国家自然科学基金(30771924)

作品数：13被引量：11H指数：2
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乙型肝炎病毒全基因组1.3倍体重组腺病毒的构建与表达被引量：1
《重庆医科大学学报》2014年第7期947-951,共5页曹漪伊 曲嘉琳 杨庆 万雪梅 唐颖慧 蒋菁容 汤华 
国家自然科学基金资助项目(编号:30771924);重庆市科委面上资助项目(编号:2010BB5359)
目的:构建乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)重组腺病毒,为HBV的相关研究提供一种高效率、便捷的实验手段。方法:将HBV1.3倍体的片段构建到pAdTrack-TO4穿梭载体上,再经限制性核酸内切酶PmeⅠ线性化后转入含有腺病毒骨架载体pAd-Easy...
关键词：乙肝病毒 腺病毒 感染 乙型肝炎S蛋白 
HBx及HBs调节RhoC启动子机制的研究
《医学分子生物学杂志》2012年第4期257-261,共5页秦栋栋 李凯 曲嘉琳 王森 邹程程 盛艳蕊 汤华 
国家自然科学基金（No.30771924）和重庆市科委面上项目（No.2010BB5359）
目的探讨HBx（hepatitis B virus X protein）及HBs（hepatitis B virus S protein）对RhoC启动子的作用机制，分析可能相互作用的启动子调控元件。方法构建RhoC启动子截短突变克隆，双荧光素酶报告分析系统（the dual-luciferase repor...
关键词：HBX HBS RHOC 启动子 Ets-1转录因子 
重组GST-HBx蛋白在表达过程中断裂状况的研究
《医学分子生物学杂志》2011年第5期377-381,共5页蔡雪飞 龚旭阳 杜茜 胡接力 张文露 胡源 黄爱龙 汤华 
国家自然科学基金（No.30771924）
目的 在对乙型肝炎病毒非结构蛋白HBx研究的过程中,发现体外表达HBx蛋白产物的稳定性存在差异.为了了解其中的原因,拟通过原核表达方式进行分析.方法 以包含全长HBV DNA的质粒pEco63为模板,通过PCR反应,扩增HBV X基因全长序列（1～154...
关键词：HBX蛋白 原核表达 GST蛋白 
HBV对肝癌细胞中AKR1C1基因表达的影响被引量：4
《第三军医大学学报》2010年第3期297-299,共3页万涛 张小花 张磊 田园园 丁世家 汤华 
国家自然科学基金(30771924)
目的研究HBV对肝癌细胞中AKR1C1基因表达的影响,并对其作用机制进行初步的探讨。方法RT-PCR和Real-time PCR检测HepG2.2.15和HepG2细胞中AKR1C1基因的差异表达情况;构建AKR1C1基因启动子虫荧光素酶报告质粒,并分别与HBV、HBx、HBs、HBp...
关键词：肝炎病毒 乙型 肝肿瘤 AKR1C1基因 启动区(遗传学) 基因表达 
乙型肝炎病毒HBx蛋白抑制TTRAP启动子活性的体外研究
《生物技术通报》2010年第2期135-139,172,共6页张小花 张磊 田园园 王丽英 黄爱龙 汤华 
国家自然科学基金(30771924)
旨在探讨体外培养条件下HBx蛋白对TTRAP(TRAF and TNF receptor-associated protein)基因转录水平表达的影响。用RT-PCR及Real-time PCR检测TTRAP在HepG2细胞和HepG2.2.15细胞中的表达;构建TTRAP启动子虫荧光素酶报告质粒;分别与HBV、HB...
关键词：HBX蛋白 抑制 TTRAP 启动子活性 HEPG2.2.15细胞 HEPG2细胞 
嘌呤霉素抗性基因捕获载体的构建及在细胞中的功能验证被引量：1
《医学分子生物学杂志》2009年第6期490-493,共4页黄婷婷 田园园 张磊 张小花 万涛 黄爱龙 汤华 
资助项目：国家自然科学基金（No.30771924）
目的构建具有嘌呤霉素抗性基因捕获载体，扩大基因捕获载体的应用范围。方法用经改造的捕获载体（gene trapping vector）稳定转染HepG2．2．15肝癌细胞系，经嘌呤霉素筛选，制作单克隆细胞株。用PCR方法验证该载体的在细胞染色体中的...
关键词：捕获载体 嘌呤霉素抗性基因捕获载体 Hep2.2.15肝癌细胞系 
HBV通过增强DNAJB4启动子活性调节其在HepG2．2．15细胞中的表达被引量：4
《医学分子生物学杂志》2009年第5期391-396,共6页张小花 万涛 张磊 田园园 黄婷婷 汤华 
国家自然科学基金（No.30771924）
目的初步探讨HBV与DNAJB4基因的转录调节作用机制。方法用RT-PCR及Real—timePCR检测HepG2．2．15细胞和HepG2细胞中DNAJB4在mRNA水平上的表达差异。构建DNAJB4启动子虫荧光素酶报告质粒，分别与HBV、HBs、HBp、HBc、HBx表达质粒共转染H...
关键词：乙型肝炎病毒 DNAJB4启动子 HEPG2.2.15细胞 基因表达与调控 
多聚嘧啶序列结合蛋白抑制HBV转录后调节元件的功能
《第三军医大学学报》2009年第15期1440-1442,共3页程丽英 万涛 黄婷婷 蔡雪飞 张文露 黄爱龙 汤华 
国家自然科学基金(30771924)~~
目的探讨多聚嘧啶序列结合蛋白(polypyrimidine tract binding protein,PTB)对乙型肝炎病毒转录后调节元件(HBV posttranscriptional regulatory element,HPRE)功能的影响。方法采用pDM138-HPRE CAT(chloramphenicol acetyltransferase...
关键词：乙型肝炎病毒 多聚嘧啶序列结合蛋白 HBV转录后调节元件 CAT检测 瞬时转染 
人类3-磷酸甘油醛脱氢酶的原核表达、纯化和鉴定
《生物技术通报》2009年第3期102-105,共4页李毅 万涛 杨琴 蔡雪飞 张文露 汤华 
国家自然科学基金(30771924)
为了研究3-磷酸甘油醛脱氧酶(GAPDH)化生物学功能,以pcDNA3.1-GAPDH质粒为模板,PCR方法扩增GAPDH基因,经BamHI和SalI双酶切后插入相同酶切的pET32a(+)载体,构建His-GAPDH融合蛋白表达质粒pET32a(+)-GAPDH;转化JM109感受态细胞,并进行阳...
关键词：三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH) 原核表达 SDS—PAGE 免疫印迹 
多聚嘧啶序列结合蛋白(PTB)与HBV转录后调节元件(HPRE)结合抑制HBV表面抗原的基因表达
《中国生物工程杂志》2009年第2期24-28,共5页程丽英 张小花 李毅 蔡雪飞 胡源 黄爱龙 汤华 
国家自然科学基金(30771924)资助项目
采用RT-PCR验证PTB与HPRE在体外的特异性结合。用HepG2.2.15细胞系、HBs-HPRE瞬时转染Hela细胞探讨PTB对HBV基因表达的影响。结果显示PTB能与HPRE特异性地结合。功能性研究证明PTB可以抑制HepG2.2.15细胞的HBsAg表达量,并呈浓度依赖性。...
关键词：乙型肝炎病毒 HBV转录后调节元件(HPRE) 多聚嘧啶序列结合蛋白(PTB) HBV表面抗原 基因表达 
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