国家高技术研究发展计划(2006AA020303)

作品数：22被引量：84H指数：6
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相关机构：军事医学科学院沈阳药科大学江南大学江苏江山制药有限公司更多>>
相关期刊：《食品与发酵工业》《生物技术通讯》《食品与生物技术学报》《控制工程》更多>>
相关主题：古龙酸2-酮基-L-古龙酸吡咯喹啉醌山梨糖脱氢酶甲基营养菌更多>>
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甲基营养菌MP688中启动子探针载体的构建被引量：2
《生物技术通讯》2012年第5期644-647,共4页杜宝华 葛欣 王文溪 熊向华 汪建华 何建勇 张惟材 
国家科技支撑计划(2007BAI46B01);国家高技术研究发展计划(2006AA020303)
目的:以半乳糖苷酶基因作为报告基因,构建适于探测甲基营养菌MP688启动子的载体。方法:通过PCR扩增半乳糖苷酶基因片段,连入质粒pCM66构建启动子活性探针载体pMPlacZ。根据MP688的基因组序列设计引物,通过PCR扩增5个pqqA基因、核糖体亚...
关键词：甲基营养菌 半乳糖苷酶 启动子活性检测载体 启动子活性测定 
谷氨酸分批等电结晶中晶种表面积及其粒径对产品粒度分布的影响
《食品与发酵工业》2012年第8期17-22,共6页杨飞 张建华 张宏建 毛忠贵 
国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2006AA020303)
在谷氨酸分批等电结晶过程中,添加晶种与否直接影响产品的粒度分布(CSD)。通过在谷氨酸结晶过程中添加不同晶种的方法,研究晶种表面积及其粒径对结晶的影响,以期获得谷氨酸分批等电结晶中添加晶种的最优条件。实验结果表明,对于平均粒...
关键词：晶种表面积 晶种平均粒径 二次成核 谷氨酸 分批等电结晶 
山梨糖脱氢酶在脱氮副球菌中的表达被引量：2
《生物技术通讯》2012年第2期204-206,共3页朱斌 熊向华 汪建华 何建勇 张惟材 
国家自然科学基金(31100024);国家高技术研究发展计划(2006AA020303);国家科技支撑计划(2007BAI46B01)
目的:在脱氮副球菌PD1222中表达山梨糖脱氢酶(SDH)。方法:从质粒pMD-18T上复制氨苄西林抗性基因Ampr,从酮古龙酸菌中复制SDH基因sdh,先后酶切连接到pIND4质粒上,构建pIND4-Ampr-sdh穿梭质粒;再把pIND4-Ampr-sdh电转入大肠杆菌S17-1λpi...
关键词：山梨糖脱氢酶 脱氮副球菌 接合转移 酮古龙酸菌 
甲基营养菌MP688基因组完成图构建
《生物技术通讯》2011年第4期493-496,共4页智静娟 熊向华 何建勇 汪建华 何涛 张惟材 
国家科技支撑计划(2007BAI46B01);国家高技术研究发展计划(2006AA020303)
目的:在Solexa测序建立的甲基营养菌MP688基因组精细图的基础上,构建MP688基因组完成图。方法:根据MP688基因组序列设计引物,进行常规PCR扩增,填补Scaffold内部缺口;利用BLASTN、BLAT软件分析预测6个Scaffold定位关系;通过组合PCR、长距...
关键词：甲基营养菌 基因组完成图 物理缺口 
甲基营养菌MP681基因组测序文库的构建
《生物技术通讯》2010年第6期775-778,共4页杨璐 熊向华 汪建华 张惟材 
国家高技术研究发展计划(2006AA020303);国家科技支撑计划(2007BAI46B01)
目的:建立甲基营养菌MP681基因组文库,用于鸟枪法测序。方法:提取MP681基因组DNA,经超声随机片段化及T4 DNA聚合酶末端修平处理后,与经SmaⅠ酶切、小牛肠碱性磷酸酶(CIP)去磷酸化处理的pUC19载体连接,电击转化大肠杆菌DH5α感受态,并通...
