急速生长中...
关键词:双壳贝类 贝壳超微结构 壳内年轮纹 棱柱层 珍珠层 
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