刘刚

作品数:23被引量:136H指数:6
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供职机构:深圳大学生命科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室更多>>
发文主题:里氏木霉纤维素酶毕赤酵母纤维二糖水解酶丝状真菌更多>>
发文领域:生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
发文期刊:《生物技术》《生物技术通报》《微生物学通报》《食品与发酵工业》更多>>
所获基金:深圳市科技计划项目国家自然科学基金深圳市基础研究计划项目广东省自然科学基金更多>>
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里氏木霉中小分子RNA对纤维素酶表达调控的作用被引量:1
《生物技术通讯》2015年第4期535-540,共6页梁智伟 王娟 田生礼 王立岩 刘刚 
深圳市基础研究计划(JCYJ20140418091413587)
目的:通过过表达小分子RNA和抑制小分子RNA功能,研究小分子RNA对里氏木霉QM9414纤维素酶表达的影响。方法:利用含里氏木霉强启动子Ppdc的质粒p-Ppdc'-Tcbh1,分别构建过表达载体和Tough Decoy(Tu D)序列,对里氏木霉QM9414的3个小分子RNA(...
关键词:里氏木霉 非编码小分子RNA Tu D 纤维素酶 
CBHⅡ和EGⅣ的重构基因在里氏木霉中的组成型表达被引量:2
《食品研究与开发》2015年第13期114-117,138,共5页曾敏 邓丽瑜 汤新 刘刚 余少文 
深圳市基础研究计划(JCYJ20120613115323982)
重构基因cbh2-linker-CDeg4表达的融合蛋白同时获得具有外切葡聚糖酶CBH II和内切葡聚糖酶EG IV 2种催化活性,在纤维素降解等方面有着重要应用。本研究通过overlap PCR将里氏木霉丙酮酸脱羧酶(PDC)的启动子、纤维二糖水解酶cbh1的信号...
关键词:基因重构 外切葡聚糖酶Ⅱ 内切葡聚糖酶Ⅳ 丙酮酸脱羧酶启动子 
里氏木霉GH61家族糖苷酶的高效表达及酶学特性研究被引量:4
《微生物学通报》2014年第7期1261-1269,共9页冯飞 王绍文 王娟 刘刚 
深圳市基础研究计划项目(No.JCYJ20120613115323982)
【目的】GH61家族糖苷水解酶具有葡聚糖氧化酶活性,通过对葡聚糖链的随机氧化而破坏木质纤维素的结晶结构,从而使木质纤维素容易被纤维素酶降解。重组表达、纯化获得里氏木霉的GH61家族糖苷水解酶(TrGH61,原名为EGⅣ),并研究其在纤维素...
关键词:里氏木霉 纤维素酶 GH61糖苷酶 金属氧化酶 协同作用 
基于双向电泳技术的里氏木霉高效组成型启动子筛选被引量:2
《菌物学报》2014年第6期1263-1271,共9页禹建腾 谢钧 王绍文 王娟 刘刚 
深圳市基础研究计划(No.JCYJ20120613115323982)
获得强启动子是建立高效表达系统的基础。通过蛋白质双向电泳技术从蛋白质水平全面筛选里氏木霉的组成型启动子,获得了3个表达效率较高的启动子,分别是葡萄糖/核糖醇脱氢酶基因的启动子(grdh)、微体蛋白基因的启动子(hex1)和FAD相关蛋...
关键词:里氏木霉 蛋白质组学 二维电泳 木聚糖酶 
丙酮丁醇梭菌代谢工程菌的构建及其发酵性能被引量:2
《食品与发酵工业》2014年第2期99-105,共7页方雪 刘刚 邢苗 王绍文 
安徽省教育厅高等学校自然科学基金项目(KJ2012Z333)
丙酮丁醇梭菌Clostridium acetobutylicum可以利用葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、纤维二糖等多种底物,发酵糖获得丙酮、丁醇、乙醇等产物,是一种优良的木质纤维素同步糖化发酵菌种。为获得具有更优良发酵性能的木质纤维素发酵菌株,使用代谢...
关键词:丙酮丁醇梭菌 代谢工程 整合型质粒 丁醇 
Thielavia terrestris产纤维素酶液态发酵条件的优化被引量:4
《食品与发酵工业》2014年第1期91-95,共5页余培铠 刘刚 栗荷天 王娟 
深圳市基础研究计划项目(JC201005250041A;JCYJ20120613115323982)
以Thielavia terrestris(ATCC38088)为出发菌株,通过单因素试验研究不同碳源(CMC-Na、Avicel、稻草粉、滤纸、麦麸、可溶性淀粉、葡萄糖)、不同氮源(牛肉膏、蛋白胨、氯化铵、黄豆饼粉、酵母提取物、硫酸铵)、不同的初始pH(3.0~...
关键词:Thielavia terestris 纤维素酶 滤纸酶活 优化 
利用质谱分析法从酶谱鉴定嗜热真菌木聚糖酶被引量:1
《食品研究与开发》2013年第17期116-120,共5页吴亚宁 刘刚 余少文 李水明 王娟 
通过对前期筛选到的一株嗜热真菌Talaromyces thermophilus WYN9进行产木聚糖酶的诱导和非诱导培养。诱导培养的上清液中可以检测到木聚糖酶酶活。在非变性胶和变性胶SDS-PAGE中,诱导和非诱导的酶谱条带差异明显。以非诱导酶谱为对照,...
关键词:质谱 酶谱 11家族木聚糖酶 嗜热踝节菌 进化分析 
丝状真菌中的RNA干扰及其应用技术被引量:6
《生物技术通报》2011年第10期77-83,共7页王绍文 刘刚 邢苗 田生礼 
国家自然科学基金项目(31070044)
RNA干扰是真核生物中相对保守的一种基因转录后表达调控机制,它通过双链RNA介导细胞内mRNA发生特异性降解或翻译抑制,从而调控靶基因的表达。对丝状真菌中RNA压制和减数分裂沉默等现象的研究表明,与动、植物一样,丝状真菌中也存在RNA干...
关键词:RNA干扰 RNA压制 减数分裂沉默 SIRNA 丝状真菌 
根癌农杆菌介导里氏木霉转化体系的建立和条件优化被引量:4
《生物技术》2011年第4期44-48,共5页刘刚 杨长得 康康 邢苗 田生礼 
国家自然科学基金项目(No.31070044);深圳市科技计划项目(No.JC201005280559A;JC201005250041A)资助
目的:采用根癌农杆菌介导的转化方法实现丝状真菌里氏木霉的遗传转化,并优化转化条件。方法:构建含潮霉素抗性基因(hph)的双元载体pCAM-hph后,转化根癌农杆菌LBA4404获得转化菌株。将根癌农杆菌的转化菌株和里氏木霉的分生孢子共培养后...
关键词:里氏木霉 根癌农杆菌 分生孢子 潮霉素磷酸转移酶 双元载体 
酪丁酸梭菌代谢工程菌的构建及其发酵特性被引量:5
《生物工程学报》2010年第2期170-176,共7页杨贵清 刘刚 杨长得 
酪丁酸梭菌Clostridium tyrobutyricum可以利用葡萄糖、木糖、纤维二糖、阿拉伯糖等多种底物进行产酸发酵,主要发酵产物为丁酸和乙酸,是一种适合于木质纤维素同步糖化发酵生产丁酸的菌种。将酪丁酸梭菌乙酸发酵关键基因取代为丁酸发酵...
关键词:酪丁酸梭菌 丁酸 乙酰乙酰辅酶A转移酶 磷酸转乙酰基酶 代谢工程 
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