关键词：甲基营养菌 基因组测序 鸟枪法 文库构建 吡咯喹啉醌 
甲基营养菌甲醇脱氢酶基因的克隆及表达被引量：4
《生物技术通讯》2010年第6期779-782,共4页李淼鑫 熊向华 汪建华 刘党生 张惟材 
国家高技术研究发展计划(2006AA020303);国家科技支撑计划(2007BAI46B01)
目的:从甲基营养菌MP681中扩增甲醇脱氢酶(MDH)基因,在大肠杆菌中表达并检测其活性,同时在MP681中考察该基因对吡咯喹啉醌(PQQ)产生的影响。方法:根据MP681基因组序列设计引物,PCR扩增靶基因mdh,构建表达载体,考察活性,利用接合转移转化...
关键词：甲基营养菌 甲醇脱氢酶 接合转移 吡咯喹啉醌 
山梨糖脱氢酶在乙酸钙不动杆菌中的表达被引量：3
《生物技术通讯》2010年第6期783-786,共4页熊向华 陈伟 汪建华 游松 张惟材 
国家高技术研究发展计划(2006AA020303);国家科技支撑计划(2007BAI46B01)
目的:在乙酸钙不动杆菌Y2004中表达山梨糖脱氢酶。方法:将酮古龙酸菌山梨糖脱氢酶基因sdh以及从pWH1266质粒上扩增的复制原点ori先后酶切连接到pBBR1MCS2质粒上,构建pBBR1MCS2-ori-sdh穿梭质粒;再以pBBR1MCS2-ori-sdh/DH5α为供体菌、...
关键词：山梨糖脱氢酶 乙酸钙不动杆菌 三亲本接合转移 普通酮古龙酸菌 
高渗条件下利用蔗糖提升2-酮基-L-古龙酸生产效率被引量：9
《生物工程学报》2010年第11期1507-1513,共7页陈克杰 周景文 刘立明 刘杰 堵国成 陈坚 
国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2006AA020303);"十一五"国家科技支撑计划(No.2007BAI46B02);国家重点基础研究发展计划(973计划)(No.2007CB714306);国家自然科学基金重点项目(No.20836003)资助~~
旨在进一步提升维生素C前体2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)的生产效率。在详细考察了2-KLG工业化生产过程中渗透压变化规律的基础上,研究了高渗对混合菌系细胞生长和2-KLG合成的影响,提出蔗糖促进伴生菌巨大芽胞杆菌Bacillus megaterium生长,...
关键词：混菌发酵 2-酮基-L-古龙酸 碳源调节 维生素C 高渗 
大肠杆菌pqqL基因敲除与功能分析被引量：3
《微生物学报》2010年第10期1380-1384,共5页熊向华 杨璐 韩晓东 汪建华 张惟材 
国家"863计划"(2006AA020303);国家科技支撑计划项目(2007BAI46B01)~~
【目的】通过构建大肠杆菌pqqL基因缺陷突变株,研究大肠杆菌pqqL基因的功能。【方法】首先通过PCR扩增得到pqqL基因和kan抗性基因,在体外构建线性打靶片段pqqL-kan-pqqL。然后通过Red同源重组敲除大肠杆菌的pqqL基因,构建大肠杆菌缺失...
关键词：吡咯喹啉醌 RED同源重组 基因敲除 
分阶段pH调控提高2-酮基-L-古龙酸生产被引量：7
《生物工程学报》2010年第9期1263-1268,共6页张静 周景文 刘立明 刘杰 陈克杰 堵国成 陈坚 
国家杰出青年基金(No.20625619);国家重点基础研究发展计划(973计划)(No.2007CB714306);江苏高等学校优秀科技创新团队项目;国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2006AA020303);"十一五"国家科技支撑计划(No.2007BAI46B02)资助~~
为了提高酮古龙酸菌Ketogulonicigenium vulgare和巨大芽胞杆菌Bacillus megaterium生产2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)的生产效率,分析了pH对K.vulgare和B.megaterium生长和产酸的影响,发现K.vulgare和B.megaterium的最适生长pH值分别为6.0和8...
关键词：pH调控策略 酮古龙酸菌 巨大芽胞杆菌 
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